發(fā)布時間：2017-04-22 20:01

  本文關(guān)鍵詞：錳中毒性帕金森綜合征大鼠腦DMT1、FP1表達(dá)變化的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：本課題研究錳中毒性帕金森綜合征大鼠腦黑質(zhì)二價金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體(DMT1)、鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白(FP1)的表達(dá)變化。了解錳中毒性帕金森綜合征大鼠黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元損傷、錳鐵積聚、鐵轉(zhuǎn)運(yùn)相關(guān)蛋白表達(dá)變化之間的關(guān)系,探討DMT1、FP1在錳中毒性帕金森綜合征錳積聚中的作用。為以后錳中毒性帕金森綜合征的預(yù)防和治療提供分子生物學(xué)研究的依據(jù)。方法：健康SD大鼠80只,年齡3～4個月,體重180～200 g(由廣西醫(yī)科大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物中心提供),隨機(jī)分為對照組(n=20)、低劑量染錳組(n=20)、中劑量染錳組(n=20)和高劑量染錳組(n=20)。4組大鼠均經(jīng)腹腔注射,對照組腹腔注射等量生理鹽水,低、中、高劑量組分別腹腔注射MnCl2溶液5、15、20mg/kg,注射時間：每周注射6天,連續(xù)16周。16周后行為學(xué)測試：(1)單顆粒食物攝取試驗(yàn),定性評估對執(zhí)行性能的分析；(2)平衡木試驗(yàn),評估大鼠中毒后有無平衡功能失調(diào)；(3)水迷宮試驗(yàn)：評估大鼠學(xué)習(xí)記憶能力。應(yīng)用電感耦合等離子體原子發(fā)射光譜法(ICP-AES)方法測試大鼠中腦黑質(zhì)錳含量,免疫組織化學(xué)染色方法觀察黑質(zhì)多巴胺能神經(jīng)元酪氨酸羥化酶(TH)陽性表達(dá)量,判定錳中毒性帕金森綜合征大鼠模型是否成功制備,再采用免疫組織化學(xué)染色及實(shí)時熒光定量PCR (realtime PCR)的方法測定大鼠腦黑質(zhì)DMT1、FP1的表達(dá)量。結(jié)果：1.體重：整體大鼠體重呈增長趨勢,但染錳組大鼠體重增長逐漸減慢,中劑量和高劑量組明顯,各組平均體重有明顯差異,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(F=527.387,P0.01)。2.行為學(xué)測試：(1)單顆粒食物攝取試驗(yàn)：評分后經(jīng)統(tǒng)計(jì),F=4.253,P=0.007,可以認(rèn)為四次測試中對照組、低劑量組、中劑量組、高劑量組取得食物顆粒數(shù)量差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。(2)平衡木試驗(yàn)：每只大鼠評分3次,取其平均值作為最后評分結(jié)果,F=209.15,P0.01,差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,進(jìn)一步進(jìn)行組間兩兩比較,均為P0.05。(3)水迷宮試驗(yàn)：隨著染錳劑量的升高,逃避潛伏期時間延長,中、高劑量組與對照組大鼠間出現(xiàn)明顯差異(P0.05)。第6天撤去平臺后,低、中、高劑量組游泳穿越平臺次數(shù)均較對照組大鼠越少。3.與對照組相比,低、中、高染錳組大鼠中腦黑質(zhì)錳含量顯著升高(0.56±0.20 vs 1.72±0.33,2.92±0.77,5.65±1.60),F=115.24,P0.01,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義,進(jìn)一步進(jìn)行兩兩比較,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。4.與對照組相比,低、中、高染錳組中腦黑質(zhì)TH免疫陽性細(xì)胞平均光密度值降低(0.109±0.019vs 0.054±0.008,0.016±0.004,0.003±0.001),F=200.85,P0.01。與對照組相比,中、高染錳組中腦黑質(zhì)DMT1免疫陽性細(xì)胞平均光密度值較對照組顯著升高(0.015±0.007 vs 0.062±0.004,0.116±0.064),F=19.003,P0.05。與對照組相比,低、中、高染錳組中腦黑質(zhì)FP1免疫陽性細(xì)胞平均光密度值較對照組明顯減少(0.306±0.081 vs0.092±0.011,0.048±0.008,0.008±0.002),F=105.163,P0.05。5.與對照組相比,中、高染錳組中腦黑質(zhì)DMT1 mRNA表達(dá)量較對照組升高(0.001±0.0004 vs 0.052±0.0126,0.124±0.0299),F=119.43,P0.05。與對照組相比,低、中、高染錳組中腦黑質(zhì)FP1mRNA表達(dá)量較對照組下降(0.162±0.0463 vs0.059±0.0076,0.033±0.0094,0.002±0.0007),F=84.309,P0.05。結(jié)論：1.染錳16周后,各組染錳大鼠均出現(xiàn)不同程度體重增長緩慢、學(xué)習(xí)記憶能力下降、運(yùn)動障礙、肌張力增高、平衡功能受損等癥狀,可判定成功制備錳中毒性帕金森綜合征大鼠模型；2.各染錳組大鼠黑質(zhì)的TH免疫陽性神經(jīng)元出現(xiàn)顯著降低,可能與多巴胺能神經(jīng)元的缺失有關(guān)；3.錳中毒性帕金森綜合征大鼠模型中,DMT1表達(dá)增加及FP1表達(dá)降低可能參與腦黑質(zhì)錳積聚及多巴胺能神經(jīng)元缺失的發(fā)生發(fā)展過程。
【關(guān)鍵詞】：錳中毒性帕金森綜合征 二價金屬離子轉(zhuǎn)運(yùn)體 鐵轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白
【學(xué)位授予單位】：廣西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R742.5
【目錄】：

• 個人簡歷3-6
• 中文摘要6-9
• 英文摘要9-13
• 前言13-17
• 材料與方法17-28
• 結(jié)果28-37
• 討論37-44
• 結(jié)論44-45
• 參考文獻(xiàn)45-51
• 附錄：英文縮略表51-52
• 綜述：錳神經(jīng)毒性及介導(dǎo)錳、鐵腦內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)的載體的研究進(jìn)展52-74
• 參考文獻(xiàn)65-74
• 致謝74-75
• 攻讀學(xué)位期間發(fā)表的學(xué)術(shù)論文75-76
• 附件76-80

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前6條

1 盧玲;錳干擾鐵代謝致神經(jīng)毒性的作用機(jī)制[J];國外醫(yī)學(xué)(衛(wèi)生學(xué)分冊);2002年03期

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本文編號：321132