癲癇患者外周血miR-134表達(dá)及意義
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【摘要】:目的:1、探討mi R-134在癲癇患者外周血中是否存在差異表達(dá)。能否作為特異性生物學(xué)標(biāo)志物應(yīng)用于癲癇診斷、藥物療效評價以及預(yù)后評估。2、探討影響mi R-134在癲癇患者外周血表達(dá)的因素,是否與病程、發(fā)作頻率、發(fā)作時限、發(fā)作間期腦電活動及特殊癲癇綜合征相關(guān)。方法:病例隨機(jī)采集于吉林大學(xué)中日聯(lián)誼醫(yī)院門診及病區(qū)2013年12月-2015年12月就診者,根據(jù)腦電圖及臨床表現(xiàn)可明確診斷的癲癇患者。詳細(xì)記錄相關(guān)的基本信息,清晨空腹時采集肘靜脈血液4-5ml,標(biāo)本采集后離心,條件為4000rprn,溫度設(shè)置4°,離心后取上清,所取標(biāo)本經(jīng)上述處理后,于-80℃冰箱保存待檢。待各組標(biāo)本收集完畢,使用Trizol提取血清中RNAs,使用NCode?VILO?mi RNA c DNA Synthesis Kit and EXPRESS SYBR?Green ER?mi RNA q RTPCR Kits試劑盒進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄及實時熒光定量PCR檢測樣本中mi R-134表達(dá)量,根據(jù)病程、發(fā)作頻率、發(fā)作時限、發(fā)作間期腦電活動及特殊癲癇綜合征將病例進(jìn)行分組,使用SPSS22.0軟件對所得各組數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析,采用t檢驗、X2檢驗、Wilcoxon Mann-Whitney秩和檢驗、Kruskal-Wallis H秩和檢驗,P值0.05被認(rèn)為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。結(jié)果:1.癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量顯著升高,與對照組相比差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.029)。2.病程對癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量有影響,病程長mi R-134表達(dá)量也增高。癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量在病程≤1年組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.384);病程1年組與正常組相比明顯明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.021);病程1年組與病程≤1年組相比明顯升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.047)。3.發(fā)作頻率對癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量無明顯影響。癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量在頻繁發(fā)作組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.059);發(fā)作控制不良組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.178);發(fā)作控制良好組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.060);頻繁發(fā)作組、發(fā)作控制不良組、發(fā)作控制良好組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.749)。4.發(fā)作時限對癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量有一定影響,在急性發(fā)作組中mi R-134表達(dá)量明顯升高。外周血mi R-134表達(dá)量在急性發(fā)作組與正常組相比顯著升高,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000);非急性發(fā)作組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.062);急性發(fā)作組與非急性發(fā)作組相比顯著升高,差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.000)。5.發(fā)作間期腦電活動對癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量無明顯影響。癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量在棘波指數(shù)≤10%組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.405);棘波指數(shù)≥50%組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.555);棘波指數(shù)≤10%組與棘波指數(shù)≥50%組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.606)。6.特殊癲癇綜合征(顳葉癲癇)對癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量無特殊影響。癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量在顳葉癲癇組與正常組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.115);非顳葉癲癇組與正常組相比,差異具有統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.030);顳葉癲癇組與非顳葉癲癇組相比差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P=0.768)。結(jié)論:1.癲癇患者外周血mi R-134表達(dá)量明顯升高,提示mi R-134可以成為癲癇血清學(xué)標(biāo)志物進(jìn)行深入研究。2.mi R-134在癲癇患者外周血中表達(dá)量與病程、發(fā)作時限相關(guān)。及時控制癲癇發(fā)作,有利于降低mi R-134表達(dá),減輕病理損傷,使癲癇易于控制。
【關(guān)鍵詞】:miR-134 突觸重塑 顳葉癲癇 棘波指數(shù)
【學(xué)位授予單位】:吉林大學(xué)
【學(xué)位級別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2016
【分類號】:R742.1
【目錄】:
- 中文摘要4-6
- Abstract6-12
- 第1章 前言12-15
- 第2章 實驗材料與方法15-22
- 2.1 實驗材料15
- 2.1.1 主要實驗儀器15
- 2.1.2 實驗試劑15
- 2.2 研究內(nèi)容及方法15-19
- 2.2.1 研究對象的納入及排除標(biāo)準(zhǔn)15-16
- 2.2.2 實驗內(nèi)容16-19
- 2.3 實驗方法19-21
- 2.3.1 外周血采集及保存19
- 2.3.2 RNA的提取、逆轉(zhuǎn)錄及qPCR19-21
- 2.4 統(tǒng)計分析21-22
- 第3章 實驗結(jié)果22-27
- 3.1 癲癇組及健康對照組臨床特征22
- 3.2 癲癇患者外周血mi R-134 的表達(dá)22-27
- 第4章 討論27-30
- 第5章 結(jié)論30-31
- 參考文獻(xiàn)31-34
- 綜述34-42
- 參考文獻(xiàn)39-42
- 附錄42-43
- 作者簡介及在學(xué)期間所取得科研成果43-44
- 致謝44
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