本文關(guān)鍵詞：p63在尖銳濕疣組織中的表達(dá)意義及其與HPV的相關(guān)性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:尖銳濕疣(condylomata acuminata,CA)是臨床上常見的性傳播疾病(sexually transmitted disease,STD),由人類乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染所致。由于疣體生長速度快,易復(fù)發(fā),給患者帶來了巨大的身心痛苦。HPV是一類很小的嗜上皮性DNA病毒,其中與尖銳濕疣發(fā)病相關(guān)的主要有HPV6、11、16、18型,其發(fā)病與各型病毒編碼的蛋白有關(guān)。p63與p53同屬一個(gè)基因家族,兼具抑癌基因和原癌基因的作用,對(duì)于不同的刺激和調(diào)控表達(dá)不同功能。本實(shí)驗(yàn)通過對(duì)尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組和正常對(duì)照組中細(xì)胞調(diào)控因子p63蛋白表達(dá)情況的分析,探討其在尖銳濕疣疾病發(fā)生、發(fā)展過程中的作用;通過熒光定量PCR對(duì)尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組中HPV荷載量的測定,分析的其與p63蛋白的關(guān)系,以及二者的臨床意義。方法:采用HE染色觀察組織形態(tài)特征。通過免疫組織化學(xué)PV二步法檢測正常包皮對(duì)照組和尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組中p63蛋白的表達(dá),對(duì)照組:20例,均為男性,年齡18~50歲,平均年齡29.15±10.19歲。實(shí)驗(yàn)組:34例,男性17例,女性17例,年齡18~52歲,平均年齡31.97±9.51歲。陽性表達(dá)判斷:細(xì)胞核中出現(xiàn)明顯棕黃色顆粒即為陽性細(xì)胞,在兩名經(jīng)驗(yàn)豐富的病理醫(yī)生指導(dǎo)下,遵循客觀,雙盲原則,對(duì)樣本進(jìn)行免疫組化結(jié)果判定:觀察5個(gè)(×400)高倍視野,計(jì)算每個(gè)視野中陽性細(xì)胞的平均百分比,陽性細(xì)胞0~5%為“-”,6%~25%為“+”,26%~50%為“++”,50%為“+++”。通過熒光定量PCR法檢測尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組中HPV荷載量,分別檢測HPV6/11、16/18型病毒負(fù)荷量。結(jié)果判讀:SLAN熒光定量PCR檢測系統(tǒng)儀器Ct欄顯示40表示檢測樣本低于檢測限,報(bào)告為陰性;待測樣本Ct值≤38,且擴(kuò)增曲線呈典型S型,檢測結(jié)果報(bào)告為陽性;待測樣本Ct欄顯示在38~40之間,需重復(fù)測定,如仍在38~40之間,且擴(kuò)增曲線呈典型S型,則判斷為陽性;若非典型S型曲線,則判斷為陰性。所有數(shù)據(jù)通過統(tǒng)計(jì)軟件SPSS13.0進(jìn)行處理,采用秩和檢驗(yàn)做差異性分析,兩組變量間的相關(guān)性用Spearman等級(jí)相關(guān)處理,檢驗(yàn)水準(zhǔn)α=0.05,P0.05認(rèn)為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。結(jié)果:1尖銳濕疣HE染色結(jié)果尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本切片經(jīng)蘇木素、伊紅染色后低倍鏡下可見表皮層呈乳頭瘤樣增生;基底層細(xì)胞增生明顯,表皮棘層肥厚,棘層和顆粒層出現(xiàn)空泡化細(xì)胞;真皮淺層血管增生顯著,血管周圍可見有淋巴細(xì)胞浸潤;角化過度伴角化不全同時(shí)發(fā)生,其中最顯著的是典型的空泡化細(xì)胞和乳頭瘤樣增生,為尖銳濕疣的經(jīng)典病理表現(xiàn)。2正常對(duì)照組織、尖銳濕疣組織中p63蛋白表達(dá)p63蛋白在免疫組織化學(xué)染色陽性表達(dá)時(shí)主要表達(dá)于細(xì)胞核,呈棕黃色顆粒,少數(shù)細(xì)胞胞漿可呈弱陽性表達(dá)。