本文關(guān)鍵詞：甲殼質(zhì)對小鼠特應(yīng)性皮炎作用的實(shí)驗(yàn)研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的利用小鼠特應(yīng)性皮炎(AD)模型,探討甲殼質(zhì)對AD的作用及作用機(jī)制,為將來甲殼質(zhì)應(yīng)用于臨床治療特應(yīng)性疾病提供科學(xué)依據(jù)。方法將28只BALB/c小鼠隨機(jī)分成3組:對照組(N組)(8只)、模型組(M組)(10只)、甲殼質(zhì)組(E組)(10只)。先對小鼠進(jìn)行腹腔注射OVA2次致敏小鼠,2次間隔5天,半月后再在其背部皮膚外敷OVA,誘發(fā)特應(yīng)性皮炎(模型組),每次外敷OVA一周,共外敷兩次,中間間隔兩周。在建模過程中甲殼質(zhì)組同時(shí)給予3mg/d甲殼質(zhì)灌胃,為期4周,模型組與對照組每天給予等量的生理鹽水灌胃。建模成功后處死各組小鼠,取背部皮膚,部分進(jìn)行石蠟切片,HE和甲苯胺藍(lán)染色,顯微鏡下觀察組織學(xué)變化。部分皮膚提取總RNA,利用RT-PCR法檢測皮膚中細(xì)胞因子的m RNA表達(dá)。酶聯(lián)免疫吸附法(ELISA)檢測血清中總Ig E、總Ig G2a和OVA-specific Ig E的水平;取脾細(xì)胞及引流淋巴結(jié)細(xì)胞進(jìn)行體外培養(yǎng),ELISA法測定培養(yǎng)液中細(xì)胞因子的含量。結(jié)果HE染色結(jié)果顯示,與模型組小鼠比較,甲殼質(zhì)組小鼠皮膚激發(fā)處炎癥癥狀較輕,皮膚表皮層與真皮層增厚程度降低,真皮內(nèi)炎癥細(xì)胞浸潤總量(P0.05)、嗜酸性粒細(xì)胞數(shù)量及肥大細(xì)胞數(shù)量(P0.01)明顯減少。ELISA實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,甲殼質(zhì)組小鼠血清中總Ig E和OVA-specific Ig E的水平明顯降低(P0.05~0.001),Ig G2a水平顯著升高(P0.001)。甲殼質(zhì)組小鼠脾細(xì)胞及淋巴結(jié)細(xì)胞體外培養(yǎng)產(chǎn)生的IL-12及IFN-γ水平明顯高于模型組,而IL-4水平明顯低于模型組(P0.05)。實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,在甲殼質(zhì)小鼠特應(yīng)性皮炎炎癥處皮膚中,Th1型細(xì)胞因子IFN-γ和IL-12的m RNA表達(dá)量增高。結(jié)論甲殼質(zhì)能有效減輕OVA誘導(dǎo)的小鼠AD癥狀,改善局部組織學(xué)炎癥反應(yīng),降低小鼠血清中Ig E水平。甲殼質(zhì)通過調(diào)節(jié)機(jī)體Th1/Th2免疫平衡,發(fā)揮抗AD過敏反應(yīng)的作用,為甲殼質(zhì)用于治療特應(yīng)性皮炎提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
【關(guān)鍵詞】：甲殼質(zhì) 卵清蛋白 特應(yīng)性皮炎
【學(xué)位授予單位】：青島大學(xué)
【學(xué)位級別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號】：R758.2
【目錄】：

• 摘要2-3
• Abstract3-6
• 前言6-8
• 流程圖8-10
• 第一章 材料與方法10-17
• 1.1 材料10-11
• 1.1.1 主要儀器設(shè)備10
• 1.1.2 實(shí)驗(yàn)動物10
• 1.1.3 試劑10-11
• 1.2 方法11-17
• 1.2.1 動物模型的建立11-12
• 1.2.2 甲殼質(zhì)顆粒的制備12
• 1.2.3 皮膚組織的標(biāo)本制備及病理學(xué)觀察12
• 1.2.3.1 皮膚組織的標(biāo)本制備12
• 1.2.3.2 HE和甲苯胺藍(lán)染色12
• 1.2.4 小鼠的脾臟、淋巴結(jié)分離與其細(xì)胞培養(yǎng)12-13
• 1.2.4.1 脾臟的分離12-13
• 1.2.4.2 收集脾細(xì)胞13
• 1.2.4.3 脾細(xì)胞的培養(yǎng)13
• 1.2.4.4 淋巴細(xì)胞分離與細(xì)胞培養(yǎng)13
• 1.2.5 酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn) （ELISA）13-14
• 1.2.6 實(shí)時(shí)熒光定量PCR14-16
• 1.2.6.1 抽提總RNA14
• 1.2.6.2 反轉(zhuǎn)錄反應(yīng)14-15
• 1.2.6.3 PCR擴(kuò)增反應(yīng)15-16
• 1.2.7 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法16-17
• 第二章 結(jié)果17-28
• 2.1 小鼠背部皮膚的肉眼觀察17-18
• 2.2 小鼠背部皮膚的組織學(xué)改變18-22
• 2.3 小鼠血清中免疫球蛋白的改變22-23
• 2.4 小鼠背部皮膚細(xì)胞因子的mRNA表達(dá)23-24
• 2.5 細(xì)胞培養(yǎng)上清液中細(xì)胞因子的表達(dá)24-28
• 2.5.1 卵清蛋白刺激脾細(xì)胞與淋巴結(jié)細(xì)胞24-27
• 2.5.2 甲殼質(zhì)對正常脾細(xì)胞的體外刺激作用27-28
• 第三章 討論28-30
• 結(jié)論30-31
• 參考文獻(xiàn)31-33
• 綜述33-44
• 綜述的參考文獻(xiàn)39-44
• 攻讀學(xué)位期間的研究成果44-45
• 附錄45-46
• 致謝46-47

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  本文關(guān)鍵詞：甲殼質(zhì)對小鼠特應(yīng)性皮炎作用的實(shí)驗(yàn)研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：336599