目的 第一部分：探討獲取高純度大鼠原代腦微血管周細(xì)胞的分離和培養(yǎng)方法,并對(duì)其鑒定。 第二部分：探討褪黑素在過氧化氫(H2O2)誘導(dǎo)的大鼠腦微血管周細(xì)胞損傷中的保護(hù)作用。 第三部分：探討褪黑素抑制H2O2誘導(dǎo)的大鼠腦微血管周細(xì)胞凋亡的保護(hù)機(jī)制。 方法 第一部分：選取10只3周齡Wistar大鼠,取大腦,去除白質(zhì),剪碎成大約1mm3大小,通過兩次酶消化、20%BSA離心和33%連續(xù)密度Percoll梯度離心獲得純度較高的大腦微血管片段,接種于35mm培養(yǎng)皿中,加入含10%FBS的DMEM培養(yǎng)基,37℃、5%CO2細(xì)胞孵箱中培養(yǎng),2天后更換新鮮培養(yǎng)基；采用倒置顯微鏡觀察周細(xì)胞生長狀況及其形態(tài)；免疫細(xì)胞化學(xué)法檢測NG2、α-SMA、vWF及GFAP表達(dá),鑒定分離的細(xì)胞及其純度；MTT法檢測繪制其增殖曲線。 第二部分：應(yīng)用MTT試驗(yàn)和臺(tái)盼藍(lán)拒染試驗(yàn)檢測不同濃度H2O2處理后腦微血管周細(xì)胞的細(xì)胞活力；應(yīng)用胞內(nèi)反應(yīng)性氧簇檢測試劑盒檢測褪黑素及抗化劑GSH對(duì)胞內(nèi)活性氧聚集的影響；采用TUNEL法確定細(xì)胞死亡類型；檢測褪黑素及GSH對(duì)H202誘導(dǎo)大鼠腦微血管周細(xì)胞損傷的保護(hù)作用。 第三部分：檢測褪黑素及...

【文章頁數(shù)】：143 頁

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
前言
第一部分 大鼠原代腦微血管周細(xì)胞的分離、培養(yǎng)及鑒定
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
第二部分 褪黑素抑制H₂O₂誘導(dǎo)的大鼠腦微血管周細(xì)胞凋亡
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
第三部分 褪黑素抑制H₂O₂誘導(dǎo)的大鼠腦微血管周細(xì)胞凋亡機(jī)制的研究
    材料與方法
    結(jié)果
    討論
    小結(jié)
參考文獻(xiàn)
全文總結(jié)
英文縮寫詞表
文獻(xiàn)綜述 1
    參考文獻(xiàn)
文獻(xiàn)綜述 2
    參考文獻(xiàn)
實(shí)驗(yàn)文章 1
實(shí)驗(yàn)文章 2
實(shí)驗(yàn)文章 3
實(shí)驗(yàn)文章 4
個(gè)人簡歷及攻讀期成果
致謝
附件



本文編號(hào)：3759256