TNFR-1在小鼠毛囊周期中的表達(dá)及其作用初步探討
本文關(guān)鍵詞:TNFR-1在小鼠毛囊周期中的表達(dá)及其作用初步探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
【摘要】:毛囊是表皮重要的附屬器官,它控制著毛發(fā)的生長,對(duì)動(dòng)物的生存有重要的作用。在動(dòng)物的一生中毛囊都會(huì)經(jīng)歷生長期、退化期和靜止期的周期性的循環(huán)變化來實(shí)現(xiàn)毛發(fā)生長和更新。在生長期,毛母質(zhì)細(xì)胞會(huì)迅速增殖分化形成內(nèi)根鞘和毛干,毛囊得以向下生長,與此同時(shí),部分毛囊細(xì)胞也發(fā)生一定程度的細(xì)胞凋亡,以此避免細(xì)胞的過度增殖;退化期,毛囊因其下段細(xì)胞發(fā)生大量凋亡而變短且毛乳頭逐漸上移;在毛乳頭上移至毛囊隆突區(qū)bulge下方時(shí)毛囊即進(jìn)入靜止期。在與毛囊周期性循環(huán)的維持相關(guān)的各種信號(hào)通路中,TNF-α信號(hào)通路起著重要作用。TNF-α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)可引起許多細(xì)胞內(nèi)的反應(yīng)來促進(jìn)細(xì)胞增殖,分化,調(diào)亡和誘發(fā)炎癥。TNFR-1作為TNF-α信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)中起重要的也是起最主要作用的膜受體,其在出生后的小鼠毛囊周期中的表達(dá)部位及在小鼠毛囊周期中的表達(dá)規(guī)律尚沒有系統(tǒng)的研究。 目的:研究腫瘤壞死因子受體1(TNFR-1)在毛囊周期中表達(dá)的規(guī)律及初步作用。可以為揭示其在毛發(fā)周期中及周期的各階段轉(zhuǎn)換中所起的作用奠定一定基礎(chǔ),也可以為研究胞外信號(hào)通路在毛囊中的作用機(jī)制帶來啟發(fā),特別是為進(jìn)一步研究TNF-α信號(hào)通路對(duì)毛囊周期的調(diào)控提供了基礎(chǔ)依據(jù)。 方法:采用石蠟切片免疫熒光、Western blot、RT-PCR等方法檢測(cè)小鼠毛囊生長期、退化期和靜止期各時(shí)期TNFR-1的表達(dá)情況(取出生后P8d、P15d、P18d、P24d4個(gè)時(shí)相點(diǎn));免疫熒光檢測(cè)毛囊細(xì)胞分化標(biāo)記物AE13和AE15的周期性表達(dá);TUNEL檢測(cè)毛囊周期中的細(xì)胞凋亡情況。 結(jié)果:實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明在所有4個(gè)時(shí)相點(diǎn)的皮膚中TNFR-1都存在不同強(qiáng)度的表達(dá),TNFR-1mRNA從生長期中期(P8d)到生長期末期(P15d)表達(dá)量升高到較高水平,退化期(P18d)和靜止期(P24d)表達(dá)維持在較低水平;TNFR-1蛋白在生長期中期(P8d)和生長期末期(P15d)表達(dá)最強(qiáng),而退化期(P18d)到靜止期(P24d)表達(dá)減弱并維持較弱的表達(dá)。免疫熒光的結(jié)果顯示:TNFR-1在生長期主要表達(dá)于表皮層,毛囊的毛干和內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì),生長末期在外根鞘還出現(xiàn)明顯表達(dá);退化期在外根鞘、毛干及表皮層有表達(dá),在次級(jí)毛芽出現(xiàn)很強(qiáng)的特異性表達(dá);在靜止期表皮層及杵狀毛中呈現(xiàn)弱表達(dá)。AE13在生長期主要表達(dá)于表皮層以及毛干的皮質(zhì)和毛小皮;退化期P18d在毛干尤其是毛干基部端(即角質(zhì)化區(qū)域和杵狀毛形成區(qū))強(qiáng)表達(dá);在靜止期P24d弱表達(dá)于表皮層及杵狀毛中。