匹羅卡品癲癇小鼠海馬DISC1、PDE4的表達
發(fā)布時間:2023-10-19 18:36
目的研究精神分裂癥斷裂基因1(Disrupted-in-Schizophrenia1DISC1)蛋白、磷酸二酯酶4(Phosphodiesterase4, PDE4)及其mRNA在匹羅卡品致癲癇小鼠海馬中的表達變化,探討其在癲癇發(fā)病過程中的作用。 方法1.將雄性C57BL/6(3-4周)小鼠(246例)隨機分配入實驗組(198例)和對照組(48例),實驗組采用匹羅卡品小劑量給藥方法建立癲癇小鼠模型。 2.采用免疫組化和Real-Time PCR定性、定量分析方法分別于癲癇持續(xù)狀態(tài)(Status epilepticus,SE)后3天,7天,14天,28天檢測實驗組和對照組小鼠海馬組織中DISC1、PDE4、PDE4B (phosphodiesterase4B磷酸二酯酶4B)和MCM2(Minichromosome maintenance protein2微小染色體維持蛋白2)的表達改變。 結(jié)果1.DISC1免疫組化陽性著色主要位于海馬神經(jīng)元細胞的胞漿和胞核。DISCI蛋白和mRNA的表達水平在對照組各時間點無明顯差異(P>0.05)。與對照組相比:DISCI的表達水平在實驗組SE后...
【文章頁數(shù)】:66 頁
【學(xué)位級別】:碩士
【文章目錄】:
摘要
ABSTRACT
縮略詞表
第一章 前言
第二章 材料與方法
2.1 主要試劑
2.2 主要儀器
2.3 溶液配制
2.4 實驗方法
2.4.1 實驗動物及分組
2.4.2 小鼠癲癇模型的建立
2.4.3 灌注取材
2.4.4 冰凍切片的制備
2.4.5 海馬組織的分離與保存
2.4.6 免疫組化
2.4.7 Real-Time PCR檢測
2.5 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 結(jié)果觀察
3.1 匹羅卡品癲癇動物模型
3.1.1 行為學(xué)觀察
3.1.2 造模數(shù)據(jù)統(tǒng)計
3.2 免疫組化結(jié)果
3.2.1 小鼠海馬MCM2蛋白的表達
3.2.2 小鼠海馬DISC1蛋白的表達
3.2.3 小鼠海馬PDE4蛋白的表達
3.2.4 小鼠海馬PDE4B蛋白的表達
3.2.5 相關(guān)性分析
3.3 RT-PCR結(jié)果
3.3.1 RNA完整性檢測
3.3.2 溶解曲線和擴增曲線
3.3.3 各指標mRNA表達水平
第四章 討論
4.1 癲癇后神經(jīng)細胞增生
4.2 DISC1
4.2.1 DISC1的分布
4.2.2 DISC1與神經(jīng)細胞增生的關(guān)系
4.2.3 癲癇后異常神經(jīng)細胞增生的后果
4.3 PDE4
4.3.1 PDE4的結(jié)構(gòu)和分布
4.3.2 PDE4與癲癇
4.3.3 癲癇、抑郁、焦慮和神經(jīng)增生
第五章 結(jié)論
參考文獻
綜述
參考文獻
致謝
在讀期間完成的論文
本文編號:3855180
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第一章 前言
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2.1 主要試劑
2.2 主要儀器
2.3 溶液配制
2.4 實驗方法
2.4.1 實驗動物及分組
2.4.2 小鼠癲癇模型的建立
2.4.3 灌注取材
2.4.4 冰凍切片的制備
2.4.5 海馬組織的分離與保存
2.4.6 免疫組化
2.4.7 Real-Time PCR檢測
2.5 統(tǒng)計學(xué)處理
第三章 結(jié)果觀察
3.1 匹羅卡品癲癇動物模型
3.1.1 行為學(xué)觀察
3.1.2 造模數(shù)據(jù)統(tǒng)計
3.2 免疫組化結(jié)果
3.2.1 小鼠海馬MCM2蛋白的表達
3.2.2 小鼠海馬DISC1蛋白的表達
3.2.3 小鼠海馬PDE4蛋白的表達
3.2.4 小鼠海馬PDE4B蛋白的表達
3.2.5 相關(guān)性分析
3.3 RT-PCR結(jié)果
3.3.1 RNA完整性檢測
3.3.2 溶解曲線和擴增曲線
3.3.3 各指標mRNA表達水平
第四章 討論
4.1 癲癇后神經(jīng)細胞增生
4.2 DISC1
4.2.1 DISC1的分布
4.2.2 DISC1與神經(jīng)細胞增生的關(guān)系
4.2.3 癲癇后異常神經(jīng)細胞增生的后果
4.3 PDE4
4.3.1 PDE4的結(jié)構(gòu)和分布
4.3.2 PDE4與癲癇
4.3.3 癲癇、抑郁、焦慮和神經(jīng)增生
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