研究背景 隨著我國進入老齡化社會，腦卒中發(fā)生率每年以8.0%左右的速度在上升，腦卒中具有極高的致死率和致殘率，給患者及家屬帶來極大的痛苦以及沉重的經(jīng)濟負擔，已成為我國突出的一個公共衛(wèi)生問題。缺血性腦卒中(Ischemic stroke,IS)作為腦卒中最為常見的類型，是一種受遺傳及環(huán)境共同影響的多基因、多因素的慢性疾病。雖然針對此病進行了大量的相關(guān)研究，但其發(fā)病機制仍未能得到徹底闡明。 微小RNA（microRNA,miRNA）是基因表觀遺傳調(diào)控中的組成部分，在心腦血管疾病發(fā)生與發(fā)展中發(fā)揮著重要作用。已有研究表明，腦卒中患者外周血miR-221表達水平明顯降低，miR-222與動脈斑塊破裂以及血管增生的過程有關(guān)，但未進一步驗證與缺血性腦卒中的關(guān)系。本課題組前期研究表明，脾酪氨酸激酶（Spleen tyrosine kinase,Syk）基因多態(tài)性和中國漢族人群缺血性腦卒中的易感性有關(guān)。我們采用生物信息學方法對可能調(diào)控Syk基因的miRNAs進行篩選，選取了miR-622和miR-649進行檢測，并通過已有的文獻報道選取了miR-221和miR-222進行檢測。初步探索4個miRNAs在缺血性腦卒中的作用。 研究目的 檢測并比較缺血性腦卒中患者和健康對照人群外周血液循環(huán)miR-221、miR-222、miR-622、miR-649表達水平，探討其與缺血性腦卒中發(fā)生的關(guān)聯(lián)，以及作為缺血性腦卒中發(fā)病風險預測標志物的可行性。 對象與方法 采用病例對照研究，選取52對缺血性腦卒中患者與健康人群對照，抽取肘靜脈血液，全血提取總RNA，用實時熒光定量PCR方法，檢測兩組外周循環(huán)血液中miR-221、miR-222、miR-622、miR-649的表達量是否有差異；利用SPSS21.0軟件對數(shù)據(jù)進行統(tǒng)計學分析，運用One-Sample K-S檢驗方法對連續(xù)性變量進行正態(tài)性檢驗，分布用平均值±標準差（x±s）表示，并采用Student’s t檢驗，兩組或多組樣本間比較采用Mann-Whitney U檢驗或多個獨立樣本秩和檢驗（H檢驗）比較組間差異，分類資料組間比較采用卡方檢驗，Logistic回歸對miRNAs與缺血性腦卒中的發(fā)生進行關(guān)聯(lián)性分析，并采用ROC曲線分析評價miRNAs在缺血性腦卒中發(fā)病風險預測中的價值。 結(jié)果 病例組miR-221、miR-622表達水平分別為(0.62±0.20)、(0.636±0.462)×10-3低于健康對照(0.88±0.16)、(1.571±0.325)×10-3，而miR-649表達水平為(0.545±0.223)×10-3高于健康對照(0.311±0.136)×10-3，差異具有統(tǒng)計學意義(P＜0.05)；miR-222表達水平在兩組間的差異不具有顯著性(P＞0.05)；多因素Logistic回歸分析，miR-221、miR-622、miR-649的OR值分別為3.88，8.13，3.84；miR-221、miR-622、miR-649結(jié)合缺血性腦卒中的傳統(tǒng)危險因素進行ROC曲線分析，曲線下面積分別為0.895，0.924，0.969。 結(jié)論 1.外周血miR-221、miR-622、miR-649表達水平與缺血性腦卒中的發(fā)生有顯著關(guān)聯(lián)。 2.外周血miR-221、miR-622、miR-649有望成為缺血性腦卒中發(fā)病風險預測的生物標志物。 3. miRNA能顯著改善以傳統(tǒng)危險因素為基礎(chǔ)的預測模型。
【學位單位】：鄭州大學
【學位級別】：碩士
【學位年份】：2014
【中圖分類】：R743.3
【文章目錄】：
摘要
Abstract
中英文縮略詞
1 前言
    1.1 腦卒中
    1.2 miRNA 與腦卒中
    1.3 Syk 與腦卒中
    1.4 生物信息學技術(shù)與 miRNA
2 對象與方法
    2.1 研究對象
    2.2 資料收集
    2.3 主要儀器和試劑
        2.3.1 實驗主要儀器
        2.3.2 實驗耗材及試劑
        2.3.3 引物的設(shè)計及內(nèi)參選擇
    2.4 血液樣本采集
    2.5 外循環(huán)血細胞總 RNA 提取
    2.6 miRNA 逆轉(zhuǎn)錄和實時熒光定量
    2.7 統(tǒng)計學分析
3 結(jié)果
    3.1 內(nèi)參的選擇分析
    3.2 對照組與病例組一般情況及生化指標的比較
    3.3 病例與健康對照組血液中 miRNA 的表達
    3.4 差異表達的 miRNAs 在缺血性腦卒中病例 TOAST 分型中的分析
    3.5 差異表達的 miRNAs 在兩組中與各指標的相關(guān)性分析
    3.6 差異表達的 miRNAs 與缺血性腦卒中發(fā)生的關(guān)聯(lián)性分析
    3.7 miRNAs 的 ROC 曲線分析
4 討論
5 結(jié)論
參考文獻
綜述
    參考文獻
附錄
個人簡歷、攻讀碩士學位期間發(fā)表的學術(shù)論文與研究成果
致謝

【參考文獻】

相關(guān)期刊論文 前1條

1 顧力華;陳斌;魏丹霞;鄧紅;何紹平;龔瑞瑩;龐永誠;;急性腦梗死TOAST分型與危險因素的關(guān)系[J];實用心腦肺血管病雜志;2013年02期

本文編號：2890187