本文關(guān)鍵詞：表皮生長(zhǎng)因子對(duì)人毛囊外毛根鞘無(wú)色素性黑素細(xì)胞增殖、遷移能力的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的：觀察不同濃度的表皮生長(zhǎng)因子(Epidermal growthfactor,EGF)對(duì)毛囊外毛根鞘（out root sheath，ORS）無(wú)色素性黑素細(xì)胞（amelanotic melanocytes, AMMCs）增殖能力及遷徙能力的影響。方法：與頭皮提供者溝通獲得同意后。取頭皮并去除脂肪組織及真皮上1mm。采用1%分散酶Ⅱ消化獲得毛囊。再采用0.5%胰蛋白酶消化獲得外毛根鞘細(xì)胞。在含有經(jīng)Chelex100鈉形式螯合后的胎牛血清的專(zhuān)用MCDB153培養(yǎng)基中原代培養(yǎng)。采用差胰酶法傳代純化AMMC細(xì)胞。將純化并傳至第三代的細(xì)胞，用免疫組織化學(xué)染色法鑒定其N(xiāo)KI/beteb與HMB-45的表達(dá)。將經(jīng)過(guò)純化和鑒定后的AMMC，根據(jù)EGF的作用濃隨機(jī)分為5組：0ng/ml（即空白對(duì)照組）、1ng/ml、10ng/ml、20ng/ml、50ng/ml濃度EGF干預(yù)組。（1）按照分組條件采用不同濃度EGF干預(yù)AMMC48小時(shí)后。采用CCK8檢測(cè)法檢測(cè)各組細(xì)胞的增殖能力。（2）將上述經(jīng)鑒定后的第三代的AMMC，用無(wú)血清MCDB153饑餓24h后，采用Transwell體外小室遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)不同濃度EGF干預(yù)AMMC48小時(shí)后各組細(xì)胞的遷移能力。所測(cè)得的結(jié)果用x±s統(tǒng)計(jì)，應(yīng)用11.5版本的SPSS統(tǒng)計(jì)軟件，行單因素方差分析。確定檢驗(yàn)水準(zhǔn)為P0.05。結(jié)果：人毛囊外毛根鞘的無(wú)色素性黑素細(xì)胞在含有經(jīng)Chelex100鈉形式螯合后的胎牛血清以及各種添加因子的專(zhuān)用MCDB153培養(yǎng)基中可以有效的擴(kuò)增。通過(guò)采用差胰酶法傳代AMMC細(xì)胞可以有效的純化AMMC。AMMC在體外能夠連續(xù)、穩(wěn)定的傳代。傳至第三代的細(xì)胞，用免疫組織化學(xué)染色顯示其N(xiāo)KI/beteb染色陽(yáng)性。HMB-45的染色為陰性。各組CCK8檢測(cè)的OD值：空白對(duì)照組0.1968±0.1763，1ng/ml EGF干預(yù)組0.2986±0.1773，10ng/ml EGF干預(yù)組0.6302±0.2292，20ng/ml EGF干預(yù)組0.7414±0.2177，，50ng/ml EGF干預(yù)組0.8198±0.2604�？瞻讓�(duì)照組的OD值低于10ng/ml EGF干預(yù)組、20ng/ml EGF干預(yù)組、50ng/ml EGF干預(yù)組（P均0.05）。1ng/ml EGF干預(yù)組的OD值低于10ng/ml EGF干預(yù)組、20ng/ml EGF干預(yù)組、50ng/ml EGF干預(yù)組（P均0.05）�？瞻讓�(duì)照組與1ng/ml EGF干預(yù)組的OD值無(wú)明顯差異（P0.05）。10ng/ml EGF干預(yù)組、20ng/ml EGF干預(yù)組、50ng/ml EGF干預(yù)組OD值無(wú)明顯差異（P0.05）。各組Transwell體外小室遷移實(shí)驗(yàn)檢測(cè)的遷移細(xì)胞數(shù)（個(gè)）：空白對(duì)照組5.88±2.03，1ng/ml EGF干預(yù)組6.75±2.71，10ng/ml EGF干預(yù)組22.50±5.71，20ng/ml EGF干預(yù)組54.75±6.54，50ng/ml EGF干預(yù)組55.75±6.30�？瞻讓�(duì)照組的遷移細(xì)胞數(shù)少于10ng/ml EGF干預(yù)組、20ng/ml EGF干預(yù)組、50ng/mlEGF干預(yù)組（P均0.05）。1ng/ml EGF干預(yù)組的遷移細(xì)胞數(shù)少于10ng/ml EGF干預(yù)組、20ng/ml EGF干預(yù)組、50ng/ml EGF干預(yù)組（P均0.05）。10ng/ml EGF干預(yù)組的遷移細(xì)胞數(shù)少于20ng/ml EGF干預(yù)組、50ng/ml EGF干預(yù)組（P均0.05）。而20ng/ml EGF干預(yù)組與50ng/ml EGF干預(yù)組的遷移細(xì)胞數(shù)無(wú)明顯差異（P0.05）。結(jié)論：在體外一定濃度的EGF可以促進(jìn)AMMC的增殖和遷移。但是隨著EGF濃度的升高，其促增殖、遷移作用并沒(méi)有進(jìn)一步增加。
【關(guān)鍵詞】：毛囊外毛根鞘 無(wú)色素性黑素細(xì)胞 細(xì)胞培養(yǎng) 細(xì)胞增殖 細(xì)胞遷移 表皮生長(zhǎng)因子
【學(xué)位授予單位】：瀘州醫(yī)學(xué)院
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2014
【分類(lèi)號(hào)】：R758.7
【目錄】：

• 目錄3-4
• 摘要4-7
• Abstract7-10
• 前言10-13
• 材料與方法13-20
• 結(jié)果20-25
• 討論25-32
• 結(jié)論32-33
• 參考文獻(xiàn)33-37
• 英漢縮略詞對(duì)照表37-38
• 致謝38-39
• 綜述39-51
• 參考文獻(xiàn)46-51

【參考文獻(xiàn)】

中國(guó)期刊全文數(shù)據(jù)庫(kù) 前6條

1 譚城;外毛根鞘黑素細(xì)胞研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚性病學(xué)分冊(cè);2001年05期

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  本文關(guān)鍵詞：表皮生長(zhǎng)因子對(duì)人毛囊外毛根鞘無(wú)色素性黑素細(xì)胞增殖、遷移能力的影響，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：313250