目的研究銀屑病皮損間充質(zhì)干細(xì)胞(dermis mesenchymal stem cells,DMSCs)對(duì)正常人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(human normal keratinocytes cells,KCs)增殖及凋亡的影響。方法體外分離培養(yǎng)DMSCs和KCs,設(shè)3個(gè)組:KCs單純培養(yǎng)組、健康對(duì)照組(正常DMSCs+KCs)和試驗(yàn)組(皮損DMSCs+KCs)。首先用皮損DMSCs上清孵育KCs,用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞存活率;再用Transwell培養(yǎng)96 h后,用CCK-8檢測(cè)細(xì)胞存活率,流式細(xì)胞儀檢測(cè)細(xì)胞凋亡,酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)(ELISA)檢測(cè)細(xì)胞培養(yǎng)上清中轉(zhuǎn)化生長因子(TGF)-β1濃度。結(jié)果共培養(yǎng)組與KCs單純組相比細(xì)胞增殖和凋亡均增多;與健康對(duì)照組相比,患者組角質(zhì)細(xì)胞增殖增多,凋亡減少,TGF-β1水平下降。結(jié)論銀屑病皮損DMSCs可以促進(jìn)角質(zhì)細(xì)胞的增殖,同時(shí)促細(xì)胞凋亡能力減弱,可能與TGF-β1水平分泌異常有關(guān)。

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圖1DMSCs和KC在倒置相差顯微鏡下的形態(tài)特點(diǎn)（×40)

2.2DMSCs上清對(duì)細(xì)胞存活率的影響按表1設(shè)置濃度梯度，將銀屑病皮損和健康人的DMSCs上清以不同比例（1:1,2.5:1,5:1）分別加入KCs培養(yǎng)基中預(yù)處理，結(jié)果顯示與KCs單純培養(yǎng)組相比，共培養(yǎng)組細(xì)胞存活率普遍有所升高，且患銀屑病皮損組比健康人組的細(xì)胞存活率更高（P<0....

圖2DMSCs作用于KC后對(duì)細(xì)胞凋亡的影響

用ELISA檢測(cè)細(xì)胞上清中TGF-β1水平，發(fā)現(xiàn)共培養(yǎng)后TGF-β1濃度下降（P<0.05），且患病組與健康組相比降低的更明顯（P<0.05）（表4）。3討論

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