發(fā)布時(shí)間：2023-08-09 19:25

　　目的:觀察大鼠蛛網(wǎng)膜下腔出血(subarachnoid hemorrhage,SAH)后抑制自噬對(duì)早期腦損傷(early brain injury,EBI)恢復(fù)的作用,揭示自噬促進(jìn)神經(jīng)元鐵死亡從而影響EBI的具體機(jī)制。方法:將SD大鼠隨機(jī)分為對(duì)照組、SAH組、SAH+空載病毒(SAH+LV-Scramble)組和SAH+自噬相關(guān)基因5慢病毒(SAH+LV-shATG5)組,每組均為12只。采用血管內(nèi)穿刺法構(gòu)建SAH模型,自噬相關(guān)基因5(Autophagy-related gene 5,ATG5)慢病毒(LV-shATG5)抑制自噬,免疫熒光檢測(cè)SAH后24h ATG5、鐵蛋白重鏈1(ferritin heavy polypeptide 1,FTH1)和谷胱甘肽過(guò)氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)在皮質(zhì)神經(jīng)元的表達(dá)和定位情況。PCR檢測(cè)ATG5 mRNA的表達(dá)情況,Western blot檢測(cè)ATG5、LC3II/I、FTH1和GPX4的表達(dá)變化,尼氏染色(Nissl Staining)和神經(jīng)行為學(xué)評(píng)分、腦水含量等檢測(cè)抑制自噬后神經(jīng)元形態(tài)和功能的變化...

【文章頁(yè)數(shù)】：49 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
英漢縮略語(yǔ)名詞對(duì)照
中文摘要
英文摘要
前言
1 材料與方法
    1.1 主要試劑和材料
    1.2 主要儀器和設(shè)備
2 實(shí)驗(yàn)方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物及分組
    2.2 SD 大鼠 SAH 模型構(gòu)建
    2.3 慢病毒右側(cè)側(cè)腦室注射
    2.4 免疫熒光檢測(cè)
    2.5 PCR 檢測(cè)
    2.6 Western blot 檢測(cè)
    2.7 早期腦損傷檢測(cè)
    2.8 尼氏染色
    2.9 鐵死亡檢測(cè)
    2.10 數(shù)據(jù)分析
3 結(jié)果
    3.1 SD 大鼠 SAH 模型構(gòu)建
    3.2 免疫熒光檢測(cè) ATG5、FTH1 和 GPX4 在大鼠皮質(zhì)神經(jīng)元的定位情況
    3.3 檢測(cè)自噬抑制情況及抑制自噬后神經(jīng)元損傷、早期腦損傷的變化
    3.4 自噬促進(jìn) SAH 后神經(jīng)元鐵死亡的通路相關(guān)蛋白及下游指標(biāo)檢測(cè)
4 討論
    4.1 自噬和鐵死亡參與 SAH 后 EBI 的病理機(jī)制
    4.2 自噬促進(jìn)神經(jīng)元鐵死亡可能是 SAH 后 EBI 的重要原因
    4.3 自噬在疾病中的作用仍需客觀、全面分析
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述：鐵自噬的研究進(jìn)展
    參考文獻(xiàn)
致謝
攻讀碩士期間發(fā)表的論文



本文編號(hào)：3840815