本文關鍵詞：外用葛根素治療白癜風臨床觀察及其作用機制的初步探討

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【摘要】：目的觀察外用1%、3%、5%葛根素乳膏治療局限型白癜風的臨床療效與安全性,并探討葛根素對正常人黑素細胞黑素合成的影響及可能的作用機制。方法臨床觀察;124例局限型白癜風患者進入該對照研究,有同一部位兩塊以上白斑,一靶白斑使用葛根素乳膏,另一靶白斑使用吡美莫司乳膏；完成為期3個月的隨訪,并在治療前和治療后分別行白癜風面積VASI評分、測相對黑素指數(RMI)、拍照。實驗室研究：噻唑藍(MTT)法、NaOH裂解法觀察葛根素對黑素細胞增殖及黑素合成作用,Western蛋白印跡法檢測葛根素對黑素細胞小眼畸形相關轉錄因子(MITF)、酪氨酸酶(TYR)、酪氨酸酶相關蛋白1(TRP-1)蛋白表達水平的影響；RT-PCR法檢測葛根素對黑素細胞MITF、TYR、TRP-1 mRNA的影響。結果臨床觀察結果：使用葛根素乳膏顯效7例(5.65%),好轉30例(24.19%),有效率為29.84%；使用1%吡美莫司乳膏顯效11例(8.87%),好轉35例(28.23%),有效率為37.10%；但兩者無統(tǒng)計學差異(P--0.460)。124例患者使用葛根素乳膏、吡美莫司乳膏治療前后的RMI均有統(tǒng)計學差異(P值均為0.000),兩種藥物對比,RMI值亦有統(tǒng)計學差異(P=0.025)；兩種藥物治療前后VASI評分無統(tǒng)計學差異。124例入選患者中年齡≤16歲的68例,使用葛根素乳膏有效率為38.2%,使用吡美莫司乳膏的有效率為36.76%；年齡16歲有56例,使用葛根素乳膏有效率為17.8%,使用吡美莫司乳膏的有效率為33.93%；葛根素組內不同年齡組兩者有統(tǒng)計學差異(P=0.003)。124例白癜風患者中白斑部位位于面頸部72例,使用葛根素乳膏有效率為40.3%,使用吡美莫司乳膏有效率為44.44%；白斑位于軀干52例,使用葛根素乳膏有效率15.4%,使用吡美莫司乳膏有效率為23.07%；葛根素組與吡美莫司組內不同白斑部位療效均有統(tǒng)計學意義(P分別為0.017,0.003)。124例患者中病程≤12個月的58例,使用葛根素乳膏有效率為31.0%,吡美莫司組有效率為39.66%；病程12月的66例,使用葛根素有效率為28.8%,吡美莫司有效率為31.28%；兩者均無統(tǒng)計學差異。實驗研究結果：1～40μmol/L濃度范圍內葛根素對體外培養(yǎng)的黑素細胞增殖影響與正常對照組相比,差異無統(tǒng)計學意義。與正常對照組相比,40μmol/L葛根素促進黑素細胞的黑素合成作用最明顯(P0.05),并可顯著增加MITF、TYR、TRP-1 mRNA及蛋白的表達(P0.05)。40μmol/L葛根素使MITF、TYR、TRP-1的蛋白表達量分別比正常對照組增加8.69%,10.28%和10.58%(P0.05)；并使MITF、TYR、TRP-1的mRNA表達量分別比正常對照組增加2.48倍,1.91倍和1.63倍(P0.05)。結論葛根素乳膏對年齡小于16歲的兒童白癜風療效較好,且對于面頸部白斑療效較軀干部位療效好。葛根素乳膏治療局限型白癜風的療效與1%吡美莫司乳膏相當,且安全性較好。葛根素可能可通過上調控MITF而上調TYR、TRP-1,從而促進黑素的合成,此實驗室實驗可為臨床葛根素治療白癜風提供理論依據。
【關鍵詞】：白癜風 黑素細胞 葛根素 吡美莫司 小眼畸形相關轉錄因子 酪氨酸酶
【學位授予單位】：浙江中醫(yī)藥大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2016
【分類號】：R758.41
【目錄】：

• 中文摘要5-7
• ABSTRACT7-9
• 前言9-11
• 第一部分 臨床觀察11-18
• 一、材料與方法11-13
• (一) 臨床觀察材料與方法11-13
• 1. 研究對象11
• 2. 入選標準11
• 3. 排除標準11
• 4. 試驗方法11-12
• 5. 療效標準及統(tǒng)計學方法12-13
• 二、結果13-18
• (一) 外用葛根素、吡美莫司乳膏療效與白癜風患者年齡、病程、部位的關系13-14
• (二) 外用葛根素、吡美莫司乳膏前后RMI、VASI評分14-15
• (三) 葛根素與吡美莫司乳膏臨床療效比較15-17
• (四) 安全性17-18
• 第二部分 實驗研究18-29
• 一、實驗材料與方法18-21
• (一) 實驗材料18-19
• 1. 試劑18
• 2. 藥物配置18
• 3. 實驗細胞18
• 4. 主要實驗儀器18-19
• (二) 實驗方法19-20
• 1. 細胞培養(yǎng)19
• 2. MTT法測定黑素細胞活性19
• 3. 黑素含量測定19-20
• 4. 蛋白免疫印跡法檢測MITF、TYR、TRP-1的蛋白表達20
• 5. 實時PCR檢測MITF、TYR、TRP-1的mRNA表達20
• (三) 統(tǒng)計學分析20-21
• 二、實驗結果21-24
• (一) 不同濃度葛根素對黑素細胞增殖率的影響21
• (二) 40 μ mol/L葛根素對黑素合成的影響21-22
• (三) 40 μ mol/L葛根素對MITF、TYR、TRP-1蛋白表達的影響22
• (四) 40 μ mol/L葛根素對MITF、TYR、TRP-1 mRNA表達的影響22-24
• 三、分析與討論24-28
• 四、小結28-29
• 結論29-30
• 參考文獻30-36
• 致謝36-37
• 附：文獻綜述37-44
• 參考文獻41-44
• 碩士研究生在讀期間發(fā)表的論文44

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