背景杜氏肌營養(yǎng)不良(Duchenne muscular dystrophy,DMD)是一種X連鎖隱性遺傳的致死性肌肉變性疾病,主要由編碼抗肌萎縮蛋白(dystrophin)的DMD基因突變導(dǎo)致,臨床表現(xiàn)為進(jìn)行性加重的肌肉損傷。目前該病尚無有效的治療手段,主要通過糖皮質(zhì)激素和康復(fù)訓(xùn)練等臨床綜合治療來延緩疾病進(jìn)程,但即使有醫(yī)療護(hù)理,大多數(shù)DMD患者多在30歲之前死于心臟或呼吸衰竭。近年來CRISPR/Cas9技術(shù)被廣泛應(yīng)用于DMD的基因治療研究中。CRISPR/Cas9基因編輯系統(tǒng)可對特定序列進(jìn)行靶向編輯,實(shí)現(xiàn)對DMD基因永久性靶向外顯子跳躍,校正突變破壞的閱讀框架從而恢復(fù)dystrophin蛋白的表達(dá)。目前已有大量體內(nèi)外研究評估CRISPR/Cas9治療DMD的效果,其成功率各不相同。盡管CRISPR/Cas9介導(dǎo)的基因編輯在DMD的長期治療中已顯示出一定潛力,但其臨床轉(zhuǎn)化應(yīng)用中仍面臨著脫靶,體內(nèi)基因遞送和免疫應(yīng)答激活等諸多安全性問題。因此CRISPR技術(shù)的安全性評價是我們研究的重點(diǎn)。本研究在體外確定并構(gòu)建小鼠Dmd基因23外顯子上下游的高效靶點(diǎn)。同時在小鼠體內(nèi)通過活體熒光成像技術(shù)評價A...

【文章頁數(shù)】：68 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
abstract
中英文縮略表
引言
第一部分 基于CRISPR系統(tǒng)的體外Dmd基因23號外顯子靶點(diǎn)設(shè)計(jì)及效果驗(yàn)證
    前言
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
第二部分 腺相關(guān)病毒9型(AAV9)在小鼠體內(nèi)的分布情況
    前言
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
第三部分 人血清、羊水及臍帶血中SaCas9蛋白抗體的檢測
    前言
    1 材料與方法
    2 結(jié)果
    3 討論
    4 結(jié)論
全文結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述 CRISPR/Cas9 技術(shù)在DMD治療中的應(yīng)用
    參考文獻(xiàn)
個人簡歷及碩士期間發(fā)表論文及獲獎情況
致謝



本文編號：3804487