AE15在生長中期P8d主要表達(dá)于毛囊內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì),從熒光亮度來看表達(dá)最強(qiáng);生長末期P15d在內(nèi)根鞘和毛干髓質(zhì)也有表達(dá),但是表達(dá)強(qiáng)度明顯變?nèi)酰煌嘶赑18d僅在毛囊殘余內(nèi)根鞘有少許表達(dá);在靜止期P24d毛囊中無明顯AE15表達(dá)。TUNEL檢測(cè)細(xì)胞凋亡結(jié)果顯示:在生長期TUNEL陽性染色主要出現(xiàn)在表皮層,毛囊的毛干、內(nèi)根鞘以及毛母質(zhì),生長末期還出現(xiàn)在外根鞘;在退化期P18d出現(xiàn)在外根鞘、表皮層以及毛干基部端;在靜止期P24d出現(xiàn)在表皮層、杵狀毛、bulge區(qū)和皮脂腺。 結(jié)論:在毛囊周期中,TNFR-1的表達(dá)具有高度的時(shí)空特異性,,其表達(dá)與毛囊細(xì)胞終末分化和凋亡相關(guān)。
【關(guān)鍵詞】:腫瘤壞死因子受體1 毛囊周期 小鼠 分化 凋亡
【學(xué)位授予單位】:重慶大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位授予年份】:2013
【分類號(hào)】:R751
【目錄】:
- 摘要3-5
- ABSTRACT5-9
- 1 前言9-16
- 1.1 研究背景及國內(nèi)外研究現(xiàn)狀9-14
- 1.1.1 研究背景9-14
- 1.1.2 國內(nèi)外研究現(xiàn)狀14
- 1.2 研究意義和研究內(nèi)容14-16
- 2 TNFR-1 在小鼠毛囊中的周期性表達(dá)16-39
- 2.1 引言16-17
- 2.2 材料與方法17-32
- 2.2.1 實(shí)驗(yàn)動(dòng)物17-18
- 2.2.2 實(shí)驗(yàn)設(shè)備18
- 2.2.3 藥品和試劑18-20
- 2.2.4 主要試劑的配制20-22
- 2.2.5 實(shí)驗(yàn)方法22-32
- 2.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果32-36
- 2.3.1 TNFR-1 mRNA 在小鼠背部皮膚中的表達(dá)32-33
- 2.3.2 TNFR-1 蛋白在小鼠背部皮膚中的表達(dá)33
- 2.3.3 TNFR-1 蛋白在小鼠背皮毛囊中的表達(dá)分布33-36
- 2.4 討論36-38
- 2.5 小結(jié)38-39
- 3 TNFR-1 在小鼠毛囊周期中的表達(dá)作用初探39-47
- 3.1 引言39
- 3.2 材料與方法39-41
- 3.2.1 實(shí)驗(yàn)設(shè)備39-40
- 3.2.2 藥品和試劑40
- 3.2.3 主要試劑的配制40
- 3.2.4 實(shí)驗(yàn)方法40-41
- 3.3 實(shí)驗(yàn)結(jié)果41-45
- 3.3.1 AE13 在小鼠背皮毛囊中的表達(dá)分布41-43
- 3.3.2 AE15 在小鼠背皮毛囊中的表達(dá)分布43-44
- 3.3.3 TUNEL 法檢測(cè)小鼠背皮毛囊細(xì)胞凋亡44-45
- 3.4 討論45-46
- 3.5 小結(jié)46-47
- 4 結(jié)論與展望47-49
- 4.1 全文總結(jié)47-48
- 4.2 展望48-49
- 致謝49-50
- 參考文獻(xiàn)50-54
- 附錄 作者在攻讀學(xué)位期間發(fā)表的論文目錄54
【共引文獻(xiàn)】
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本文關(guān)鍵詞:TNFR-1在小鼠毛囊周期中的表達(dá)及其作用初步探討,由筆耕文化傳播整理發(fā)布。
本文編號(hào):410915
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