腦膠質(zhì)瘤（glioma）是人最常見的一種顱內(nèi)原發(fā)惡性腦腫瘤,其最大特性就是具有侵襲性的生長方式,較容易侵入到周圍正常腦組織,因此很難通過外科手術(shù)徹底清除腫瘤組織。與此同時,手術(shù)刺激還可能會誘導腫瘤組織脫離瘤體,進一步加深膠質(zhì)瘤在正常腦組織中的侵襲程度。針對術(shù)后殘留的腫瘤細胞,主要采用放療、化療等措施來加以殺滅,然而這些術(shù)后殘留的病變組織通常對放療、化療等措施表現(xiàn)出較強的抵抗性,導致腫瘤復發(fā),患者預后不佳。鑒于現(xiàn)階段針對膠質(zhì)瘤的治療效果尚不令人滿意,我們主要探究膠質(zhì)瘤細胞增殖和遷移的機制,希望能在膠質(zhì)瘤形成初期就抑制其增殖與遷移,將膠質(zhì)瘤控制在一定范圍內(nèi),避免其侵襲到重要的功能區(qū),以便更好的通過外科手術(shù)徹底切除瘤體,盡可能減少對正常組織的損傷。本文首次證實NTS及其1號受體NTSR1在膠質(zhì)瘤細胞增殖和遷移過程中發(fā)揮作用。通過體外實驗我們研究了NTS以及NTSR1對膠質(zhì)瘤細胞系GL261增殖和遷移的影響,利用NTSR1的特異性拮抗劑SR48692處理GL261,分析NTSR1表達受到抑制之后GL261的增殖和遷移過程受到的影響；同時還探討了該過程所涉及的ERK信號傳導途徑,即NTSR1激活... 

【文章頁數(shù)】：90 頁

【學位級別】：碩士

【文章目錄】：
摘要
ABSTRACT
第一章 文獻綜述
    1.1 概述
    1.2 神經(jīng)緊張素及其受體概述
        1.2.1 神經(jīng)緊張素結(jié)構(gòu)及其生理功能概述
        1.2.2 神經(jīng)緊張素受體種類及生理功能概述
    1.3 NTS能促進正常器官生長
        1.3.1 胃
        1.3.2 小腸
        1.3.3 結(jié)腸
        1.3.4 胰腺
        1.3.5 腎上腺
    1.4 NTS及其受體對能促進腫瘤增殖生長
        1.4.1 胰腺癌
        1.4.2 結(jié)腸癌
        1.4.3 乳腺癌
        1.4.4 前列腺癌
        1.4.5 肺癌
        1.4.6 胃癌
    1.5 小結(jié)
第二章 引言
    2.1 研究背景及意義
    2.2 主要內(nèi)容和技術(shù)路線
第三章 NTSR1在膠質(zhì)瘤組織和細胞的表達以及其對細胞增殖遷移能力的影響
    3.1 材料及試劑
        3.1.1 材料
        3.1.2 主要儀器
        3.1.3 主要試劑
        3.1.4 主要抗體
    3.2 實驗方法
        3.2.1 免疫組織化學
        3.2.2 細胞培養(yǎng)與傳代
        3.2.3 小鼠NTSR1干擾RNA的設計與載體構(gòu)建及轉(zhuǎn)染
        3.2.4 免疫細胞熒光染色
        3.2.5 CCK-8測細胞生長曲線
        3.2.6 劃痕實驗
        3.2.7 Transwell細胞穿孔實驗
        3.2.8 統(tǒng)計學處理
    3.3 結(jié)果與分析
        3.3.1 NTSR1各級別人腦膠質(zhì)瘤組織以及鼠腦膠質(zhì)瘤細胞系GL261中的表達
        3.3.2 NTSR1對GL261細胞增殖的影響
        3.3.3 NTSR1對GL261細胞遷移的影響
    3.4 討論
        3.4.1 NTS/NTSR1在鼠膠質(zhì)瘤細胞系GL261細胞生長演進中的作用和意義
        3.4.2 NTSR1橫向受體的交叉關(guān)聯(lián)以及研究進一步可能的工作
第四章 小鼠腦膠質(zhì)瘤模型的建立以及NTSR1對小鼠生存率的影響
    4.1 材料及試劑
        4.1.1 材料
        4.1.2 主要儀器
        4.1.3 主要試劑
    4.2 實驗方法
        4.2.1 注射小鼠前期準備工作
        4.2.2 C57小鼠顱內(nèi)移植瘤模型的建立
        4.2.3 注射藥物
        4.2.4 測定小鼠生存率
        4.2.5 小鼠大腦切片H.E.染色和免疫組化染色
    4.3 結(jié)果與分析
        4.3.1 C57小鼠生存期對比
        4.3.2 C57小鼠大腦切片H.E.染色結(jié)果
        4.3.3 C57小鼠大腦切片免疫組化染色結(jié)果
    4.4 討論
        4.4.1 建立小鼠腦膠質(zhì)瘤模型的作用和意義
        4.4.2 研究未完善的工作,存在的問題和進一步可能的工作
第五章 NTSR1激活引起的ERK蛋白磷酸化在膠質(zhì)瘤細胞增殖與遷移過程中的作用
    5.1 材料及試劑
        5.1.1 材料
        5.1.2 主要儀器
        5.1.3 主要試劑
        5.1.4 主要試劑配制
    5.2 實驗方法
        5.2.1 細胞樣本準備
        5.2.2 總蛋白抽提
        5.2.3 上樣樣品準備
        5.2.4 SDS-PAGE
        5.2.5 免疫顯色
        5.2.6 條帶分析
    5.3 結(jié)果與分析
        5.3.1 NTS、SR48692和NTS-NA影響GL261細胞的ERK1/2蛋白磷酸化的修飾
        5.3.2 siRNA對NTSR1干擾之后影響GL261細胞的ERK1/2蛋白磷酸化的修飾
    5.4 討論
        5.4.1 ERK1/2在細胞增殖和遷移中的作用
        5.4.2 NTSR1下游信號通路的其他癌效應
第六章 結(jié)論
參考文獻
在讀期間發(fā)表論文及參研課題情況
致謝



本文編號：3673906