目的觀察microRNA-125b(miR-125b)和信號傳導(dǎo)轉(zhuǎn)錄激活因子3(STAT3)在皮膚鱗狀細(xì)胞癌(CSCC)中的表達(dá),并探討miR-125b靶向STAT3進(jìn)而調(diào)控CSCC發(fā)生發(fā)展的分子機(jī)制。方法采用qRT-PCR法和Western Blot檢測32例CSCC組織及其周圍正常皮膚組織中以及CSCC細(xì)胞系(A431、SCC13和SCL-1)和正常皮膚細(xì)胞系HaCaT中miR-125b和STAT3的表達(dá)。熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)被用于驗(yàn)證miR-125b對STAT3的靶向作用。采用MTT法和流式細(xì)胞術(shù)檢測miR-125b mimic或STAT3 shRNA對CSCC細(xì)胞系(A431、SCC13和SCL-1)細(xì)胞增殖、細(xì)胞周期和細(xì)胞凋亡的影響。采用克隆形成實(shí)驗(yàn)、細(xì)胞轉(zhuǎn)移和侵襲實(shí)驗(yàn)觀察miR-125b mimic對CSCC細(xì)胞系A(chǔ)431細(xì)胞的增殖、轉(zhuǎn)移和侵襲能力的影響。結(jié)果與正常皮膚組織和細(xì)胞相比,CSCC組織和細(xì)胞中miR-125b表達(dá)顯著下降,而STAT3的表達(dá)則顯著上調(diào)。miR-125b靶向STAT3的3'-UTR發(fā)揮對其表達(dá)的調(diào)控作用。miR-125b mimic或STAT3 s...

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圖1miR-R-125b和STATSTAT3在CSCC組織和細(xì)胞系中的表達(dá)FigFig.1TheexpressionofmiR-R-125bandSTATbSTAT3inCSCCtissuesandcelllinesSTAT3STAT3GAPDFGAPDF*.P<0.001

s表示，兩組間比較采用t檢驗(yàn)，多組間比較采用單因素方差分析。P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。2結(jié)果2.1miR-125b和STAT3在CSCC組織和細(xì)胞系中的表達(dá)CSCC組織中miR-125b的表達(dá)與周圍正常組織相比顯著下降了62%（t=3.152,P=0.0039），而STAT....

圖2miR-R-125b對STATSTAT3的影響FigFig.2TheeffectofmiR-R-125bonSTATbSTAT3A431SCC13SCL-10.00.0GNⅠ.STAT3-WT+Scramble;Ⅱ.STAT3-WT+miR-125b;Ⅲ.STAT3-WUT+Scramble;Ⅳ.STAT3-WUT+miR-125b.*.P<0.001ⅠⅡⅢⅣ

??A431、SCC13和SCL-1中miR-125b的表達(dá)明顯下降，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（F=13.8,P<0.001），而相應(yīng)的STAT3蛋白表達(dá)量則顯著上調(diào)。見圖1。2.2miR-125b對STAT3的影響熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)證實(shí)在A431細(xì)胞中，共轉(zhuǎn)染miR-125b和STA....

圖4STATSTAT3下調(diào)對CSCC細(xì)胞周期進(jìn)程和細(xì)胞凋亡的影響FigFig.4Theeffectofdown-regulationofSTATSTAT3expressiononcycleprogressionandapoptosisofCSCCcellshRNA-controlshRNAshRNA-controlshRNAshRNA-controlshRNAA431SCC13SCL-1200shRNA-controlScramblemiR-125bshRNA100凋亡Apop*.

imic或STAT3shRNA質(zhì)粒抑制CSCC細(xì)胞的STAT3表達(dá)后，細(xì)胞增殖明顯受抑制（圖3），且流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示G0/G1期細(xì)胞比例明顯增加（圖4A⁴B）。這些表明miR-125b/STAT3調(diào)控CSCC細(xì)胞的增殖和細(xì)胞周期進(jìn)程。2.4STAT3表達(dá)下....

圖3STATSTAT3下調(diào)對CSCC細(xì)胞的增殖力的影響FigFig.3Theeffectofdown-regulationofSTATSTAT3ontheproliferationofCSCCcells0.20.00.20.00.20.0細(xì)胞活細(xì)胞活力細(xì)胞活244872962448729600244872960時(shí)間Time/h時(shí)間Time/h時(shí)間Time/h30A431/%*AC

中國熱帶醫(yī)學(xué)2020年11月第20卷第11期ChinaTropicalMedicine,November2020,Vol.20,No.11125bmimic或STAT3shRNA質(zhì)粒抑制CSCC細(xì)胞的STAT3表達(dá)后，細(xì)胞增殖明顯受抑制（圖3），且流式細(xì)胞術(shù)結(jié)果顯示G0/G1期細(xì)....

本文編號：4043009