膠質(zhì)母細(xì)胞瘤是神經(jīng)系統(tǒng)最常見的高致命性惡性腫瘤,盡管目前治療手段已經(jīng)有了很多進展,其預(yù)后仍然很差。它占所有神經(jīng)膠質(zhì)腫瘤的60%,患者的總體生存率在過去20年中卻沒有發(fā)生顯著變化。即使進行了積極的治療,基本上所有的膠質(zhì)母細(xì)胞瘤都會復(fù)發(fā),最終導(dǎo)致死亡。腫瘤的侵襲是一種不同組織學(xué)類型的細(xì)胞惡性轉(zhuǎn)化時的復(fù)雜行為,涉及一系列分子間、細(xì)胞間、細(xì)胞與胞外基質(zhì)間相互作用的多機制過程,這些過程使得腫瘤細(xì)胞遷移并侵襲到周圍健康腦組織中。以往的研究顯示,蛋白酶、胞外基質(zhì)成分、粘連細(xì)胞分子的相互作用及激活相關(guān)的多種信號通路在神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞侵襲和轉(zhuǎn)移中起重要作用,每一成分都可以被視為潛在神經(jīng)膠質(zhì)瘤治療靶點。近來的研究提示某些在應(yīng)激狀態(tài)下被激活的信號分子,在特定情況下發(fā)揮促進腫瘤細(xì)胞遷移的作用,很可能促進了膠質(zhì)母細(xì)胞的侵襲。ATF3(activating transcription factor 3,轉(zhuǎn)錄激活因子3)是細(xì)胞應(yīng)激反應(yīng)中最早表達的轉(zhuǎn)錄因子之一,是介導(dǎo)細(xì)胞外信號如細(xì)胞應(yīng)激、生長因子和激素等產(chǎn)生生物效應(yīng)作用的關(guān)鍵調(diào)節(jié)者,是一種早期反應(yīng)基因。許多研究都證實ATF3還是一種適應(yīng)性反應(yīng)基因,是細(xì)胞對那些擾亂機體...

【文章頁數(shù)】：145 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
abstract
英文縮略詞表
前言
第一部分 人腦膠質(zhì)瘤中ATF3、Maspin和MMP2 蛋白和mRNA表達
    材料與方法
        1 實驗材料
        2 實驗方法
    結(jié)果
        1 正常腦組織和各級膠質(zhì)細(xì)胞瘤中ATF3、Maspin和MMP2 蛋白的表達和分布
        2 正常腦組織和各級膠質(zhì)細(xì)胞瘤中ATF3、Maspin和MMP2 的mRNA相對定量
        3 各級膠質(zhì)細(xì)胞瘤和正常腦組織中 ATF3、Maspin 和 MMP2 的免疫印跡檢測
    討論
    小結(jié)
第二部分 ATF3-siRNA體外抑制膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的實驗研究
    第一章 U373MG細(xì)胞中ATF3 siRNA的篩選與鑒定
        材料與方法
            1 實驗材料
            2 實驗方法
        結(jié)果
            1 pSilencer/siRNA-ATF3 前體表達載體的構(gòu)建
            2 pSilencer/siRNA-ATF3 前體表達載體在U373MG細(xì)胞中干擾效果的檢測
    第二章 ATF3-siRNA抑制U373MG后細(xì)胞生長表型及其他功能學(xué)研究
        材料與方法
            1 實驗材料
            2 實驗方法
        結(jié)果
            1 治療后U373MG細(xì)胞形態(tài)學(xué)改變
            2 治療后細(xì)胞活性及對順鉑的敏感性的變化（MTT法檢測結(jié)果）
            3 治療后對細(xì)胞周期的影響（細(xì)胞周期流式細(xì)胞術(shù)檢測結(jié)果）
            4 ATF3 基因表達抑制后對細(xì)胞凋亡的影響（細(xì)胞凋亡TUNEL檢測結(jié)果）
            5 Transwell實驗檢測細(xì)胞體外侵襲能力的變化
            6 治療后免疫細(xì)胞化學(xué)檢測ATF3、Maspin和MMP-2 表達水平的變化
            7 治療后實時熒光定量PCR檢測ATF3、Maspin和MMP-2 mRNA表達水平的變化
            8 治療后免疫印跡檢測ATF3、MMP-2 和Maspin表達水平的變化
        討論
        小結(jié)
第三部分 ATF3-siRNA裸鼠體內(nèi)治療膠質(zhì)母細(xì)胞瘤的研究
    材料和方法
        1 實驗材料
        2 實驗方法
    結(jié)果
        1 成功建立裸鼠體內(nèi) U37MG 細(xì)胞異種移植瘤動物模型
        2 治療后各組腫瘤的組織學(xué)形態(tài)
        3 ATF3-si RNA 抑制移植瘤生長
        4 治療后裸鼠體內(nèi)腫瘤組織的TUNEL檢測結(jié)果
        5 免疫組織化學(xué)檢測治療后各組腫瘤組織中ATF3、Maspin和MMP2表達水平
        6 熒光定量PCR檢測治療后各組腫瘤組織中ATF3、Maspin和MMP2 mRNA水平的表達
        7 免疫印跡檢測治療后各組腫瘤組織中ATF3、Maspin和MMP2 表達水平
    討論
    小結(jié)
結(jié)論
參考文獻
綜述 ATF3研究新進展
    參考文獻
個人簡歷及在學(xué)期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文
致謝



本文編號：3771864