背景:膠質(zhì)瘤是人類中樞神經(jīng)系統(tǒng)最常見的原發(fā)性腫瘤,其特點(diǎn)是快速浸潤性生長方式,使手術(shù)完全切除成為不可能。盡管在腫瘤診斷和治療方面取得了進(jìn)展,包括手術(shù)、放療和化療,但WHOⅡ級膠質(zhì)瘤患者中位生存時(shí)間為5年,WHOⅢ級膠質(zhì)瘤患者中位生存時(shí)間為2至3年,WHOⅣ級為14.6月。對膠質(zhì)瘤細(xì)胞發(fā)生機(jī)制的研究對膠質(zhì)瘤的治愈來說至關(guān)重要,研究發(fā)現(xiàn)S100A12蛋白及HAX-1蛋白在細(xì)胞內(nèi)扮演著重要的作用,參與許多生命調(diào)節(jié)環(huán)節(jié),目前,S100A12已經(jīng)被證明是星形膠質(zhì)細(xì)胞活化的標(biāo)志物。HAX-1蛋白因?yàn)槠渚哂袕V泛的生物活性而受到關(guān)注,其中包括如調(diào)節(jié)細(xì)胞遷移、抗細(xì)胞凋亡、和調(diào)節(jié)細(xì)胞內(nèi)吞等這些生物學(xué)功能。其中,我們發(fā)現(xiàn),其在不同類型腫瘤的機(jī)制研究中起到參與腫瘤細(xì)胞侵襲、轉(zhuǎn)移以及與腫瘤細(xì)胞的發(fā)生、發(fā)展息息相關(guān)。但是,目前來說,蛋白S100A12和HAX-1蛋白在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的調(diào)節(jié)機(jī)制研究較少,其作用機(jī)制尚未得到充分的解析。目的:1、S100鈣結(jié)合蛋白A12(S100A12)作為S100蛋白家族成員之一,其在中性粒細(xì)胞中的大量表達(dá),淋巴細(xì)胞和單核細(xì)胞低表達(dá)。S100蛋白家族參與調(diào)控許多器官惡性腫瘤病理過程中都...

【文章頁數(shù)】：82 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
第一章 緒論
第二章 S100A12對細(xì)胞膠質(zhì)瘤生長影響的研究
    2.1 前言
    2.2 材料與方法
        2.2.1 患者與標(biāo)本
        2.2.2 細(xì)胞系
        2.2.3 溶液配制
        2.2.4 儀器設(shè)備
        2.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.6 免疫組織化學(xué)
        2.2.7 細(xì)胞mRNA的提取
        2.2.8 逆轉(zhuǎn)錄PCR
        2.2.9 S100A12基因沉默
        2.2.10 細(xì)胞增殖分析
        2.2.11 組織和細(xì)胞總蛋白的提取
        2.2.12 克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測shS100A12細(xì)胞增殖與克隆形成能力
        2.2.13 細(xì)胞侵襲和遷移實(shí)驗(yàn)
        2.2.14 流式細(xì)胞檢測S100A12細(xì)胞周期
        2.2.15 Western blot蛋白免疫印跡分析S100A12 的表達(dá)
        2.2.16 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    2.3 試驗(yàn)結(jié)果
        2.3.1 S100A12在膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)升高,且與不良預(yù)后相關(guān)
        2.3.2 S100A12在體外增強(qiáng)膠質(zhì)瘤的增殖
        2.3.3 S100A12在體外調(diào)節(jié)膠質(zhì)瘤的凋亡
        2.3.4 S100A12增加了膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲和遷移能力
    2.4 討論
    2.5 結(jié)論
第三章 HAX-1對細(xì)胞膠質(zhì)瘤生長影響的研究
    3.1 前言
    3.2 材料與方法
        3.2.1 患者與標(biāo)本
        3.2.2 細(xì)胞系
        3.2.3 溶液配制
        3.2.4 儀器設(shè)備
        3.2.5 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.6 平板克隆形成實(shí)驗(yàn)檢測shHAX-1的細(xì)胞增值能力和克隆形成能力
        3.2.7 免疫組織化評估HAX-1蛋白表達(dá)
        3.2.8 膠質(zhì)瘤細(xì)胞中HAX-1 蛋白m RNA的提取
        3.2.9 HAX-1 逆轉(zhuǎn)錄PCR
        3.2.10 HAX-1基因沉默
        3.2.11 膠質(zhì)瘤細(xì)胞HAX-1總蛋白的提取
        3.2.12 Western blot評估不同等級膠質(zhì)瘤中HAX-1 的表達(dá)
        3.2.13 數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)分析
    3.3 結(jié)果
        3.3.1 HAX-1在星形膠質(zhì)瘤組織中表達(dá)
        3.3.2 HAX-1在膠質(zhì)瘤組織和正常細(xì)胞中表達(dá)
        3.3.3 HAX-1的表達(dá)與膠質(zhì)瘤臨床病理學(xué)相關(guān)性的研究
        3.3.4 沉默HAX-1對U87和U251細(xì)胞克隆能力形成能力的影響
        3.3.5 沉默HAX-1對U87和U251細(xì)胞侵襲能力的影響
        3.3.6 HAX-1的表達(dá)與膠質(zhì)瘤預(yù)后相關(guān)性的研究
        3.3.7 膠質(zhì)瘤中S100A12與HAX-1表達(dá)的相關(guān)性分析
    3.4 討論
    3.5 結(jié)論
總結(jié)
本研究創(chuàng)新性的自我評價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡歷



本文編號：3874699