目的:探討微小RNA 195（miR-195）對皮膚鱗癌細胞增殖與惡性轉(zhuǎn)移的影響及其機制。方法:通過實時熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測miR-195和MYB基因在皮膚鱗癌細胞（A431細胞）和人正常皮膚細胞（HaCaT細胞）中的表達。CCK-8實驗檢測過表達及下調(diào)miR-195對A431細胞增殖能力的影響;Western blot檢測過表達及下調(diào)miR-195對A431細胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2相關(guān)蛋白X（Bax）、B淋巴細胞瘤-2（Bcl-2）表達的影響;Western blot分析過表達及下調(diào)miR-195對A431細胞上皮細胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的影響。TargetScan和雙熒光素酶報告基因?qū)嶒灧治鰉iR-195和MYB之間的關(guān)系,分析下調(diào)MYB對A431細胞增殖和EMT的影響。Western blot檢測過表達MYB后對PI3K-Akt通路的影響。LY294002作用細胞后,檢測過表達MYB對A431細胞增殖和EMT的影響。結(jié)果:與HaCaT細胞相比,A431細胞中miR-195表達明顯下調(diào)（P<0.01）,MYB表達明顯上調(diào)（P<0.01）。過表達miR... 

【文章來源】：皮膚性病診療學(xué)雜志. 2020,27(06)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

過表達miR-195抑制A431細胞增殖和EMT

結(jié)果顯示,與對照組或pcDNA-3.1(+)組相比,pcDNA-MYB組細胞內(nèi)MYB表達量明顯升高(t值分別為16.12、17.48,P值均<0.01),說明pcDNA-MYB質(zhì)粒在細胞內(nèi)表達成功;與pcDNA-3.1(+)組相比,pcDNA-MYB組細胞內(nèi)PI3K、Akt蛋白磷酸化水平明顯升高,p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明顯升高(t值分別為18.76、13.26,P值均<0.01);細胞增殖能力明顯升高(t=10.77,P=0.009),Bax蛋白表達量明顯降低(t=12.74,P=0.006),Bcl-2蛋白表達量明顯升高(t=12.72,P=0.006),E-cadherin蛋白表達量明顯降低(t=16.54,P=0.004),N-cadherin蛋白表達量明顯升高(t=14.64,P=0.005)。LY294002作用細胞后,pcDNA-MYB+LY294002組與對照組相比,細胞PI3K蛋白磷酸化水平明顯受到抑制(t=21.06,P=0.002);與pcDNA-MYB組相比,細胞增殖能力明顯降低(t=13.94,P=0.007),Bax蛋白表達量明顯升高(t=15.62,P=0.004),Bcl-2蛋白表達量明顯降低(t=13.63,P=0.004),E-cadherin蛋白表達量明顯升高(t=13.87,P=0.003),N-cadherin蛋白表達量明顯降低(t=13.19,P=0.006),詳見圖5A～5J。表明過表達MYB能夠激活細胞內(nèi)PI3K-Akt通路,從而促進A431細胞的增殖和EMT。圖3 miR-195與MYB的靶向和調(diào)控關(guān)系

miR-195與MYB的靶向和調(diào)控關(guān)系

【參考文獻】：
期刊論文
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本文編號：3491835