本文關(guān)鍵詞：糖皮質(zhì)激素持續(xù)使用導(dǎo)致銀屑病加重的機(jī)理探討和IL-20SNP rs1713239的功能研究

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【摘要】：第一部分糖皮質(zhì)激素持續(xù)使用導(dǎo)致銀屑病加重的機(jī)理探討 目的：銀屑病是一種常見(jiàn)的炎癥性皮膚病，糖皮質(zhì)激素一直作為銀屑病治療的一線治療，但是臨床發(fā)現(xiàn)患者長(zhǎng)期持續(xù)使用糖皮質(zhì)激素會(huì)出現(xiàn)疾病復(fù)發(fā)甚至加重現(xiàn)象。真皮γδ T細(xì)胞在銀屑病發(fā)病中起重要作用。真皮γδ T細(xì)胞表面表達(dá)CCR6，識(shí)別皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞表達(dá)CCL20趨化遷移至皮膚中發(fā)揮作用。本文通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)研究糖皮質(zhì)激素聯(lián)合IL-1β對(duì)于皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞CCL20的表達(dá)及真皮γδ T細(xì)胞功能的調(diào)節(jié)，以此初步探討糖皮質(zhì)激素長(zhǎng)期持續(xù)使用引起疾病加重的機(jī)理。 方法：應(yīng)用地塞米松聯(lián)合IL-1β刺激人HaCat細(xì)胞，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR法檢測(cè)細(xì)胞CCL20的表達(dá)；分離小鼠真皮細(xì)胞，體外給予地塞米松聯(lián)合IL-1β刺激，流式細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)真皮γδ T細(xì)胞中IL-17的表達(dá)；給予小鼠涂抹糖皮質(zhì)激素藥膏1個(gè)月，比較皮膚中TNF-α, IL-1β，IL-17，CCL20mRNA的表達(dá)。 結(jié)果：①地塞米松聯(lián)合IL-1β上調(diào)HaCat細(xì)胞中CCL20的表達(dá)。②地塞米松抑制了IL-β促進(jìn)真皮γδT細(xì)胞表達(dá)IL-17的能力。③在單純使用糖皮質(zhì)激素的情況下，小鼠皮膚中TNF-α, IL-1β，IL-17mRNA表達(dá)下降，，CCL20mRNA表達(dá)上調(diào)。 結(jié)論：糖皮質(zhì)激素聯(lián)合IL-1β上調(diào)HaCat細(xì)胞中CCL20的表達(dá)，促進(jìn)γδT細(xì)胞遷移至皮膚中，但同時(shí)抑制細(xì)胞表達(dá)IL-17的能力。 第二部分SNPrs1713239的功能研究 目的：銀屑病是一種常見(jiàn)的炎癥性皮膚病，由環(huán)境因素和遺傳背景聯(lián)合作用誘發(fā)疾病。IL-20啟動(dòng)子區(qū)存在著一個(gè)單核苷酸多態(tài)性（single-nucleotide polymorphism, SNP）位點(diǎn)（IL-20-1723C Grs1713239），與感染誘導(dǎo)發(fā)病的銀屑病有關(guān)。本文通過(guò)一系列實(shí)驗(yàn)研究IL-20SNP rs1713239的功能，以此初步探討環(huán)境因素和遺傳背景怎樣相關(guān)作用促進(jìn)銀屑病的發(fā)生發(fā)展。 方法：應(yīng)用IL-1β，CpG-A或LPS刺激人原代角質(zhì)形成細(xì)胞和HaCat細(xì)胞，通過(guò)實(shí)時(shí)定量PCR法，ELISA和流式細(xì)胞技術(shù)檢測(cè)細(xì)胞表達(dá)IL-20的能力；體外構(gòu)建攜帶該SNP不同等位基因的螢光素酶報(bào)告基因質(zhì)粒,分別轉(zhuǎn)染HaCat和HEK293t細(xì)胞，應(yīng)用IL-1β，CpG-A或LPS刺激細(xì)胞，比較不同等位基因?qū)?dòng)子活性的調(diào)節(jié)及對(duì)不同刺激物的反應(yīng)；收集36名尋常斑塊型銀屑病患者，根據(jù)該SNP位點(diǎn)攜帶的等位基因分組，比較兩組間皮損處皮膚檢測(cè)IL-20mRNA和蛋白水平的表達(dá)情況。 結(jié)果：①細(xì)菌核酸成分可以促進(jìn)角質(zhì)形成細(xì)胞IL-20表達(dá)。②IL-20-1723位點(diǎn)SNP具有轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)功能，該位點(diǎn)攜帶不同等位基因的熒光素酶報(bào)告基因的熒光強(qiáng)度有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，G等位基因較C等位基因引起更強(qiáng)的報(bào)告基因表達(dá)。③在IL-1β和CpG-A刺激下，攜帶等位基因G的熒光強(qiáng)度較刺激前明顯增強(qiáng)，攜帶C等位基因的熒光強(qiáng)度在刺激前后無(wú)明顯變化。LPS刺激后兩個(gè)等位基因的熒光強(qiáng)度均無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。④NF-kB P65亞單位不參與該位點(diǎn)等位基因?qū)τ趩?dòng)子活性的轉(zhuǎn)錄調(diào)節(jié)作用。⑤攜帶等位基因G的患者皮損處細(xì)胞受到CpG-A或IL-1β刺激后IL-20表達(dá)增高，而CC基因型患者接受相同刺激后IL-20表達(dá)無(wú)明顯變化。 結(jié)論：細(xì)菌DNA成分上調(diào)皮膚角質(zhì)形成細(xì)胞中IL-20的表達(dá)，SNPrs1713239不僅可以單獨(dú)調(diào)節(jié)IL-20啟動(dòng)子活性，同時(shí)其與細(xì)菌成分具有協(xié)同調(diào)節(jié)IL-20啟動(dòng)子活性的作用。
【關(guān)鍵詞】：銀屑病 糖皮質(zhì)激素 IL-1β CCL20 γδT細(xì)胞 IL 17 銀屑病 感染 IL-20 SNP
【學(xué)位授予單位】：上海交通大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類號(hào)】：R758.63
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 中英文縮略語(yǔ)11-13
• 第一部分13-33
• 引言13-16
• 材料與方法16-24
• 結(jié)果24-30
• 討論30-32
• 結(jié)論32-33
• 第二部分33-68
• 引言33-35
• 材料與方法35-53
• 結(jié)果53-65
• 討論65-67
• 結(jié)論67-68
• 參考文獻(xiàn)68-77
• 致謝77-79
• 已發(fā)表論文79

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前2條

1 Ruaidhrí J. Carmody;;Nuclear Factor-κB:Activation and Regulation during Toll-Like Receptor Signaling[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年01期

2 朱瑾,吳軍,鄭峻松;CCL趨化因子與變應(yīng)性鼻炎[J];免疫學(xué)雜志;2002年S1期

本文編號(hào)：637901