第一部分：海藻糖對過表達ALS相關(guān)毒性蛋白質(zhì)NSC-34細胞的干預研究 目的：本研究中，我們采用過表達ALS疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的細胞為模型觀察海藻糖對這些毒性蛋白質(zhì)的自噬性降解有無促進作用，并觀察其能否減輕這些蛋白質(zhì)對細胞帶來的毒性作用。為探索自噬調(diào)控對ALS病理的影響提供體外實驗依據(jù)。 方法：用瞬時轉(zhuǎn)染的方法在NSC-34細胞系中過表達WT TDP-43，與家族型ALS相關(guān)的Q331K TDP-43，M337V TDP-43突變蛋白質(zhì)，TDP-43的C末端片段TDP-25和TDP-35，以及人WT SOD1和人突變型SOD1-G93A蛋白質(zhì)。再給予用不同濃度的海藻糖（25mM、50mM和100mM）進行干預。用免疫印跡法檢測LC3-II及P62這兩種自噬通路的標記分子以及各種疾病相關(guān)蛋白質(zhì)的表達。觀察海藻糖對各類細胞的過表達蛋白質(zhì)是否有促進清除的作用。并應用自噬通路的特異性阻斷劑3-MA和wortmannin來進一步驗證海藻糖的促蛋白質(zhì)降解作用機制是否在自噬通路上。應用自噬通路中自噬體和溶酶體的融合的阻斷劑bafilomycin A1來明確海藻糖的對LC3-II的上調(diào)作用機制。...

【文章頁數(shù)】：108 頁

【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
英文縮寫
引言
第一部分 海藻糖對過表達 ALS 相關(guān)毒性蛋白質(zhì) NSC-34 細胞的干預研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    討論
    小結(jié)
    參考文獻
第二部分 海藻糖對 ALS 轉(zhuǎn)基因小鼠突變 SOD1 的自噬性降解及炎癥反應的干預研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    討論
    小結(jié)
    參考文獻
第三部分 海藻糖對 ALS 轉(zhuǎn)基因小鼠病程進展及行為學的干預研究
    前言
    材料與方法
    結(jié)果
    附圖
    附表
    討論
    小結(jié)
    參考文獻
結(jié)論
綜述 自噬調(diào)控在神經(jīng)變性病中的研究進展
    參考文獻
致謝
個人簡歷



本文編號：4045143