目的銀屑病是一種慢性、炎癥性皮膚病,Yes相關(guān)蛋白(YAP)在銀屑病皮損中表達(dá)升高,并可通過(guò)促進(jìn)細(xì)胞增殖、抑制凋亡等作用在銀屑病中促進(jìn)其發(fā)生、發(fā)展,然而其上游負(fù)性調(diào)控因子RAS相關(guān)結(jié)構(gòu)域家族1A(RASSF1A)在銀屑病病程中的作用及對(duì)YAP表達(dá)的影響尚不明確。方法免疫組織化學(xué)檢測(cè)銀屑病患者皮損組織中RASSF1A表達(dá),用10 ng/mL的M5(IL-1α、IL-17、IL-22、TNF-α、Oncostatin M)刺激原代人表皮角質(zhì)形成細(xì)胞(KC)及人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞系HaCaT 48 h制作銀屑病細(xì)胞模型,外用咪喹莫特的方式建立銀屑病鼠模型,qPCR、Western blot及免疫熒光分別檢測(cè)RASSF1A及YAP的表達(dá)。結(jié)果免疫組織化學(xué)顯示銀屑病患者皮損中RASSF1A的表達(dá)強(qiáng)度較正常皮膚降低;在銀屑病細(xì)胞模型中,qPCR及Western blot結(jié)果顯示YAP mRNA及蛋白的表達(dá)升高,且這一趨勢(shì)在HaCaT細(xì)胞中更明顯,免疫熒光顯示,在KC細(xì)胞制作的銀屑病細(xì)胞模型中RASSF1A蛋白表達(dá)強(qiáng)度降低,YAP蛋白的表達(dá)強(qiáng)度升高;在銀屑病動(dòng)物模型中,免疫組織化學(xué)顯示RASSF1A...

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【文章目錄】：
1 材料與方法
    1.1 病例收集
    1.2 免疫組織化學(xué)分析及結(jié)果判定
    1.3 銀屑病細(xì)胞模型的建立
    1.4 免疫熒光
    1.5 銀屑病鼠模型的建立
    1.6 實(shí)時(shí)定量PCR(qPCR)
    1.7 蛋白質(zhì)印跡實(shí)驗(yàn)(Western blot)
    1.8 統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
2 結(jié)果
    2.1 RASSF1A在銀屑病患者皮損組織中的表達(dá)情況
    2.2 RASSF1A及YAP在銀屑病細(xì)胞模型中的表達(dá)情況
    2.3 RASSF1A及YAP在銀屑病動(dòng)物模型中的表達(dá)情況
3 討論



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