鞘內(nèi)注射人臍帶間充質(zhì)干細胞對大鼠神經(jīng)病理性疼痛的影響
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【摘要】:目的觀察鞘內(nèi)注射人臍帶間充質(zhì)干細胞(h UC-MSCs)對脊神經(jīng)結(jié)扎(SNL)大鼠神經(jīng)病理性疼痛(NP)行為學、炎癥因子水平、脊髓背角小膠質(zhì)細胞和星形膠質(zhì)細胞激活的影響。方法選擇鞘內(nèi)置管成功無運動功能異常的成年雄性SD大鼠48只,體重150-200g,隨機均分為3組(n=16):Sham組(假手術(shù)+細胞培養(yǎng)液)、Control組(SNL+細胞培養(yǎng)液)、Treatment組(SNL+hUC-MSCs)。SNL術(shù)后第3天Sham組和Control組鞘內(nèi)注射細胞培養(yǎng)液,Treatment組鞘內(nèi)注射hUC-MSCs。各組分別于術(shù)前1d(基礎值)和術(shù)后3、7、14d測機械痛閾(Mechanical paw withdrawal threshold,PWT)和熱痛閾(Thermal paw withdrawal latency,PWL)。術(shù)后14d痛閾測定后取SD大鼠新鮮脊髓組織,行酶聯(lián)免疫吸附試驗(Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)測定炎癥因子水平,免疫熒光及免疫印跡(Western Blot,WB)法測脊髓背角星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞激活情況。結(jié)果1.與Sham組比較,Control組術(shù)后3、7、14d PWT及PWL均降低(P0.05)。與control組比較,Treatment組術(shù)后7、14d PWT和PWL明顯升高(P0.05)。2.與Sham組比較,Control組的促炎癥因子水平明顯升高(P0.05)。與Control組比較,Treatment組促炎癥因子水平明顯降低(P0.05)。與Control組比較,Treatment組抗炎癥因子水平升高(P0.05),3.與Sham組比較,Control組的膠質(zhì)纖維酸性蛋白(GFAP)及離子鈣接頭蛋白分子1(Iba-1)表達明顯增多(P0.05)。Treatment組與Control組比較,GFAP及Iba-1表達明顯減少(P0.05)。結(jié)論鞘內(nèi)注射hUC-MSCs可以通過減少促炎因子水平,增加抗炎因子水平,抑制星形膠質(zhì)細胞和小膠質(zhì)細胞的激活從而對SNL模型引起的NP起到治療的作用。
【關(guān)鍵詞】:神經(jīng)病理性疼痛 人臍帶間充質(zhì)干細胞 星形膠質(zhì)細胞 小膠質(zhì)細胞 炎癥因子
【學位授予單位】:南華大學
【學位級別】:碩士
【學位授予年份】:2016
【分類號】:R741
【目錄】:
- 摘要4-6
- Abstract6-8
- 中英文縮寫對照8-10
- 第一章 前言10-12
- 第二章 材料和方法12-24
- 2.1 主要設備和藥品12-16
- 2.2 實驗動物處理16
- 2.3 hUC-MSCs 的制備培養(yǎng)和鑒定16-17
- 2.4 動物模型制作17
- 2.5 機械痛閾和熱痛閾的測定17-18
- 2.6 ELISA 法檢測大鼠同側(cè)脊髓背角 IL-17A、IL-1β、IL-1018-19
- 2.7 免疫熒光染色標記19-20
- 2.8 Western blot 法檢測大鼠同側(cè)脊髓背角 GFAP 及 Iba-1 表達20-22
- 2.9 統(tǒng)計分析22-24
- 第三章 結(jié)果24-30
- 3.1 hUC-MSCs 流式細胞儀鑒定結(jié)果24-25
- 3.2 疼痛閾值測定25-26
- 3.3 各組大鼠脊髓背角 IL-17A、IL-1β、IL-10 水平26-27
- 3.4 各組脊髓背角 GFAP 及 Iba-1 免疫熒光標記染色表達27-29
- 3.5 各組大鼠脊髓背角 GFAP 及 Iba-1 表達29-30
- 第四章 討論30-34
- 第五章 結(jié)論34-36
- 參考文獻36-44
- 文獻綜述44-52
- 參考文獻48-52
- 攻讀碩士期間撰寫的論文52-54
- 致謝54
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