目的:在腦膠質瘤中,血腫瘤屏障（blood-tumor barrier,BTB）的存在是限制大分子抗腫瘤藥物進入腫瘤組織,從而影響化療療效的關鍵因素。與血腦屏障（blood brain barrier,BBB）的組成不同,膠質瘤細胞的生長破壞了正常的BBB結構,組成了BTB。BTB的通透性雖略高于BBB,但仍然能夠阻止大分子抗腫瘤藥物通過。因此,選擇性增加BTB的通透性,有效地將藥物轉運到腦膠質瘤組織,切實提高腦膠質瘤的治療效果,是腦膠質瘤綜合治療一個亟待解決的問題。內皮-單核細胞激活多肽-Ⅱ（endothelial monocyte-activating polypeptide-II,EMAP-Ⅱ）由其前體物質proEMAP-Ⅱ分解而成,能夠調節(jié)內皮和單核細胞的功能。目前研究發(fā)現(xiàn),EMAP-Ⅱ具有多種調控細胞功能的作用。有研究報道小劑量EMAP-Ⅱ（0.05nM）具有選擇性開放BTB的作用。EMAP-Ⅱ通過cAMP/PKA通路以及PKC-ζ/PP2A通路選擇性增加BTB的通透性。在體外BTB模型中,小劑量EMAP-Ⅱ能夠與腫瘤微血管內皮細胞膜上的α-ATP合酶結合,通過下調緊密連接相... 

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【學位級別】：博士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
英文縮略語
1 前言
2 材料與方法
    2.1 實驗材料
        2.1.1 實驗細胞株
        2.1.2 主要試劑
        2.1.3 主要實驗儀器
    2.2 實驗方法
        2.2.1 細胞培養(yǎng)
        2.2.2 建立體外BTB模型
        2.2.3 細胞轉染和分組
        2.2.4 跨內皮電阻(TransendothelialElectricResistance,TEER)值的測量
        2.2.5 辣根過氧化物酶通量(Horseradishperoxidaseflux,HRP)檢測
        2.2.6 Real-timePCR
        2.2.7 Westernblot檢測
        2.2.8 激光共聚焦顯微鏡觀察細胞內蛋白表達和分布
        2.2.9 熒光素酶報告基因載體的構建及熒光素酶報告基因實驗
        2.2.10 細胞增殖能力檢測
        2.2.11 流式細胞儀分析細胞凋亡
        2.2.12 統(tǒng)計分析
3 實驗結果
    3.1 MIR-330-3P在GECS中高表達,小劑量EMAP-II降低GECS中MIR-330-3P表達
    3.2 MIR-330-3P表達沉默能破壞BTB完整性,降低GECS內緊密連接蛋白表達,增加BTB通透性
    3.3 EMAP-II通過下調MIR-330-3P增加BTB通透性
    3.4 MIR-330-3P與PKC-Α靶向結合
    3.5 EMAP-II通過下調MIR-330-3P增加PKC-Α和P-PKC-Α的表達
    3.6 MIR-330-3P與PKC-Α激活劑以及抑制劑共同作用對BTB通透性和緊密連接蛋白表達的影響
    3.7 EMAP-II與ANTI-MIR-330-3P和PKC-Α激活劑共同作用,影響B(tài)TB通透性以及緊密連接相關蛋白表達
    3.8 EMAP-II與ANTI-MIR-330-3P和PKC-Α激活劑共同作用,能增加DOX對U87膠質瘤細胞增殖和凋亡的影響
4 討論
5 結論
本研究創(chuàng)新性的自我評價
參考文獻
綜述
    參考文獻
攻讀學位期間取得的研究成果
致謝
個人簡介


【參考文獻】：
期刊論文
[1]Novel drug-delivery approaches to the blood-brain barrier[J]. Xiaoqing Wang,Xiaowen Yu,William Vaughan,Mingyuan Liu,Yangtai Guan.  Neuroscience Bulletin. 2015(02)



本文編號：3692740