目的:探討微小RNA 195（miR-195）對(duì)皮膚鱗癌細(xì)胞增殖與惡性轉(zhuǎn)移的影響及其機(jī)制。方法:通過實(shí)時(shí)熒光定量PCR（RT-qPCR）檢測(cè)miR-195和MYB基因在皮膚鱗癌細(xì)胞（A431細(xì)胞）和人正常皮膚細(xì)胞（HaCaT細(xì)胞）中的表達(dá)。CCK-8實(shí)驗(yàn)檢測(cè)過表達(dá)及下調(diào)miR-195對(duì)A431細(xì)胞增殖能力的影響;Western blot檢測(cè)過表達(dá)及下調(diào)miR-195對(duì)A431細(xì)胞凋亡相關(guān)蛋白Bcl-2相關(guān)蛋白X（Bax）、B淋巴細(xì)胞瘤-2（Bcl-2）表達(dá)的影響;Western blot分析過表達(dá)及下調(diào)miR-195對(duì)A431細(xì)胞上皮細(xì)胞-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化（EMT）的影響。TargetScan和雙熒光素酶報(bào)告基因?qū)嶒?yàn)分析miR-195和MYB之間的關(guān)系,分析下調(diào)MYB對(duì)A431細(xì)胞增殖和EMT的影響。Western blot檢測(cè)過表達(dá)MYB后對(duì)PI3K-Akt通路的影響。LY294002作用細(xì)胞后,檢測(cè)過表達(dá)MYB對(duì)A431細(xì)胞增殖和EMT的影響。結(jié)果:與HaCaT細(xì)胞相比,A431細(xì)胞中miR-195表達(dá)明顯下調(diào)（P<0.01）,MYB表達(dá)明顯上調(diào)（P<0.01）。過表達(dá)miR... 

【文章來源】：皮膚性病診療學(xué)雜志. 2020,27(06)

【文章頁數(shù)】：8 頁

【部分圖文】：

過表達(dá)miR-195抑制A431細(xì)胞增殖和EMT

結(jié)果顯示,與對(duì)照組或pcDNA-3.1(+)組相比,pcDNA-MYB組細(xì)胞內(nèi)MYB表達(dá)量明顯升高(t值分別為16.12、17.48,P值均<0.01),說明pcDNA-MYB質(zhì)粒在細(xì)胞內(nèi)表達(dá)成功;與pcDNA-3.1(+)組相比,pcDNA-MYB組細(xì)胞內(nèi)PI3K、Akt蛋白磷酸化水平明顯升高,p-PI3K/PI3K和p-Akt/Akt比值明顯升高(t值分別為18.76、13.26,P值均<0.01);細(xì)胞增殖能力明顯升高(t=10.77,P=0.009),Bax蛋白表達(dá)量明顯降低(t=12.74,P=0.006),Bcl-2蛋白表達(dá)量明顯升高(t=12.72,P=0.006),E-cadherin蛋白表達(dá)量明顯降低(t=16.54,P=0.004),N-cadherin蛋白表達(dá)量明顯升高(t=14.64,P=0.005)。LY294002作用細(xì)胞后,pcDNA-MYB+LY294002組與對(duì)照組相比,細(xì)胞PI3K蛋白磷酸化水平明顯受到抑制(t=21.06,P=0.002);與pcDNA-MYB組相比,細(xì)胞增殖能力明顯降低(t=13.94,P=0.007),Bax蛋白表達(dá)量明顯升高(t=15.62,P=0.004),Bcl-2蛋白表達(dá)量明顯降低(t=13.63,P=0.004),E-cadherin蛋白表達(dá)量明顯升高(t=13.87,P=0.003),N-cadherin蛋白表達(dá)量明顯降低(t=13.19,P=0.006),詳見圖5A～5J。表明過表達(dá)MYB能夠激活細(xì)胞內(nèi)PI3K-Akt通路,從而促進(jìn)A431細(xì)胞的增殖和EMT。圖3 miR-195與MYB的靶向和調(diào)控關(guān)系

miR-195與MYB的靶向和調(diào)控關(guān)系

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
[1]miR-195靶向調(diào)控CHEK1對(duì)非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移及侵襲的作用[J]. 羅雷,楊彥輝,李季,王毅,李曉亮,謝曉陽.  局解手術(shù)學(xué)雜志. 2019(04)
[2]518例惡性皮膚腫瘤及癌前病變的回顧性分析[J]. 劉子蓮,張倩,吳雯婷,張春雷,馬川.  首都醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào). 2018(04)
[3]多學(xué)科護(hù)理對(duì)一例肛周鱗狀細(xì)胞癌難愈性傷口的護(hù)理[J]. 方健.  實(shí)用臨床護(hù)理學(xué)電子雜志. 2018(04)
[4]血清miR-195在乳腺癌診斷中的作用[J]. 朱巖,王恩禮,李暉,鐘春嫦,劉佳南,段桂開.  熱帶醫(yī)學(xué)雜志. 2013(07)



本文編號(hào)：3491835