研究背景皮膚鱗癌（CSCC）是起源于角質(zhì)形成細(xì)胞、僅次于基底細(xì)胞癌的第二常見的皮膚惡性腫瘤[1]。引起發(fā)病的原因有:紫外線照射、電離輻射、化學(xué)致癌物以及慢性刺激等,其中主要原因是日光紫外線的照射[2,3]。據(jù)報道,在世界范圍內(nèi),皮膚鱗癌的發(fā)病率在逐年遞增[4]。CSCC的發(fā)病率在我國并不高,但是患病后,極大的影響患者的生存質(zhì)量[5]。長鏈非編碼RNA（LncRNA）是一類轉(zhuǎn)錄本長度大于200個核苷酸、不能編碼產(chǎn)生蛋白質(zhì)、沒有明顯開放閱讀框的、具有基因表達(dá)調(diào)節(jié)功能的一類RNA分子。許多研究表明,在腫瘤細(xì)胞中,LncRNA通過調(diào)節(jié)其增殖、遷移等生物學(xué)功能從而影響腫瘤的發(fā)生發(fā)展[6]。人類肺腺癌轉(zhuǎn)移相關(guān)轉(zhuǎn)錄本1（MALAT1）,又稱為核富集常染色體轉(zhuǎn)錄產(chǎn)物2（NEAT2）,長度約為8000nt,定位于染色體11q13.1,是2003年首次報道的一種LncRNA[7]。據(jù)文獻(xiàn)報道,MALAT1基因與多種腫瘤的發(fā)生、發(fā)展及轉(zhuǎn)移密切相關(guān)[8，9]。但是在皮膚鱗癌中,關(guān)于MALAT1的功能和分子機(jī)制方面的報道很少。本文主要研究長鏈非編碼RNAMALAT1在皮膚鱗癌中的表達(dá)情況及其在皮膚鱗癌的發(fā)展過程... 

【文章來源】：南方醫(yī)科大學(xué)廣東省

【文章頁數(shù)】：69 頁

【學(xué)位級別】：碩士

【部分圖文】：

圖２正常組織和不同分化程度的皮膚鱗癌組織中ＭＡＬＡＴ１的表達(dá)情況Ａ．原位雜交結(jié)果圖??

膚鱗癌中ＭＡＬＡＴ１是起到什么作用呢，接下來我們在皮膚鱗癌細(xì)胞株Ａ４３１細(xì)??胞中進(jìn)行了一系列的實驗，來研究ＭＡＬＡＴ１對皮膚鱗癌細(xì)胞株的生物學(xué)影響。??３．２．１建立沉默ＭＡＬＡＴ１模型??為了研宄ＭＡＬＡＴ１在皮膚鱗癌的生物學(xué)作用，首先，我們設(shè)計合成了小干??擾?ＲＮＡｓ?（ｓｉＮＣ、ｓｉＭＡＬＡＴｌ－１?與?ｓｉＭＡＬＡＴｌ－２）；其次，在?Ａ４３１?細(xì)胞中，我們??采用ｓｉＲＮＡｓ和Ｌｉｐｏｆｅｃｔａｍｉｎｅ２０００相結(jié)合的方法進(jìn)行細(xì)胞轉(zhuǎn)染，從而達(dá)到對??ＭＡＬＡＴ１基因敲減的作用；再次，４８ｈ后我們通過Ｔｒｉｚｏｌ法提�。遥危�，反轉(zhuǎn)錄??然后用ｑＲＴ－ＰＣＲ的方法檢測沉默模型是否成功。結(jié)果顯示．？與對照組相比，??ｓｉＭＡＬＡＴｌ－１?組?ＭＡＬＡＴ１?的?ＲＮＡ?表達(dá)量降低了約?５０％?（尸＜０．０１），?ｓｉＭＡＬＡＴｌ－??２組降低了?６０％?（Ｐ０．００１），采用單因素方差分析方法進(jìn)行統(tǒng)計分析，差異具??有統(tǒng)計學(xué)意義。提示我們：在皮膚鱗癌細(xì)胞株Ａ４３１中，小干擾ＲＮＡｓ確實降??低了?ＭＡＬＡＴ１的表達(dá)量，沉默模型建立成功。如圖＊＊＊Ｐ＜０．００１）??

圖４傷口愈合實驗檢測轉(zhuǎn)染ＭＡＬＡＴ１?ｓｉＲＮＡ后Ａ４３１細(xì)胞運動能力情況。Ａ，抑制ＭＡＬＡＴ１??的表達(dá)降低Ａ４３１細(xì)胞運動能力；Ｂ，統(tǒng)計學(xué)分析??Ｆｉｇｕｒｅ?４?Ｍｏｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｏｆ?Ａ４３１?ｃｅｌｌｓ?ｔｒａｎｓｆｅｃｔｅｄ?ｗｉｔｈ?ｓｉＭＡＬＡＴｌｓ?ｕｓｉｎｇ?ｗｏｕｎｄ?ｈｅａｌｉｎｇ?ａｓｓａｙ．?Ａ．??Ｉｎｈｉｂｉｔｉｏｎ?ｏｆ?ＭＡＬＡＴ１?ｅｘｐｒｅｓｓｉｏｎ?ｒｅｄｕｃｅｄ?ｍｏｂｉｌｉｔｉｅｓ?ｏｆ?Ａ４３１?ｃｅｌｌｓ?Ｂ，?Ｓｔａｔｉｓｔｉｃｓ?ａｎａｌｙｓｉｓ??－３５－??

【參考文獻(xiàn)】：
期刊論文
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本文編號：3395449