本文關鍵詞：白花丹醌對人黑色素瘤A375細胞增殖和凋亡的影響及機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的 惡性黑色素瘤（malignant melanoma，MM），簡稱惡黑，是整形外科常見的一種皮膚惡性腫瘤。惡黑具有高度侵襲性和易轉移的特點，盡管其僅占所有皮膚黏膜腫瘤的4%，但死亡率極高，發(fā)生轉移的患者的5年生存率僅有14%[1]。對于早期的惡黑患者，和其它腫瘤一樣，手術治療仍是金標準，但對于已發(fā)生局部和遠處轉移的患者，相對于其它種類的惡性腫瘤，惡黑的全身治療手段有限，臨床上常常綜合化療、放療和生物治療，但上述方法仍存在諸多缺點。因而，研究新的有效的抗惡黑藥物顯得十分必要。自然界植物來源的提取物，由于其分布廣泛，毒副作用小，價格低廉以及獨特的藥理作用，在抗腫瘤治療上存在潛在的廣闊前景。其中白花丹的提取物白花丹醌，經較多體外和動物模型研究，證實了在多系統(tǒng)腫瘤如宮頸癌，乳腺癌，胃腸道腫瘤以及肝癌等惡性腫瘤中存在抗腫瘤功效。白花丹醌對惡性黑色素瘤的作用目前研究較少，少量的研究發(fā)現了白花丹醌對體外培養(yǎng)的惡黑細胞存在一定的抗腫瘤功效。本研究旨在通過體外細胞實驗，進一步了解其對人黑色素瘤A375細胞增殖、形態(tài)以及凋亡的影響，并初步探討白花丹醌對細胞凋亡的信號通路的作用機制。為進一步深入研究白花丹醌抗惡性黑色素瘤的作用及機制，從而為未來該藥物可能在抗惡黑治療中的應用，提供初步的一定的實驗依據。方法 以人黑色素瘤A375細胞株為觀察細胞，經白花丹醌干預，觀察其對體外培養(yǎng)下的A375細胞的形態(tài)、增殖以及凋亡的影響。通過光鏡下大體觀察，，了解白花丹醌對A375細胞體外增殖特性及形態(tài)的影響；通過MTT法計算細胞增殖抑制率，半定量地觀察對增殖的影響，并計算其半數增殖抑制濃度(IC50)；通過流式細胞儀Annexin V-FITC/PI雙標法觀察對凋亡的影響；以蛋白印跡（Westernblot）方法，通過觀察JAK-2/STAT-3信號通路蛋白的總體表達量和磷酸化水平的變化以及抗凋亡蛋白Bcl-2的表達量變化，了解白花丹醌影響細胞凋亡的作用機制。結果 與對照組相比，白花丹醌干預48h后，隨藥物濃度增高，對細胞增殖抑制作用增強。鏡下觀察到細胞數量明顯減少，部分細胞胞體變圓，脫離貼壁狀態(tài)；MTT法顯示：隨著藥物濃度增加，細胞增殖抑制率增高，計算其半數增殖抑制濃度（IC50）為9.85μmoul/L；流式細胞儀檢測結果顯示高濃度組（6.25和12.5μmoul/L）腫瘤細胞的凋亡率明顯增高；Western blot檢測結果表明：高濃度組（10和20μmoul/L）JAK-2，STAT-3蛋白磷酸化水平明顯降低，總體表達量無變化，同時，所有實驗組抗凋亡蛋白Bcl-2的表達量明顯降低。結論 白花丹醌對人惡性黑色素瘤A375細胞存在明顯的增殖抑制和凋亡促進作用，并與藥物濃度存在量效關系，其作用機制可能與白花丹醌抑制了JAK-2/STAT-3信號通路的活化有關。
【關鍵詞】：惡性黑色素瘤 白花丹醌 JAK-2/STAT-3 細胞增殖 凋亡
【學位授予單位】：南京醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2013
【分類號】：
【目錄】：

• 英文縮略語表5-7
• 中文論著摘要7-9
• 英文論著摘要9-11
• 前言11-13
• 實驗材料和方法13-21
• 實驗結果21-26
• 討論26-29
• 全文結論29-30
• 參考文獻30-34
• 綜述34-59
• 參考文獻47-59
• 攻讀碩士學位期間發(fā)表學術論文59-60
• 致謝60

【參考文獻】

中國期刊全文數據庫 前1條

1 張吉仲;萬謙;劉圓;;白花丹醌對人肝癌細胞HepG2、SMMC-7721增殖及其Bax/Bcl-2、Cyclin D1 mRNA表達的影響[J];中國藥理學通報;2012年12期

  本文關鍵詞：白花丹醌對人黑色素瘤A375細胞增殖和凋亡的影響及機制，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：409567