目的:在腦膠質(zhì)瘤中,血腫瘤屏障（blood-tumor barrier,BTB）的存在是限制大分子抗腫瘤藥物進(jìn)入腫瘤組織,從而影響化療療效的關(guān)鍵因素。與血腦屏障（blood brain barrier,BBB）的組成不同,膠質(zhì)瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)破壞了正常的BBB結(jié)構(gòu),組成了BTB。BTB的通透性雖略高于BBB,但仍然能夠阻止大分子抗腫瘤藥物通過(guò)。因此,選擇性增加BTB的通透性,有效地將藥物轉(zhuǎn)運(yùn)到腦膠質(zhì)瘤組織,切實(shí)提高腦膠質(zhì)瘤的治療效果,是腦膠質(zhì)瘤綜合治療一個(gè)亟待解決的問(wèn)題。內(nèi)皮-單核細(xì)胞激活多肽-Ⅱ（endothelial monocyte-activating polypeptide-II,EMAP-Ⅱ）由其前體物質(zhì)proEMAP-Ⅱ分解而成,能夠調(diào)節(jié)內(nèi)皮和單核細(xì)胞的功能。目前研究發(fā)現(xiàn),EMAP-Ⅱ具有多種調(diào)控細(xì)胞功能的作用。有研究報(bào)道小劑量EMAP-Ⅱ（0.05nM）具有選擇性開放BTB的作用。EMAP-Ⅱ通過(guò)cAMP/PKA通路以及PKC-ζ/PP2A通路選擇性增加BTB的通透性。在體外BTB模型中,小劑量EMAP-Ⅱ能夠與腫瘤微血管內(nèi)皮細(xì)胞膜上的α-ATP合酶結(jié)合,通過(guò)下調(diào)緊密連接相... 

【文章頁(yè)數(shù)】：68 頁(yè)

【學(xué)位級(jí)別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語(yǔ)
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實(shí)驗(yàn)材料
        2.1.1 實(shí)驗(yàn)細(xì)胞株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.2 實(shí)驗(yàn)方法
        2.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        2.2.2 建立體外BTB模型
        2.2.3 細(xì)胞轉(zhuǎn)染和分組
        2.2.4 跨內(nèi)皮電阻(TransendothelialElectricResistance,TEER)值的測(cè)量
        2.2.5 辣根過(guò)氧化物酶通量(Horseradishperoxidaseflux,HRP)檢測(cè)
        2.2.6 Real-timePCR
        2.2.7 Westernblot檢測(cè)
        2.2.8 激光共聚焦顯微鏡觀察細(xì)胞內(nèi)蛋白表達(dá)和分布
        2.2.9 熒光素酶報(bào)告基因載體的構(gòu)建及熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)
        2.2.10 細(xì)胞增殖能力檢測(cè)
        2.2.11 流式細(xì)胞儀分析細(xì)胞凋亡
        2.2.12 統(tǒng)計(jì)分析
3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    3.1 MIR-330-3P在GECS中高表達(dá),小劑量EMAP-II降低GECS中MIR-330-3P表達(dá)
    3.2 MIR-330-3P表達(dá)沉默能破壞BTB完整性,降低GECS內(nèi)緊密連接蛋白表達(dá),增加BTB通透性
    3.3 EMAP-II通過(guò)下調(diào)MIR-330-3P增加BTB通透性
    3.4 MIR-330-3P與PKC-Α靶向結(jié)合
    3.5 EMAP-II通過(guò)下調(diào)MIR-330-3P增加PKC-Α和P-PKC-Α的表達(dá)
    3.6 MIR-330-3P與PKC-Α激活劑以及抑制劑共同作用對(duì)BTB通透性和緊密連接蛋白表達(dá)的影響
    3.7 EMAP-II與ANTI-MIR-330-3P和PKC-Α激活劑共同作用,影響B(tài)TB通透性以及緊密連接相關(guān)蛋白表達(dá)
    3.8 EMAP-II與ANTI-MIR-330-3P和PKC-Α激活劑共同作用,能增加DOX對(duì)U87膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖和凋亡的影響
4 討論
5 結(jié)論
本研究創(chuàng)新性的自我評(píng)價(jià)
參考文獻(xiàn)
綜述
    參考文獻(xiàn)
攻讀學(xué)位期間取得的研究成果
致謝
個(gè)人簡(jiǎn)介


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]Novel drug-delivery approaches to the blood-brain barrier[J]. Xiaoqing Wang,Xiaowen Yu,William Vaughan,Mingyuan Liu,Yangtai Guan.  Neuroscience Bulletin. 2015(02)



本文編號(hào)：3692740