背景:腦膠質(zhì)瘤是顱內(nèi)常見(jiàn)的惡性腫瘤,起源于中樞神經(jīng)系統(tǒng),約占中樞神經(jīng)系統(tǒng)腫瘤的45%,呈浸潤(rùn)生長(zhǎng),界限不清,手術(shù)很難完全切除。因此,進(jìn)一步深入探究膠質(zhì)瘤的發(fā)生發(fā)展、病灶浸潤(rùn)、侵襲相關(guān)的分子生物學(xué)基礎(chǔ)就顯得十分重要。PcG(Polycomb Group)家族蛋白的成員之一色素框同源蛋白7(Chromobox Protein Homolog7,CBX7)在多種腫瘤的發(fā)展過(guò)程中發(fā)揮重要的作用。上皮間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(Epithelial-mesenchymal transition,EMT)的過(guò)程,代表腫瘤侵襲中重要的一環(huán)。Wnt/β-catenin信號(hào)通路是研究腫瘤遷移侵襲的重要通路,而DKK1是該信號(hào)通路的抑制蛋白,而且可調(diào)節(jié)EMT樣過(guò)程�，F(xiàn)階段關(guān)于CBX7與EMT、Wnt/β-catenin之間的關(guān)系研究尚未清晰。目的:研究CBX7在膠質(zhì)瘤中的表達(dá)情況以及對(duì)膠質(zhì)瘤侵襲能力的影響。方法:通過(guò)數(shù)據(jù)庫(kù)分析及Western blot技術(shù)檢測(cè)CBX7在正常星形膠質(zhì)細(xì)胞(Astrocyte)與膠質(zhì)瘤細(xì)胞(U118、A172、Ln229和T98G)之間的表達(dá)差異。采用人體標(biāo)本,通過(guò)Western blot,...

【文章頁(yè)數(shù)】：84 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
材料與方法
    實(shí)驗(yàn)器材
    實(shí)驗(yàn)試劑
    主要溶液的配制
    實(shí)驗(yàn)方法
        1.公共數(shù)據(jù)庫(kù)
        2.人腦組織樣本
        3.細(xì)胞系來(lái)源
        4.細(xì)胞培養(yǎng)
        5.原代細(xì)胞的提取及培養(yǎng)
        6.慢病毒構(gòu)建和轉(zhuǎn)染
        7.組織蛋白的提取
        8.細(xì)胞總蛋白的提取
        9.細(xì)胞胞漿、胞核蛋白提取(詳見(jiàn)于凱基生物公司核蛋白和胞漿蛋白提取試劑盒)
        10.蛋白定量
        11.平板克隆形成實(shí)驗(yàn)
        12.CCK-8實(shí)驗(yàn)
        13.劃痕實(shí)驗(yàn)
        14.Transwell實(shí)驗(yàn)
        15.3D細(xì)胞成球侵襲實(shí)驗(yàn)
        16.實(shí)時(shí)熒光定量PCR(qRT-PCR)
        17.SDS-PAGE凝膠電泳
        18.細(xì)胞免疫熒光
        19.免疫組化
        20.雙熒光素酶報(bào)告基因
        21.染色質(zhì)免疫共沉淀(CHIP)
        22.動(dòng)物在體實(shí)驗(yàn)
        23.統(tǒng)計(jì)方法
結(jié)果
    1.CBX7在膠質(zhì)瘤的表達(dá)降低,并且和惡性程度相關(guān)。
    2.外源性過(guò)表達(dá)CBX7可以抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞的惡性表型。
    3.上調(diào)CBX7所引起的侵襲功能抑制與上皮間質(zhì)轉(zhuǎn)換(EMT)和細(xì)胞基質(zhì)蛋白酶(MMP)有關(guān)。
    4.上調(diào)CBX7能夠抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路,從而抑制膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲功能。
    5.CBX7通過(guò)結(jié)合DKK1的啟動(dòng)子,從而促進(jìn)DKK1的表達(dá)。
    6.上調(diào)CBX7的表達(dá)促進(jìn)DKK1的活性,從而抑制Wnt/β-catenin信號(hào)通路。
    7.通過(guò)顱內(nèi)原位成瘤和皮下成瘤來(lái)驗(yàn)證CBX7的功能。
討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
附錄1 主要縮略詞說(shuō)明
附錄2 主要計(jì)量單位說(shuō)明
攻讀碩士期間發(fā)表文章情況
致謝



本文編號(hào)：3872159