本文關(guān)鍵詞：羥丁基殼聚糖用于心血管支架涂層的研究　出處：《中國海洋大學(xué)》2013年碩士論文　論文類型：學(xué)位論文

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【摘要】：心血管疾病是人類健康的最大殺手之一，目前臨床的主要治療方法是經(jīng)皮腔冠狀動(dòng)脈介入治療，該治療方法中需要將心血管支架置入血管中，幫助保持血管中血流通暢。近年來為了改進(jìn)金屬裸支架使用過程中的不良副作用，人們研究了一種藥物洗脫支架進(jìn)行血管置入，但是，藥物洗脫支架的使用仍然存在一些長期安全性的問題，因此，研發(fā)一種能夠有效避免支架置入后的再狹窄等副作用的支架極為迫切。 本文通過對(duì)殼聚糖進(jìn)行醚化改性，得到能夠溶于水的羥丁基殼聚糖衍生物，對(duì)其基本理化性質(zhì)和水溶液的細(xì)胞相容性進(jìn)行了研究，并且評(píng)價(jià)了其作為細(xì)胞三維培養(yǎng)無酶傳代和作為心血管支架涂層的可行性。 堿性條件下通過殼聚糖與1,2-環(huán)氧丁烷的醚化反應(yīng)，制備了三種分子量的羥丁基殼聚糖溫敏水凝膠樣品。流變學(xué)性質(zhì)分析和試管倒置法結(jié)果顯示，在不添加任何交聯(lián)劑的條件下，分子量為290kDa的樣品，在50°C時(shí)仍不能成膠；分子量為530kDa的樣品成膠溫度為40°C；而分子量為960kDa的樣品的成膠溫度為26°C，即分子量越大的羥丁基殼聚糖更易于成膠，成膠溫度較低。并且羥丁基的這種溶膠到凝膠的轉(zhuǎn)變具有可逆性。掃描電鏡照片可以看出水凝膠內(nèi)部呈多孔網(wǎng)狀三維結(jié)構(gòu)，孔壁致密光滑，，孔徑為50-200μm，并且分子量較大的羥丁基殼聚糖內(nèi)部結(jié)構(gòu)比分子量小的更緊密，孔狀結(jié)構(gòu)呈現(xiàn)一定的片層結(jié)構(gòu)。水凝膠表面呈平滑舒緩的坡谷形態(tài)。 MTT實(shí)驗(yàn)和NO測定結(jié)果顯示，羥丁基殼聚糖對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖和NO的分泌均具有促進(jìn)作用。分子量為290、530和960kDa的羥丁基殼聚糖，隨著其分子量的增大，對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖的促進(jìn)作用增強(qiáng)；且隨著分子量的增大，細(xì)胞分泌NO的量也有所增多。當(dāng)羥丁基殼聚糖作用濃度為25、50、250、500和1000μg/ml時(shí)，隨著作用濃度的增大，對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖的促進(jìn)作用逐漸增強(qiáng)；且隨著作用濃度的增大，細(xì)胞分泌NO的量也有所增多。作用時(shí)間分別為24、48和72h時(shí)，隨著作用時(shí)間的增長，其對(duì)人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞的增殖的促進(jìn)作用逐漸增強(qiáng)；且隨著作用時(shí)間的增長，細(xì)胞分泌NO的量也有所增多。因此羥丁基殼聚糖水溶液具有良好的細(xì)胞相容性。 將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞接種到羥丁基殼聚糖水凝膠表面進(jìn)行培養(yǎng)，細(xì)胞形態(tài)為正常的卵圓形或多邊形，但出現(xiàn)了較為明顯的聚集現(xiàn)象和層疊現(xiàn)象，細(xì)胞能夠正常增殖并進(jìn)行傳代。利用羥丁基殼聚糖在成膠溫度以下的環(huán)境中呈溶膠狀態(tài)，將細(xì)胞混入，再將混懸液置于高于成膠溫度環(huán)境，使其自然成膠，從而進(jìn)行細(xì)胞的三維培養(yǎng)。對(duì)三維培養(yǎng)細(xì)胞進(jìn)行熒光觀察，發(fā)現(xiàn)細(xì)胞呈規(guī)則圓形，生長良好，可正常增殖。因此，羥丁基殼聚糖溫敏水凝膠具有作為細(xì)胞三維培養(yǎng)基體的可行性。 將心血管支架基體—鈷鉻合金進(jìn)行強(qiáng)堿處理后，0.3%羥丁基殼聚糖涂覆5層，得到完全的致密的表面涂層，涂層后的金屬表面仍然能夠看出強(qiáng)堿處理形成的溝槽形貌。模擬體液動(dòng)態(tài)環(huán)境21d時(shí)，涂層仍然基本完整。涂層后的金屬比未涂層的金屬其溶血率顯著降低，且動(dòng)態(tài)凝血時(shí)間有所延長，說明涂層支架具有比未涂層支架更好的血液相容性。將人臍靜脈內(nèi)皮細(xì)胞接種到涂層支架表面，涂層支架表面的細(xì)胞初始粘附率低于未涂層支架，但細(xì)胞增殖速度大于未涂層支架，涂層支架表面細(xì)胞出現(xiàn)聚集現(xiàn)象，因此，涂層支架具有較好的細(xì)胞相容性，有望作為一種新型支架涂層。
[Abstract]:Cardiovascular disease is one of the biggest killer of human health. The main way of clinical treatment is percutaneous coronary intervention. In this treatment, cardiovascular stent should be inserted into the blood vessels to help maintain blood flow in the blood vessels. In recent years, in order to improve the use of bare metal stents in the process of adverse side effects, people of a drug eluting stent vascular implantation, however, there are still some problems in the long-term safety of drug-eluting stent use, therefore, the development of a can effectively prevent stent restenosis and other side effects of the pole urgent.
【學(xué)位授予單位】：中國海洋大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2013
【分類號(hào)】：R318.08

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本文編號(hào)：1343235