目的 本實(shí)驗的目的是研究CCRL2在膠質(zhì)瘤中的作用,包括其在腫瘤發(fā)生、發(fā)展、腫瘤轉(zhuǎn)移中的作用。從中獲得的結(jié)論將會對趨化因子受體在腫瘤中的作用研究提出新的視點(diǎn)。 方法 (一)RT-PCR方法 收集12例膠質(zhì)瘤組織樣本,設(shè)計合成CCRL2特異性引物,按照操作說明,將12例膠質(zhì)瘤患者腫瘤組織的總RNA用TRIZOL試劑(invitrogen Corp)法分離出來,純化的RNA通過SuperScriptTM二代逆轉(zhuǎn)錄酶(invitrogen Corp)反轉(zhuǎn)成c DNA。CCRL2m RNA的表達(dá)通過CCRL2特異性引物進(jìn)行PCR檢測。 設(shè)計合成CCRL2特異性引物,培養(yǎng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87、U373,運(yùn)用半定量RT-PCR方法檢測膠質(zhì)瘤細(xì)胞CCRL2的表達(dá)。 (二)MTT檢測 培養(yǎng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞U87、U373,將7500個膠質(zhì)瘤細(xì)胞種植在96孔板上,最初的細(xì)胞密度是7500個/孔。在種植后的1、2、3、4或5天后,培養(yǎng)基換成100μl新鮮無血清培養(yǎng)基。用PBS液溶解MTT,10μl滅菌過濾后的MTT原液(5mg/mL),加到每一個細(xì)胞孔中,達(dá)到約0.5mg/mL的終濃度。孵育3小時后,未反應(yīng)的染料連...

【文章頁數(shù)】：154 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
英文簡略詞注釋
引言
    參考文獻(xiàn)
全文中文摘要
全文英文摘要
第一部分 CCRL2 mRNA在膠質(zhì)瘤組織和細(xì)胞中的表達(dá)
    摘要
    Abstract
    實(shí)驗一 CCRL2 mRNA在膠質(zhì)瘤組織中的表達(dá)
        材料、設(shè)備和試劑
        方法與步驟
        結(jié)果
        結(jié)論
    實(shí)驗二 CCRL2 mRNA在膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的表達(dá)
        材料、設(shè)備和試劑
        方法與步驟
        結(jié)果
        結(jié)論
    討論
    參考文獻(xiàn)
第二部分 CCRL2對膠質(zhì)瘤細(xì)胞生物學(xué)行為的影響
    摘要
    Abstract
    實(shí)驗一 CCRL2過表達(dá)對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響
        材料、設(shè)備和試劑
        方法與步驟
        結(jié)果
        結(jié)論
    實(shí)驗二 CCRL2敲低對膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響
        材料、設(shè)備和試劑
        方法與步驟
        結(jié)果
        結(jié)論
    實(shí)驗三 CCRL2對膠質(zhì)瘤細(xì)胞遷移的影響
        材料、設(shè)備和試劑
        方法與步驟
        結(jié)果
        結(jié)論
    實(shí)驗四 CCRL2對膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲性的影響
        材料、設(shè)備和試劑
        方法與步驟
        結(jié)果
        結(jié)論
    討論
    參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
研究的創(chuàng)新性和特色
綜述
    文獻(xiàn)綜述
    英文綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀博士期間發(fā)表的文章
致謝



本文編號：3816774