目的:本研究探討了鳥(niǎo)苷酸結(jié)合蛋白2(GBP2)在神經(jīng)膠質(zhì)瘤(GBM)細(xì)胞中的生物學(xué)功能及分子機(jī)制。方法:我們首先利用TCGA數(shù)據(jù)庫(kù)及我們收集的GBM病人樣本和細(xì)胞系分別從m RNA和蛋白水平分析了GBP2的表達(dá)情況。然后從體外研究了GBP2的生物學(xué)功能,從多種神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞系中分別選取低表達(dá)及高表達(dá)GBP2的神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞,分別對(duì)其進(jìn)行外源性的基因高表達(dá)及基因沉默,通過(guò)劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng),通過(guò)WST-1法檢測(cè)細(xì)胞增殖水平,通過(guò)細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)細(xì)胞的侵襲能力,從正反兩方面研究GBP2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞中的生物學(xué)效應(yīng)。其次是機(jī)制研究,通過(guò)q RT-PCR檢測(cè)細(xì)胞運(yùn)動(dòng)、侵襲相關(guān)基因的表達(dá)水平,Western Blot法驗(yàn)證并檢測(cè)信號(hào)通路中的纖連蛋白(FN1)以及磷酸化的信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)與轉(zhuǎn)錄激活因子(Signal transducer and activator of transcription 3,STAT3)的表達(dá)水平。最后是體內(nèi)實(shí)驗(yàn)研究,通過(guò)裸鼠皮下成瘤實(shí)驗(yàn)研究GBP2在體內(nèi)對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響;通過(guò)裸鼠顱內(nèi)成瘤實(shí)驗(yàn)及組織切片免疫組化實(shí)驗(yàn)研究GBP2在顱內(nèi)的侵襲作用;通過(guò)動(dòng)物生存實(shí)驗(yàn)研究GBP2對(duì)...

【文章頁(yè)數(shù)】：72 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
1 序言
2 材料和方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)對(duì)象
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)試劑
    2.3 主要實(shí)驗(yàn)耗材
    2.4 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.5 常用實(shí)驗(yàn)溶液的配制
    2.6 實(shí)驗(yàn)方法
        2.6.1 細(xì)胞培養(yǎng)與細(xì)胞轉(zhuǎn)染
        2.6.2 慢病毒制備和感染
        2.6.3 WST-1法測(cè)定GBP2對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖的影響
        2.6.4 細(xì)胞劃痕實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GBP2對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞運(yùn)動(dòng)能力的影響
        2.6.5 qRT-PCR檢測(cè)受GBP2誘導(dǎo)的與細(xì)胞侵襲相關(guān)基因表達(dá)
        2.6.6 細(xì)胞侵襲實(shí)驗(yàn)檢測(cè)GBP2對(duì)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移能力的影響
        2.6.7 Western bolt檢測(cè)GBP2、FN1、p-Stat3、Stat3的表達(dá)
        2.6.8 異種移植模型和組織學(xué)分析
    2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
3 結(jié)果
    3.1 GBP2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中表達(dá)增高
    3.2 GBP2在神經(jīng)膠質(zhì)瘤中的表達(dá)水平與病人的預(yù)后呈負(fù)相關(guān)
    3.3 過(guò)表達(dá)GBP2能促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的遷移能力
    3.4 GBP2在體外對(duì)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖無(wú)影響
    3.5 過(guò)表達(dá)GBP2能促進(jìn)神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞的侵襲能力
    3.6 GBP2可誘導(dǎo)FN1等腫瘤相關(guān)因子的表達(dá)
    3.7 FN1參與GBP2調(diào)控的細(xì)胞侵襲作用
    3.8 GBP2通過(guò)STAT3-FN1通路促進(jìn)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲作用
    3.9 GBP2表達(dá)促進(jìn)裸鼠神經(jīng)膠質(zhì)瘤的生長(zhǎng)
    3.10 裸鼠動(dòng)物模型顯示GBP2表達(dá)可促進(jìn)膠質(zhì)瘤腫瘤侵襲
    3.11 裸鼠動(dòng)物模型顯示GBP2表達(dá)縮短裸鼠的生存時(shí)間
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
中英文縮略詞表
攻讀碩士期間的科研成果
致謝



本文編號(hào)：3797777