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大鼠腦缺血再灌注損傷中ERK1/2的表達(dá)對(duì)自噬的影響

發(fā)布時(shí)間:2023-12-28 17:35
  目的:通過(guò)觀察并記錄ERK1/2的表達(dá)程度及自噬蛋白beclin1及LC3-II的程度,探討在大鼠腦缺血再灌注損傷中ERK1/2與自噬之間的關(guān)系。 方法: 1.將健康的同批Wistar大鼠隨機(jī)分成假手術(shù)組、模型組及給藥組;模型組及給藥組又各自分為缺血1小時(shí)再灌注24小時(shí)、缺血3小時(shí)再灌注24小時(shí)等兩組,即5個(gè)組。 2.通過(guò)用線栓法來(lái)制作大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞模型(MCAO),用MEK1/2抑制劑—U0126來(lái)干預(yù)損傷模型制備給藥組。 3.將完成24h的再灌注過(guò)程的大鼠或者假手術(shù)組過(guò)24h小時(shí)后,給予測(cè)證神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分。 4.完成神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分后給予大劑量麻醉藥處死。 5.用TTC染色法測(cè)定5個(gè)實(shí)驗(yàn)組動(dòng)脈的腦梗死體積并做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 6.用HE染色法觀察5個(gè)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞形態(tài)學(xué)的改變。 7.用蛋白印跡雜交法觀察并記錄ERK1/2、beclin1及LC3-II的表達(dá)程度,做統(tǒng)計(jì)學(xué)分析。 結(jié)論: 1.在大鼠腦缺血再灌注損傷模型中,隨著缺血時(shí)間的增加,ERK1蛋白的表達(dá)量增多,pERK1/2蛋白、beclin1蛋白、LC-3II蛋白的表達(dá)量均減少;肢體行為能力更差,腦部梗死體積更大,細(xì)胞形態(tài)變異及死亡...

【文章頁(yè)數(shù)】:44 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
前言
摘要
Abstract
英文縮寫詞表
第1章 緒論
    1.1 ERK1/2 簡(jiǎn)介
    1.2 MAPKs
    1.3 ERK1/2 信號(hào)傳導(dǎo)途徑
    1.4 U0126 簡(jiǎn)介
    1.5 ERK1/2 與自噬
第2章 綜述
    2.1 ERK1/2 的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
    2.2 ERK1/2 與腫瘤
        2.2.1 ERK1/2 與消化系統(tǒng)腫瘤
        2.2.2 ERK1/2 與泌尿生殖系統(tǒng)腫瘤
        2.2.3 其他
    2.3 ERK1/2 與缺血再灌注損傷
        2.3.1 ERK1/2 與谷氨酸依賴性缺血再灌注損傷
        2.3.2 ERK1/2 與酸敏感離子通道介導(dǎo)的非谷氨酸依賴性缺血再灌注損傷
    2.4 ERK1/2 與自噬
    2.5 ERK1/2 與哮喘
    2.6 展望
第3章 材料與方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 實(shí)驗(yàn)試劑
        3.1.2 實(shí)驗(yàn)儀器
        3.1.3 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 主要溶液的配置
        3.2.2 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物分組
        3.2.3 大鼠大腦中動(dòng)脈栓塞模型(MCAO)制備
        3.2.4 神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分
        3.2.5 紅四氮唑(TTC)染色
        3.2.6 蘇木精-伊紅(HE)染色
        3.2.7 蛋白質(zhì)印跡雜交(Western Blot)
        3.2.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
第4章 結(jié)果
    4.1 神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分分析結(jié)果
    4.2 TTC 染色結(jié)果
    4.3 HE 染色結(jié)果
    4.4 Western Blot 結(jié)果
        4.4.1 各組大鼠大腦皮質(zhì)中 ERK1/2 的表達(dá)及活化
        4.4.2 各組大鼠大腦皮質(zhì)中 beclin 1 的表達(dá)
        4.4.3 各組大鼠大腦皮質(zhì)中 LC-3 II 的表達(dá)
第5章 討論
    5.1 模型組之間比較
    5.2 ERK1/2 與假手術(shù)組比較
    5.3 自噬相關(guān)蛋白與假手術(shù)組比較
    5.4 模型組與給藥組比較
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
作者簡(jiǎn)介及在學(xué)期間所取得的科研成果
致謝



本文編號(hào):3875869

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