目的:通過建立小鼠實(shí)驗(yàn)性自身免疫性重癥肌無力（experimental autoimmune myasthenia gravis,EAMG）模型,以研究低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4（low density lipoprotein receptor-related protein 4,LRP4）在重癥肌無力（myasthenia gravis,MG）致病性,以及與相關(guān)細(xì)胞因子的關(guān)系。方法:選取10只8周齡雌性C57BL/6小鼠,體重為18-25g,隨機(jī)分為實(shí)驗(yàn)組（n=5）和對(duì)照組（n=5）。采用主動(dòng)免疫的方式皮下注射LRP4,以建立小鼠EAMG模型。取小鼠腓腸肌制成冰凍切片,用四甲基羅丹明結(jié)合的銀環(huán)蛇毒素（TR-BTX）定位乙酰膽堿受體（AChR）（呈紅色）,用FITC結(jié)合的羊抗小鼠IgG抗體去定位LRP4抗體（呈綠色）,再通過激光共聚焦顯微鏡來觀察超微結(jié)構(gòu)的變化。用ELISA試劑盒分別測(cè)定實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組小鼠血清血清中細(xì)胞因子IL-12、IFN-γ、IL-17的濃度。結(jié)果:實(shí)驗(yàn)組中有一只小鼠左眼周邊脫毛,無法睜開,實(shí)驗(yàn)組中部分小鼠表現(xiàn)為活動(dòng)遲緩,撕咬抓取能力變?nèi)?體重略微下降。通過激光共聚... 

【文章頁數(shù)】：40 頁

【學(xué)位級(jí)別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文對(duì)照
第一章 前言
第二章 實(shí)驗(yàn)材料
    2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物
    2.2 主要實(shí)驗(yàn)儀器
    2.3 實(shí)驗(yàn)試劑
    2.4 溶液的配制
第三章 實(shí)驗(yàn)方法
    3.1 小鼠EAMG模型的建立
        3.1.1 皮下注射給藥
        3.1.2 小鼠體重、行為觀察及評(píng)分
        3.1.3 小鼠眼球取血
    3.2 免疫熒光試驗(yàn)
        3.2.1 冰凍切片的制備
        3.2.2 免疫熒光染色及觀察
    3.3 血清中IL-12、IFN-γ、IL-17濃度的檢測(cè)
    3.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法
第四章 結(jié)果
    4.1 小鼠的臨床表現(xiàn)
    4.2 EAMG模型臨床評(píng)分
    4.3 小鼠體重的變化
    4.4 免疫熒光觀察
    4.5 血清中IL-12的濃度
    4.6 血清中IFN-γ的濃度
    4.7 血清中IL-17的濃度
第五章 討論
結(jié)論
參考文獻(xiàn)
致謝



本文編號(hào)：3689627