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缺氧環(huán)境下,膠質(zhì)瘤細(xì)胞HIF-1α基因沉默后VEGF表達(dá)的變化

發(fā)布時(shí)間:2023-05-17 22:17
  目的探討缺氧誘導(dǎo)因子及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子在膠質(zhì)瘤演進(jìn)過(guò)程的作用,嘗試基因抑制膠質(zhì)瘤生長(zhǎng)方法A172細(xì)胞(人膠質(zhì)瘤細(xì)胞)常氧環(huán)境培育,隨機(jī)分為兩組:(1)轉(zhuǎn)染組:無(wú)雙抗細(xì)胞培養(yǎng)液常氧培育待細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿底(10cm)60%,lipofectamine2000轉(zhuǎn)染si Hif-1質(zhì)粒,5小時(shí)后換普通含雙抗細(xì)胞培養(yǎng)液。(2)對(duì)照組:無(wú)雙抗細(xì)胞培養(yǎng)液常氧培育待細(xì)胞長(zhǎng)滿培養(yǎng)皿底(10cm)60%,lipofectamine2000轉(zhuǎn)染陰性對(duì)照質(zhì)粒,5小時(shí)后換普通含雙抗細(xì)胞培養(yǎng)液。兩組常氧培育12小時(shí),12小時(shí)候氯化鈷模擬缺氧環(huán)境培養(yǎng)。運(yùn)用western blot、免疫熒光技術(shù)在0h、6h、12h、18h、24h分別檢測(cè)缺氧誘導(dǎo)蛋白(HIF-1α)及血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子的表達(dá)變化。用QPCR技術(shù)檢測(cè)RNA表達(dá)的變化。結(jié)果免疫熒光及蛋白印跡法(Western blot)結(jié)果顯示HIF-1α表達(dá)受到明顯抑制的情況下,VEGF在18小時(shí)候開始出現(xiàn)明顯抑制。在缺氧培育開始后,western blot結(jié)果顯示缺氧誘導(dǎo)因子(HIF-1α)的表達(dá)水平明顯地被si RNA抑制,同時(shí)血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)的表達(dá)在1...

【文章頁(yè)數(shù)】:32 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】:碩士

【文章目錄】:
中文論著摘要
英文論著摘要
英文縮略語(yǔ)表
前言
實(shí)驗(yàn)材料與方法
結(jié)果
討論
結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
附錄
    一、文獻(xiàn)綜述
        參考文獻(xiàn)
    二、在學(xué)期間科研成績(jī)
    三、致謝
    四、個(gè)人簡(jiǎn)介



本文編號(hào):3818105

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