本文關鍵詞：糖皮質激素持續(xù)使用導致銀屑病加重的機理探討和IL-20SNP rs1713239的功能研究

  更多相關文章： 銀屑病 糖皮質激素 IL-1β CCL20 γδT細胞 IL 17 銀屑病 感染 IL-20 SNP

【摘要】：第一部分糖皮質激素持續(xù)使用導致銀屑病加重的機理探討 目的：銀屑病是一種常見的炎癥性皮膚病，糖皮質激素一直作為銀屑病治療的一線治療，但是臨床發(fā)現(xiàn)患者長期持續(xù)使用糖皮質激素會出現(xiàn)疾病復發(fā)甚至加重現(xiàn)象。真皮γδ T細胞在銀屑病發(fā)病中起重要作用。真皮γδ T細胞表面表達CCR6，識別皮膚角質形成細胞表達CCL20趨化遷移至皮膚中發(fā)揮作用。本文通過一系列實驗研究糖皮質激素聯(lián)合IL-1β對于皮膚角質形成細胞CCL20的表達及真皮γδ T細胞功能的調節(jié)，以此初步探討糖皮質激素長期持續(xù)使用引起疾病加重的機理。 方法：應用地塞米松聯(lián)合IL-1β刺激人HaCat細胞，通過實時定量PCR法檢測細胞CCL20的表達；分離小鼠真皮細胞，體外給予地塞米松聯(lián)合IL-1β刺激，流式細胞計數(shù)檢測真皮γδ T細胞中IL-17的表達；給予小鼠涂抹糖皮質激素藥膏1個月，比較皮膚中TNF-α, IL-1β，IL-17，CCL20mRNA的表達。 結果：①地塞米松聯(lián)合IL-1β上調HaCat細胞中CCL20的表達。②地塞米松抑制了IL-β促進真皮γδT細胞表達IL-17的能力。③在單純使用糖皮質激素的情況下，小鼠皮膚中TNF-α, IL-1β，IL-17mRNA表達下降，，CCL20mRNA表達上調。 結論：糖皮質激素聯(lián)合IL-1β上調HaCat細胞中CCL20的表達，促進γδT細胞遷移至皮膚中，但同時抑制細胞表達IL-17的能力。 第二部分SNPrs1713239的功能研究 目的：銀屑病是一種常見的炎癥性皮膚病，由環(huán)境因素和遺傳背景聯(lián)合作用誘發(fā)疾病。IL-20啟動子區(qū)存在著一個單核苷酸多態(tài)性（single-nucleotide polymorphism, SNP）位點（IL-20-1723C Grs1713239），與感染誘導發(fā)病的銀屑病有關。本文通過一系列實驗研究IL-20SNP rs1713239的功能，以此初步探討環(huán)境因素和遺傳背景怎樣相關作用促進銀屑病的發(fā)生發(fā)展。 方法：應用IL-1β，CpG-A或LPS刺激人原代角質形成細胞和HaCat細胞，通過實時定量PCR法，ELISA和流式細胞技術檢測細胞表達IL-20的能力；體外構建攜帶該SNP不同等位基因的螢光素酶報告基因質粒,分別轉染HaCat和HEK293t細胞，應用IL-1β，CpG-A或LPS刺激細胞，比較不同等位基因對啟動子活性的調節(jié)及對不同刺激物的反應；收集36名尋常斑塊型銀屑病患者，根據(jù)該SNP位點攜帶的等位基因分組，比較兩組間皮損處皮膚檢測IL-20mRNA和蛋白水平的表達情況。 結果：①細菌核酸成分可以促進角質形成細胞IL-20表達。②IL-20-1723位點SNP具有轉錄調節(jié)功能，該位點攜帶不同等位基因的熒光素酶報告基因的熒光強度有統(tǒng)計學差異，G等位基因較C等位基因引起更強的報告基因表達。③在IL-1β和CpG-A刺激下，攜帶等位基因G的熒光強度較刺激前明顯增強，攜帶C等位基因的熒光強度在刺激前后無明顯變化。LPS刺激后兩個等位基因的熒光強度均無統(tǒng)計學差異。④NF-kB P65亞單位不參與該位點等位基因對于啟動子活性的轉錄調節(jié)作用。⑤攜帶等位基因G的患者皮損處細胞受到CpG-A或IL-1β刺激后IL-20表達增高，而CC基因型患者接受相同刺激后IL-20表達無明顯變化。 結論：細菌DNA成分上調皮膚角質形成細胞中IL-20的表達，SNPrs1713239不僅可以單獨調節(jié)IL-20啟動子活性，同時其與細菌成分具有協(xié)同調節(jié)IL-20啟動子活性的作用。
【關鍵詞】：銀屑病 糖皮質激素 IL-1β CCL20 γδT細胞 IL 17 銀屑病 感染 IL-20 SNP
【學位授予單位】：上海交通大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2014
【分類號】：R758.63
【目錄】：

• 摘要4-7
• Abstract7-11
• 中英文縮略語11-13
• 第一部分13-33
• 引言13-16
• 材料與方法16-24
• 結果24-30
• 討論30-32
• 結論32-33
• 第二部分33-68
• 引言33-35
• 材料與方法35-53
• 結果53-65
• 討論65-67
• 結論67-68
• 參考文獻68-77
• 致謝77-79
• 已發(fā)表論文79

【參考文獻】

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1 Ruaidhrí J. Carmody;;Nuclear Factor-κB:Activation and Regulation during Toll-Like Receptor Signaling[J];Cellular & Molecular Immunology;2007年01期

2 朱瑾,吳軍,鄭峻松;CCL趨化因子與變應性鼻炎[J];免疫學雜志;2002年S1期

本文編號：637901