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關(guān)節(jié)腔內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與同種異體骨的共培養(yǎng)

發(fā)布時(shí)間:2017-12-27 15:20

  本文關(guān)鍵詞:關(guān)節(jié)腔內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與同種異體骨的共培養(yǎng) 出處:《中國(guó)組織工程研究》2016年19期  論文類型:期刊論文


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【摘要】:背景:構(gòu)建組織工程軟骨的時(shí)候,同種異體骨與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞是常用的支架材料和種子細(xì)胞,以往大多采用體外培養(yǎng)的方式。膝關(guān)節(jié)內(nèi)游離體可以長(zhǎng)期存在于關(guān)節(jié)腔中,并維持一定的軟骨組織學(xué)特性。因此,關(guān)節(jié)腔可能為軟骨細(xì)胞的生長(zhǎng)和發(fā)育提供良好的環(huán)境條件。目的:探討在關(guān)節(jié)腔內(nèi)骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與同種異體骨復(fù)合培養(yǎng)的效果。方法:納入5只新西蘭新生白兔進(jìn)行骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞分離與培養(yǎng),利用1只成年新西蘭白兔制備同種異體骨,進(jìn)行骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與同種異體骨復(fù)合。實(shí)驗(yàn)分組:腔內(nèi)培養(yǎng)組將骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞與同種異體骨復(fù)合物培養(yǎng)于動(dòng)物關(guān)節(jié)腔內(nèi),正常對(duì)照組設(shè)為同腔內(nèi)正常軟骨,體外培養(yǎng)組實(shí)施常規(guī)體外培養(yǎng)。培養(yǎng)4,8,12周進(jìn)行組織學(xué)蘇木精-伊紅染色觀察及Ⅱ型膠原免疫組織化學(xué)染色觀察。結(jié)果與結(jié)論:1培養(yǎng)12周進(jìn)行蘇木精-伊紅染色和觀察,正常對(duì)照組細(xì)胞質(zhì)和軟骨基質(zhì)出現(xiàn)紅染,細(xì)胞核出現(xiàn)藍(lán)染,軟骨細(xì)胞按照一定的方向呈緊密狀有序排列。腔內(nèi)培養(yǎng)組細(xì)胞質(zhì)和軟骨基質(zhì)出現(xiàn)紅染,細(xì)胞核出現(xiàn)藍(lán)染,支架材料基本吸收。軟骨細(xì)胞長(zhǎng)入支架之中,細(xì)胞按照一定應(yīng)力方向排列,且形態(tài)變小。體外培養(yǎng)組軟骨細(xì)胞出現(xiàn)大量增殖,但呈無(wú)序狀排列;2經(jīng)免疫組織化學(xué)染色和觀察,計(jì)數(shù)可得,隨著培養(yǎng)時(shí)間的推移,腔內(nèi)培養(yǎng)組的A值呈現(xiàn)出不斷上升的情況,體外培養(yǎng)組和正常對(duì)照組均未出現(xiàn)明顯的改變。且培養(yǎng)4,8,12周,正常對(duì)照組和腔內(nèi)培養(yǎng)組的A值均顯著高于體外培養(yǎng)組(P0.05)。培養(yǎng)4,8周,腔內(nèi)培養(yǎng)組的A值均顯著低于正常對(duì)照組(P0.05)。但培養(yǎng)12周,腔內(nèi)培養(yǎng)組與正常對(duì)照組A值差異無(wú)顯著性意義(P0.05);3實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,在體外和關(guān)節(jié)腔內(nèi)環(huán)境下,均可以利用同種異體骨與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞復(fù)合培養(yǎng)獲得組織工程軟骨,且關(guān)節(jié)腔內(nèi)培養(yǎng)可以獲得更好的培養(yǎng)效果。
[Abstract]:Background: when constructing tissue-engineered cartilage, allogeneic bone and bone marrow mesenchymal stem cells are commonly used scaffold materials and seed cells. In the past, most of them were cultured in vitro. The free body in the knee joint can exist in the articular cavity for a long time and maintain a certain histological characteristics of the cartilage. Therefore, the articular cavity may provide good environmental conditions for the growth and development of chondrocytes. Objective: To investigate the effect of bone marrow mesenchymal stem cells (MSCs) combined with allograft bone in the articular cavity. Methods: a total of 5 New Zealand white rabbits were enrolled in this study. Bone marrow mesenchymal stem cells were isolated and cultured. 1 adult New Zealand white rabbits were used to prepare allogenic bone, and bone marrow mesenchymal stem cells were combined with allogeneic bone. Experimental group: in vivo culture group, bone marrow mesenchymal stem cells and allograft bone complex were cultured in animal joint cavity, normal control group was set as normal cartilage in same cavity, and in vitro culture group was cultured in vitro. The 4,8,12 weeks were observed and observed by hematoxylin eosin staining and collagen immunohistochemical staining. Results and conclusion: 1 after 12 weeks of hematoxylin eosin staining and observation, the normal control group and the cytoplasm of cartilage matrix red staining, nuclei appear blue, cartilage cells in a certain direction is closely aligned. Intracavitary culture group, cytoplasm and cartilage matrix red staining, nuclei appeared blue, the basic scaffold material absorption. The chondrocytes grow into the scaffold, and the cells are arranged in a certain direction of stress, and the morphology becomes smaller. In vitro culture of chondrocytes was the emergence of a large number of proliferation, but in a disordered arrangement; 2 by immunohistochemical staining and counting can be observed, with the increase of culture time, intracavitary culture group A values showing a rising situation, group and normal control group were cultured in vitro without noticeable change. The A values in the normal control group and the intracavitary culture group were significantly higher than those in the culture group (P0.05) for 4,8,12 weeks. For 4,8 weeks, the A value of the intracavitary culture group was significantly lower than that of the normal control group (P0.05). But 12 weeks of culture, intracavitary culture group and normal control group A value had no significant difference (P0.05; 3) the experimental results show that in vitro and joint cavity environment, can use bone allograft and bone marrow mesenchymal stem cells co cultured for tissue engineering cartilage, articular cavity and culture can get training effect better.
【作者單位】: 濱州醫(yī)學(xué)院煙臺(tái)附屬醫(yī)院骨關(guān)節(jié)科;濱州醫(yī)學(xué)院煙臺(tái)附屬醫(yī)院創(chuàng)傷科;
【分類號(hào)】:R68;R318.08
【正文快照】: 文章快速閱讀:文題釋義:局部微環(huán)境:在將構(gòu)建的組織工程軟骨植入局部進(jìn)行修復(fù)治療的過(guò)程中,會(huì)受到局部微環(huán)境的較大影響。局部的實(shí)際理化環(huán)境與各種生長(zhǎng)因子,以及力學(xué)刺激等均會(huì)對(duì)組織工程軟骨產(chǎn)生極大的影響,并直接影響到軟骨修復(fù)效果。為此,在進(jìn)行組織工程軟骨構(gòu)建的時(shí)候,可

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