目的：采用Y27632特異性抑制Rho/ROCK信號(hào)通路，觀察該干預(yù)對(duì)體外培養(yǎng)的脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的影響，并進(jìn)一步探討其影響增殖的可能機(jī)制。 方法：原代培養(yǎng)大鼠的脊髓星形膠質(zhì)細(xì)胞，實(shí)驗(yàn)分為對(duì)照組（正常培養(yǎng)基）和Y27632干預(yù)組(培養(yǎng)基中含10μMY27632)；在不同時(shí)間點(diǎn)（0、6、12、24和48h），計(jì)數(shù)各組細(xì)胞的數(shù)量，應(yīng)用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞周期的分布，westernblot檢測(cè)星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期相關(guān)蛋白（cyclinD1、cyclinE、CDK4、P27）和p-ERK的表達(dá)情況，進(jìn)一步采用熒光免疫細(xì)胞染色法檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組攝取Brdu的細(xì)胞比例與ERK信號(hào)途徑的關(guān)系。 結(jié)果：與對(duì)照組相比，Y27632干預(yù)組細(xì)胞數(shù)量顯著增加(6、12、24和48h)(P<0.05)，同時(shí)處于S期細(xì)胞的百分率明顯上升（6h和12h,P<0.05）；在不同的時(shí)間點(diǎn)，Y27632組細(xì)胞周期相關(guān)蛋白（cyclinD1、CDK4，cyclinE）及p-ERK1/2的表達(dá)量明顯高于對(duì)照組；與對(duì)照組相比，Y27632干預(yù)組BrdU（+）的細(xì)胞比例在6、12、24h點(diǎn)明顯增加(P<0.05)，...

【文章頁(yè)數(shù)】：45 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【部分圖文】：

圖1.培養(yǎng)細(xì)胞的免疫組化鑒定(A)培養(yǎng)純化的F2代星形膠質(zhì)細(xì)胞的純度鑒定：綠色為GFAP陽(yáng)性的星形

華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文結(jié)果1.體外培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞的觀察和鑒定原代培養(yǎng)的星形膠質(zhì)細(xì)胞在培養(yǎng)24h后，大部分細(xì)胞已貼壁，貼壁細(xì)胞呈圓形或橢圓形....

圖2.星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖活力和數(shù)量的檢測(cè)

華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文2.Y27632對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞增殖的影響與對(duì)照組相比，Y27632(10μM)干預(yù)組在12、24、48h時(shí)間點(diǎn)的細(xì)胞活力....

圖3.Y27632對(duì)AST細(xì)胞周期進(jìn)展的影響

華中科技大學(xué)碩士學(xué)位論文.Y27632對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期分布的影響在0、6、12、24、48h點(diǎn)，采用流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)各組AST的細(xì)胞周期....

圖4.Y27632對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響

圖4.Y27632對(duì)星形膠質(zhì)細(xì)胞細(xì)胞周期相關(guān)蛋白表達(dá)的影響（A）westernblot代表圖片顯示Y27632對(duì)cyclinD1、cyclin....

本文編號(hào)：3912954