目的:高血脂合并腦缺血與單純腦缺血后,檢測不同再灌注時間點p38和MMP-9的表達,觀察高血脂對腦缺血再灌注損傷后p38和MMP-9表達的影響;檢測使用p38抑制劑SB203580后p38和MMP-9表達的變化,探索在腦缺血再灌注損傷過程中p38和MMP-9之間的作用。方法:SPF級SD雄性大鼠120只高脂飼料喂養(yǎng),98只普通飼料喂養(yǎng);高脂模型建立后,采用Zea-longa線栓法建立腦缺血再灌注模型。分組為:假手術(shù)組(sham)、腦缺血再灌注組(IR)、高血脂合并腦缺血再灌注組(G+IR),每組又分六個亞組,分別為缺血2h再灌注2h、6h、12h、24h、48h、72h;高血脂大鼠分4組,假手術(shù)并給予SB203580組、假手術(shù)并給予DMSO組、缺血2h再灌注24h并給予SB203580組和缺血2h再灌注24h并給予DMSO組。在相應(yīng)時間點處進行神經(jīng)行為學(xué)評分及TTC染色判斷模型成功與否。采用EB染色檢測血腦屏障通透性、Nissl染色觀察神經(jīng)元形態(tài)、免疫組化及免疫印跡法檢測p38和MMP-9表達、RT-PCR檢測MMP-9 m RNA量。結(jié)果:與假手術(shù)組比較,高血脂合并腦缺血再灌注組和單純腦缺血再灌注組神經(jīng)行為學(xué)評分升高,P0.05。G+IR組較IR組神經(jīng)行為學(xué)評分明顯升高,P0.05。TTC染色結(jié)果顯示:G+IR組較IR組梗死灶體積擴大,P0.05;且再灌注24h時梗死灶體積達峰值。EB染色結(jié)果顯示:與sham組比較,IR組和G+IR組腦組織中EB含量均明顯升高,P0.05;且G+IR組較IR組腦組織中EB含量明顯增多,P0.05;再灌注24h時EB含量最高。Nissl染色顯示神經(jīng)元形態(tài),G+IR組和IR組細胞形態(tài)改變,結(jié)構(gòu)疏松紊亂,尼氏體邊集、降解。免疫組化及免疫印跡檢測p38和MMP-9表達,兩者在再灌注2h時表達開始增加,且隨再灌注時間延長表達量逐漸增加,再灌注24h時達峰值,隨后又逐漸降低;G+IR組較IR組p38和MMP-9在各灌注時間點表達量均明顯升高,P0.05。與給予DMSO的組比較,SB203580抑制劑組p38和MMP-9表達量均明顯降低,P0.05;同時梗死灶體積明顯縮小,EB含量明顯降低,神經(jīng)行為學(xué)評分也較DMSO組明顯降低,P0.05。結(jié)論:高血脂通過上調(diào)p38和MMP-9而加重腦缺血再灌注損傷;在腦缺血再灌注損傷過程中p38和MMP-9表達變化一致,抑制p38表達后MMP-9表達也降低,p38可能間接調(diào)節(jié)MMP-9的表達,共同發(fā)揮作用參與血腦屏障的破壞。
【學(xué)位單位】：山西醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位年份】：2015
【中圖分類】：R589.2;R743.3
【部分圖文】：

圖 2-1 神經(jīng)損傷癥狀顯示梗死灶染成粉紅色，白色區(qū)域為梗死灶，圖 2-2。假手術(shù)組未再灌注組及單純腦缺血再灌注組均可見明顯梗死區(qū)；與脂合并腦缺血再灌注組梗死灶體積增大 P<0.05，同組增大，再灌注 24h 時出現(xiàn)峰值，而后又不斷減小，結(jié)果

圖 2-1 神經(jīng)損傷癥狀.3 TTC 染色顯示梗死灶正常組織染成粉紅色，白色區(qū)域為梗死灶，圖 2-2。假手術(shù)組未見梗死灶，合并腦缺血再灌注組及單純腦缺血再灌注組均可見明顯梗死區(qū)；與單純腦缺血組比較,高血脂合并腦缺血再灌注組梗死灶體積增大 P<0.05，同組內(nèi)不同時間灶體積逐漸增大，再灌注 24h 時出現(xiàn)峰值，而后又不斷減小，結(jié)果見表 2-3。

IR 18 5.18±0.37*8.6±0.32*15.46±0.36*25.38±0.31*20.74±0.30*10.94±0+IR 18 10.32±0.33*#16.38±0.33*#23.32±0.38*#39.32±0.37*#28.7±0.65*#17.98±0.注：*與假手術(shù)組比較，P<0.05。#與單純腦缺血再灌注組比較，P<0.05。2.1.4 伊文思藍（EB）染色檢測血腦屏障通透性單純腦缺血再灌注組和高血脂合并腦缺血再灌注組腦組織伊文思藍含量均較假手術(shù)組增高，P<0.05；并且不同灌注時間高血脂合并腦缺血再灌注組伊文思藍含量均明顯高于單純腦缺血再灌注組，P<0.05，結(jié)果見表 2-4、圖 2-3。表 2-4 腦組織伊文思藍含量（x±s，μg/g）Group N 2h 6h 12h 24h 48h 72hsham 3 0.49±0.03IR 18 0.90±0.08*1.38±0.15*4.20±0.36*8.11±0.23*6.49±0.23*1.86±0.1G+IR 18 1.83±0.12*#2.31±0.15*#5.68±0.17*#9.24±0.41*#7.90±0.33*#3.07±0.12注：*與假手術(shù)組比較，P<0.05。#與單純腦缺血再灌注組比較，P<0.05。
【參考文獻】

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本文編號：2890396