【摘要】：背景:已有研究采用3D打印人工皮膚,但存在皮膚表皮層不能分化為多層等缺陷。目的:優(yōu)化人工皮膚的構建方法,獲得更好的人工皮膚。方法:從牛尾和鼠尾中分別提取與純化膠原。從兒童包皮組織中分離培養(yǎng)原代成纖維細胞和角質(zhì)細胞,再以牛尾(或鼠尾)膠原包埋成纖維細胞,構建真皮層;將角質(zhì)細胞接種于含鼠尾(或牛尾)膠原包埋的成纖維細胞上培養(yǎng)7 d,再氣提培養(yǎng)7 d,獲得人工皮膚。觀察人工皮膚的收縮性、水接觸角,并進行蘇木精-伊紅染色、天狼猩紅染色及免疫熒光染色。結(jié)果與結(jié)論:(1)鼠尾膠原構建人工皮膚真皮層面積下降了50%,牛尾膠原構建人工皮膚真皮層面積只下降了21%;(2)牛尾膠原構建人工皮膚的接觸角與人皮膚接近,比鼠尾膠原構建人工皮膚的疏水性更好;(3)天狼猩紅染色結(jié)果顯示,與鼠尾膠原構建的人工皮膚相比,牛尾膠原構建人工皮膚的膠原折光性更強,膠原排列更有序,纖維更粗;(4)蘇木精-伊紅染色顯示,與鼠尾膠原構建人工皮膚相比,牛尾膠原構建人工皮膚真皮層的表皮可形成更多層;(5)結(jié)果表明,將角質(zhì)細胞接種于牛尾膠原包埋的成纖維細胞上,可構建更好的人工皮膚。
[Abstract]:Background: 3D printing artificial skin has been studied, but the skin epidermis layer can not differentiate into multi-layer. Objective: to optimize the construction method of artificial skin and obtain better artificial skin. Methods: collagen was extracted and purified from bovine tail and rat tail respectively. Primary fibroblasts and keratinocytes were isolated and cultured from the prepuce tissue of children, and then the fibroblasts were embedded in bovine tail (or rat tail) collagen to construct the dermis. Keratinocytes were cultured on fibroblasts containing collagen of rat tail (or bovine tail) for 7 days and then cultured in air for 7 days to obtain artificial skin. The contractility of artificial skin, water contact angle, hematoxylin-eosin staining, Sirius red staining and immunofluorescence staining were observed. Results & conclusion: (1) the dermal area of artificial skin was reduced by 50% and that of bovine tail collagen by 21%. (2) the contact angle of the artificial skin constructed by bovine tail collagen was similar to that of human skin, which was better than that of the artificial skin constructed by rat tail collagen. (3) the results of Sirius red staining showed that compared with the artificial skin constructed by rat tail collagen, the collagen refractive property of the artificial skin was stronger, the arrangement of collagen was more orderly and the fiber was thicker than that of the artificial skin constructed by rat tail collagen. (4) hematoxylin-eosin staining showed that compared with the artificial skin constructed by rat tail collagen, bovine tail collagen could form more layers in the epidermis of artificial skin. (5) the results showed that better artificial skin could be constructed by inoculating keratinocytes on fibroblasts embedded with bovine tail collagen.
【作者單位】： 浙江大學化學工程與生物工程學院;
【基金】：國家自然科學基金(21476197)~~
【分類號】：R318.1

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