背景:腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)常見的惡性腫瘤,起源于中樞神經(jīng)系統(tǒng),約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的45%,呈浸潤生長,界限不清,手術(shù)很難完全切除。因此,進一步深入探究膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展、病灶浸潤、侵襲相關(guān)的分子生物學(xué)基礎(chǔ)就顯得十分重要。PcG(Polycomb Group)家族蛋白的成員之一色素框同源蛋白7(Chromobox Protein Homolog7,CBX7)在多種腫瘤的發(fā)展過程中發(fā)揮重要的作用。上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的過程,代表腫瘤侵襲中重要的一環(huán)。Wnt/β-catenin信號通路是研究腫瘤遷移侵襲的重要通路,而DKK1是該信號通路的抑制蛋白,而且可調(diào)節(jié)EMT樣過程�，F(xiàn)階段關(guān)于CBX7與EMT、Wnt/β-catenin之間的關(guān)系研究尚未清晰。目的:研究CBX7在膠質(zhì)瘤中的表達情況以及對膠質(zhì)瘤侵襲能力的影響。方法:通過數(shù)據(jù)庫分析及Western blot技術(shù)檢測CBX7在正常星形膠質(zhì)細胞(Astrocyte)與膠質(zhì)瘤細胞(U118、A172、Ln229和T98G)之間的表達差異。采用人體標(biāo)本,通過Western blot,...

【文章頁數(shù)】：84 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    實驗器材
    實驗試劑
    主要溶液的配制
    實驗方法
        1.公共數(shù)據(jù)庫
        2.人腦組織樣本
        3.細胞系來源
        4.細胞培養(yǎng)
        5.原代細胞的提取及培養(yǎng)
        6.慢病毒構(gòu)建和轉(zhuǎn)染
        7.組織蛋白的提取
        8.細胞總蛋白的提取
        9.細胞胞漿、胞核蛋白提取(詳見于凱基生物公司核蛋白和胞漿蛋白提取試劑盒)
        10.蛋白定量
        11.平板克隆形成實驗
        12.CCK-8實驗
        13.劃痕實驗
        14.Transwell實驗
        15.3D細胞成球侵襲實驗
        16.實時熒光定量PCR(qRT-PCR)
        17.SDS-PAGE凝膠電泳
        18.細胞免疫熒光
        19.免疫組化
        20.雙熒光素酶報告基因
        21.染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)
        22.動物在體實驗
        23.統(tǒng)計方法
結(jié)果
    1.CBX7在膠質(zhì)瘤的表達降低,并且和惡性程度相關(guān)。
    2.外源性過表達CBX7可以抑制膠質(zhì)瘤細胞的惡性表型。
    3.上調(diào)CBX7所引起的侵襲功能抑制與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換(EMT)和細胞基質(zhì)蛋白酶(MMP)有關(guān)。
    4.上調(diào)CBX7能夠抑制Wnt/β-catenin信號通路,從而抑制膠質(zhì)瘤細胞侵襲功能。
    5.CBX7通過結(jié)合DKK1的啟動子,從而促進DKK1的表達。
    6.上調(diào)CBX7的表達促進DKK1的活性,從而抑制Wnt/β-catenin信號通路。
    7.通過顱內(nèi)原位成瘤和皮下成瘤來驗證CBX7的功能。
討論
結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄1 主要縮略詞說明
附錄2 主要計量單位說明
攻讀碩士期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號：3872159