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新型警報(bào)素IL-33在膠質(zhì)瘤中表達(dá)及其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲能力的影響

發(fā)布時(shí)間:2017-06-27 08:14

  本文關(guān)鍵詞:新型警報(bào)素IL-33在膠質(zhì)瘤中表達(dá)及其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲能力的影響,,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。


【摘要】:背景:膠質(zhì)瘤是起源中樞神經(jīng)系統(tǒng)中最常見的原發(fā)腫瘤,其中惡性膠質(zhì)瘤腫瘤占膠質(zhì)瘤的70%。膠質(zhì)瘤是起源中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見和致死的腫瘤,具有高復(fù)發(fā)率和高死亡率的特點(diǎn)。IL-33是IL-1超家族中的新的成員,可以通過結(jié)合IL-1受體ST2發(fā)揮其功能作用。它可以激活一些信號(hào)通路,如NK-κB、p38和胞外信號(hào)調(diào)節(jié)激酶ERK1/2等,從而引起趨化因子及Th2相關(guān)的細(xì)胞因子合成。研究表明,IL-33與許多疾病的病理生理有關(guān),比如肥胖、哮喘、關(guān)節(jié)炎等。近年來關(guān)于IL-33的研究進(jìn)展迅速,特別是與腫瘤的侵襲密切相關(guān)。趨化因子的分泌是一個(gè)復(fù)雜且被嚴(yán)格控制的過程,胞內(nèi)信號(hào)通路對(duì)于每一種趨化因子和細(xì)胞類型的調(diào)節(jié)都是特定的。目前尚不十分清楚IL-33在膠質(zhì)瘤中是否也能夠激活相應(yīng)的信號(hào)通路,從而影響膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展。目的:研究IL-33在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)情況以其對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)的影響。研究方法:通過實(shí)時(shí)定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)(qRT-PCR)檢測(cè)IL-33在膠質(zhì)細(xì)胞瘤組織與正常腦組織間的基因表達(dá)水平。采用Western blot、免疫組化S-P法檢測(cè)IL-33正常腦組織和不同級(jí)別膠質(zhì)瘤組織中的蛋白表達(dá)水平。應(yīng)用細(xì)胞免疫熒光檢測(cè)IL-33及其受體ST2在膠質(zhì)瘤細(xì)胞的表達(dá)定位情況。應(yīng)用Transwell小室檢測(cè)IL-33對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U251侵襲的影響。Western blot檢測(cè)IL-33處理后,膠質(zhì)瘤細(xì)胞的NK-κB及其磷酸化狀態(tài)的表達(dá)變化情況。結(jié)果:qRT-PCR、Western blot及免疫組化結(jié)果均顯示,IL-33在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)高于正常腦組織。細(xì)胞免疫熒光顯示,IL-33表達(dá)主要定位細(xì)胞核,而ST2主要位于細(xì)胞膜上。體外功能實(shí)驗(yàn)中,IL-33促進(jìn)了U251細(xì)胞的侵襲,并伴有NK-κB蛋白表達(dá)上調(diào)。結(jié)論:IL-33在膠質(zhì)瘤組織中高表達(dá),并促進(jìn)了膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲。因此,對(duì)IL-33作用機(jī)制進(jìn)行深入研究,將為膠質(zhì)瘤的臨床診療提供新的方向,具有重要的臨床意義。
【關(guān)鍵詞】:IL-33 膠質(zhì)瘤 侵襲 NK-κB
【學(xué)位授予單位】:南京醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號(hào)】:R739.41
【目錄】:
  • 中文摘要6-8
  • 英文摘要8-10
  • 前言10-12
  • 材料與方法12-25
  • 1. 實(shí)驗(yàn)材料12-17
  • 1.1 主要儀器12-13
  • 1.2 主要試劑13-14
  • 1.3 主要試劑配置14-17
  • 2. 實(shí)驗(yàn)方法17-24
  • 2.1 臨床標(biāo)本收集17
  • 2.2 膠質(zhì)瘤組織總RNA提取17-18
  • 2.3 細(xì)胞總RNA提取18-19
  • 2.4 逆轉(zhuǎn)錄合成cDNA19
  • 2.5 Real-time PCR19-20
  • 2.6 細(xì)胞培養(yǎng)20-21
  • 2.7 蛋白印跡分析方法(Western Blot)21-22
  • 2.8 Transwell小室侵襲實(shí)驗(yàn)22
  • 2.9 免疫組化S-P法染色22-23
  • 2.10 細(xì)胞爬片免疫熒光實(shí)驗(yàn)23-24
  • 3. 統(tǒng)計(jì)分析24-25
  • 結(jié)果25-31
  • 1. IL-33在膠質(zhì)瘤組織的轉(zhuǎn)錄和翻譯水平中表達(dá)均上調(diào)25-26
  • 2. IL-33的mRNA表達(dá)水平與膠質(zhì)瘤患者臨床病理特征之間的關(guān)系26-27
  • 3. 高表達(dá)的IL-33預(yù)示膠質(zhì)瘤患者的預(yù)后不佳27-28
  • 4. IL-33在膠質(zhì)瘤細(xì)胞的定位與表達(dá)28-29
  • 5. IL-33對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲能力的影響29
  • 6. IL-33上調(diào)了膠質(zhì)瘤細(xì)胞中p-NF-κB及NF-κB蛋白的表達(dá)29-31
  • 討論31-33
  • 結(jié)論33-34
  • 參考文獻(xiàn)34-39
  • 綜述39-51
  • 參考文獻(xiàn)45-51
  • 攻讀碩士期間發(fā)表文章情況51-52
  • 縮略詞表52-53
  • 致謝53-54

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本文編號(hào):489071

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