不同比例殼聚糖溫敏凝膠生物學(xué)性能及促牙周再生的體內(nèi)外初步研究
發(fā)布時間:2018-06-29 05:24
本文選題:殼聚糖溫敏凝膠 + 牙周膜細胞; 參考:《第四軍醫(yī)大學(xué)》2012年碩士論文
【摘要】:背景 牙周病作為一種口腔內(nèi)感染性疾病,由于它發(fā)病率高,對牙周支持組織造成嚴重破壞,是目前造成成人失牙的主要原因。如何使失去牙周組織得以再生,恢復(fù)牙周組織正常的形態(tài)和功能是牙周病研究的重點和難點。將組織工程技術(shù)和研究成果引入牙周治療研究中,為牙周病的治療提供了新的方法。組織工程主要研究種子細胞、支架材料、信號分子之間的相互作用及效能,將三者單獨或者聯(lián)合運用于牙周病治療中,均可使牙周再生成功的可能性提高。但種子細胞來源、使用濃度,支架材料來源和生物相容性,信號分子的作用機制等問題至今仍不十分清楚。 最近幾年,將殼聚糖溫敏凝膠作為一種生物可降解材料越來越引起研究者的關(guān)注。它被廣泛用作藥物載體、支架材料、傷口愈合等方面。溫敏凝膠在人的正常體溫下(37℃)下變成凝膠,生物相容性好,利于細胞粘附和增殖。目前一般殼聚糖溫敏凝膠中殼聚糖和甘油磷酸鈉之間的體積比是9:1,而有人研究當兩者比例在7:1、pH為7.2時,在37℃下凝膠時間為10min,將其作為注射型支架材料,更適合細胞增殖和粘附,并且方便操作。 目的 制備不同比例的殼聚糖溫敏凝膠并且檢測比較其理化性能,通過體外和體內(nèi)實驗比較不同比例凝膠材料的生物相容性、牙周組織再生潛能,從開發(fā)研究組織工程支架材料的角度,對殼聚糖溫敏凝膠促進牙周及口腔組織再生的可行性做初步評價。 方法和結(jié)果 1不同比例殼聚糖溫敏凝膠的制備及理化性能研究 各取1ml濃度為56%(m/v)β-GP逐滴加入9ml和7ml的殼聚糖鹽酸溶液中,攪拌10min,獲得9:1和7:1殼聚糖/β-GP溶液。在37℃水浴中形成凝膠。通過比較凝膠時間、粘度變化、溶脹率、降解率、微觀結(jié)構(gòu)等觀察指標來評價二種凝膠的理化性能差異。結(jié)果顯示:9:1組的凝膠時間長于7:1比例組;9:1組的粘度大于7:1組;9:1和7:1組的溶脹率無明顯差異;9:1組比7:1組降解慢;9:1組和7:1組的凝膠孔徑無明顯差異。 2不同比例殼聚糖凝膠對人牙周膜細胞的生物相容性影響 將人PDLCs復(fù)合殼聚糖凝膠,比較9:1組和7:1組殼聚糖凝膠對PDLCs粘附、增殖影響,評價材料的生物相容性。DAPI染色顯示細胞在殼聚糖凝膠表面和內(nèi)部的粘附、增殖,,MTT法比較兩種殼聚糖凝膠浸提液對細胞增殖的影響。 結(jié)果顯示:9:1組和7:1組殼聚糖凝膠都能促進人PDLCs的粘附和增殖,兩者之間無明顯差異,均具有良好的生物相容性。 3不同比例殼聚糖凝膠促牙周損傷修復(fù)的體內(nèi)實驗建立狗第二、三前磨牙的III度根分叉缺損模型,將9:1組和7:1組殼聚糖凝膠分別注入狗牙周缺損區(qū),12周后通過大體觀察、X線、CT、組織學(xué)比較兩種比例殼聚糖凝膠對牙周組織缺損修復(fù)的影響差異。結(jié)果顯示,9:1組和7:1組均能促進牙周組織再生,具有良好的生物相容性。 結(jié)論 9:1組和7:1組殼聚糖溫敏凝膠均具有良好的理化性能,體外實驗表明兩組都可以作為支架材料提供一個三維空間環(huán)境利于細胞的生長,促進PDLCs粘附和增殖,體內(nèi)實驗表明兩組都具有良好生物相容性、可降解性,可促進牙周組織缺損的修復(fù)和再生,有望作為新型可注射型支架材料用于牙周再生的深入研究和臨床開發(fā)。
[Abstract]:Background
periodontal disease as an infectious disease in oral cavity is the main cause of periodontal disease due to its high incidence and serious damage to periodontal support tissue .
Chitosan temperature - sensitive gel has been widely used as drug carrier , scaffold material and wound healing in recent years . It has been widely used as drug carrier , scaffold material , wound healing , etc . Temperature - sensitive gel is used widely as drug carrier , scaffold material , wound healing , etc . Temperature - sensitive gel is used widely as drug carrier , scaffold material , wound healing , etc . The volume ratio between chitosan and sodium phosphate in chitosan temperature - sensitive gel is 9 : 1 .
Purpose
The feasibility of chitosan temperature - sensitive gel for promoting periodontal and oral tissue regeneration was preliminarily evaluated by comparing the biocompatibility and periodontal tissue regeneration potential of different proportion of gel materials in vitro and in vivo by comparing the biocompatibility and periodontal tissue regeneration potential of different proportion of gel materials in vitro and in vivo experiments .
Methods and Results
Preparation and Physical and Chemical Properties of Chitosan Thermosensitive Gel with Different Proportion
The physical and chemical properties of two gels were evaluated by comparing the gel time , viscosity change , swelling ratio , degradation rate and microstructure .
The viscosity of group 9 : 1 was more than 7 : 1 ;
There was no significant difference in the swelling ratio of 9 : 1 and 7 : 1 group .
The ratio of 9 : 1 was slower than that in 7 鈭
本文編號:2081036
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