膠質(zhì)瘤是最常見的顱內(nèi)惡性腫瘤，約占40％-50％，腫瘤呈浸潤性生長，手術(shù)往往難以徹底切除，術(shù)后復(fù)發(fā)率高。其中膠質(zhì)母細(xì)胞瘤惡性度最高，預(yù)后最差，平均生存期不超過1年。膠質(zhì)瘤現(xiàn)在的治療方案，仍然是手術(shù)治療為主，不能夠手術(shù)的，采取放射治療和化學(xué)治療；或者術(shù)后結(jié)合放、化療。隨著神經(jīng)外科的發(fā)展，特別是神經(jīng)導(dǎo)航及術(shù)中MRI的應(yīng)用，使得手術(shù)切除更徹底、更安全，但仍未解決復(fù)發(fā)問題�；瘜W(xué)治療是治療膠質(zhì)瘤的重要手段，但療效不能令人滿意，這也提示膠質(zhì)瘤的化療還有很大提升空間，值得去努力探索，尋找更好、更有效的化療藥物就成了膠質(zhì)瘤治療研究的重要方向。 泛素-蛋白酶體系統(tǒng)是細(xì)胞內(nèi)重要的蛋白質(zhì)水解系統(tǒng)，主要選擇性降解細(xì)胞內(nèi)的異常蛋白質(zhì)和許多細(xì)胞調(diào)節(jié)蛋白，廣泛參與調(diào)控細(xì)胞代謝、分化和增殖，與腫瘤發(fā)生發(fā)展密切相關(guān)。因此，抑制蛋白酶體活性已成為一種新的惡性腫瘤治療策略。蛋白酶體抑制劑能夠與20S蛋白酶體的酶解活性位點(diǎn)相結(jié)合，阻斷蛋白酶體對靶蛋白的降解。抑制蛋白酶體的活性能夠抑制多種腫瘤細(xì)胞的增殖，包括黑色素瘤、前列腺癌細(xì)胞和神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞，但其基本機(jī)制還未完全闡明�；诖�，我們通過實(shí)驗(yàn)來探討蛋白酶體抑制劑MG-... 

【文章頁數(shù)】：107 頁

【學(xué)位級別】：博士

【文章目錄】：
中文摘要
Abstract
第1章 引言
第2章 文獻(xiàn)綜述
    2.1 泛素-蛋白酶體系統(tǒng)
        2.1.1 底物的泛素化
        2.1.2 蛋白酶體
    2.2 UPP 與氧化應(yīng)激
        2.2.1 UPP 在蛋白質(zhì)質(zhì)量控制中的作用
        2.2.2 UPP 對氧化應(yīng)激的反應(yīng)以及氧化應(yīng)激對 UPP 的影響
        2.2.3 UPP 在降解氧化損害蛋白中的作用及對氧化應(yīng)激反應(yīng)
        2.2.4 UPP 活性受細(xì)胞氧化還原狀態(tài)的控制
        2.2.5 UPP 和細(xì)胞內(nèi)抗氧化系統(tǒng)的相互作用
        2.2.6 泛素結(jié)合物水平的升高是慢性溫和氧化應(yīng)激的指示劑
        2.2.7 UPP 相關(guān)的氧化應(yīng)激反應(yīng)的生理意義
    2.3 UPP 與腫瘤
        2.3.1 UPP 與細(xì)胞周期調(diào)控
        2.3.2 UPP 對細(xì)胞凋亡的調(diào)節(jié)
        2.3.3 UPP 對關(guān)鍵蛋白和其他信號傳導(dǎo)途徑的調(diào)節(jié)
        2.3.4 非降解作用的泛素化修飾與 DNA 修復(fù)
        2.3.5 UPP 與腫瘤的診斷與預(yù)后
        2.3.6 針對 UPP 的抗腫瘤治療
第3章 實(shí)驗(yàn)材料和方法
    3.1 實(shí)驗(yàn)材料
        3.1.1 主要試劑
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 細(xì)胞株
        3.1.4 主要試劑的配制
    3.2 實(shí)驗(yàn)方法
        3.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        3.2.2 MTT 檢測法
        3.2.3 Hoechst 33342 染色法
        3.2.4 鋨鈾鉛染色透射電鏡觀察
        3.2.5 蛋白酶體活性測定
        3.2.6 細(xì)胞內(nèi) ROS 的測定
        3.2.7 流式細(xì)胞儀檢測細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期
        3.2.8 Western Blot 檢測 Bax、bcl-2、Caspase-3、XIAP 和 PARP 蛋白的表達(dá)
第4章 實(shí)驗(yàn)結(jié)果
    4.1 MG-132 對 C6 膠質(zhì)瘤細(xì)胞增殖抑制作用結(jié)果
    4.2 蛋白酶體的糜蛋白酶樣活性檢測結(jié)果
    4.3 細(xì)胞內(nèi)活性氧的檢測結(jié)果
    4.4 HOECHST 33342 染色結(jié)果
    4.5 透射電鏡檢查結(jié)果
    4.6 鈦試劑抑制 MG-132 誘導(dǎo)的細(xì)胞凋亡和細(xì)胞周期阻滯
    4.7 抗氧化鈦試劑改變細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白的表達(dá)
第5章 討論
第6章 結(jié)論
參考文獻(xiàn)
攻讀博士學(xué)位期間發(fā)表的論文及科研成果
致謝


【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]泛素連接酶E3和腫瘤關(guān)系的研究進(jìn)展[J]. 程翌,鄭國榮.  實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志. 2009(08)



本文編號：3682822