34例尖銳濕疣組織中p63陽性表達(dá)34例,其中“+”為5例,“++”為12例,“+++”為17例,陽性表達(dá)率為100.0%(34/34);20例正常對(duì)照組織中19例為陽性表達(dá),其中“+”為9例,“++”為7例,“+++”為3例,陽性表達(dá)率為95.0%(19/20)�？梢娬＝M織和尖銳濕疣組織中p63均有表達(dá)。若以“+”、“++”為低表達(dá),“+++”為過度表達(dá)[6]計(jì)算,尖銳濕疣組低表達(dá)陽性率為50.0%(17/34),而對(duì)照組為80.0%(16/20);過度表達(dá)在尖銳濕疣組中占50.0%(17/34),對(duì)照組為15.0%(3/20)。對(duì)比兩組數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)P63在尖銳濕疣組織中的表達(dá)水平與正常組織間有顯著差異(P0.01)(見Table1)。尖銳濕疣組織中的陽性免疫染色主要在基底層、棘層、顆粒層,染色較深,呈彌漫性高表達(dá)(見Fig.4-5);正常對(duì)照組織中染色較淺,主要表達(dá)于基底層,棘層和顆粒層表達(dá)較少或缺如,(見Fig.6)。對(duì)比全部標(biāo)本染色發(fā)現(xiàn)尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組標(biāo)本中的染色強(qiáng)度明顯高于對(duì)照組。3尖銳濕疣組織中p63蛋白的表達(dá)在各臨床病理參數(shù)之間有無差異性用統(tǒng)計(jì)學(xué)分別處理臨床病理各參數(shù)發(fā)現(xiàn),尖銳濕疣組織中,p63蛋白的表達(dá)在性別、發(fā)病部位及年齡因素方面均無差異。年齡35歲與年齡≥35歲兩組間差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05);男性和女性兩組間P0.05,無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異;p63蛋白在肛周和生殖器兩組別中的差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)(見Table 2)。4尖銳濕疣組織中p63蛋白表達(dá)與HPV6/11荷載量的關(guān)系整理SLAN熒光定量PCR檢測儀得出的數(shù)據(jù)結(jié)果顯示:尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組34例中,單純HPV6/11亞型陽性者32例,單純HPV16/18亞型陽性者0例,兩者復(fù)合陽性者為2例。本實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)顯示,尖銳濕疣組織中HPV6/11亞型感染占絕大多數(shù),對(duì)比尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組中HPV6/11荷載量與p63蛋白表達(dá),經(jīng)數(shù)據(jù)處理,SPSS13.0軟件分析顯示兩者呈顯著正相關(guān),相關(guān)系數(shù)r=0.398,P=0.020,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P0.05)(見Table 3)。結(jié)論:1尖銳濕疣實(shí)驗(yàn)組中p63表達(dá)強(qiáng)度和范圍明顯高于正常對(duì)照組,其可能參與了尖銳濕疣皮膚代謝紊亂的調(diào)控,推測p63在尖銳濕疣癌變過程中起一定作用。2在尖銳濕疣組織中p63蛋白的表達(dá)程度和HPV6/11荷載量呈顯著正相關(guān),提示HPV6/11荷載量和p63過表達(dá)在尖銳濕疣發(fā)病、復(fù)發(fā)過程中有協(xié)同作用。3對(duì)尖銳濕疣患者進(jìn)行HPV6/11荷載量檢測,可以明確感染的HPV亞型和病毒荷載量,據(jù)此指導(dǎo)對(duì)患者的隨訪觀察,降低復(fù)發(fā)。
【關(guān)鍵詞】：人類乳頭瘤病毒 p63 尖銳濕疣 免疫組化 熒光定量PCR
【學(xué)位授予單位】：河北醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2015
【分類號(hào)】：R752.53
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12
• 材料與方法12-17
• 結(jié)果17-19
• 附圖19-22
• 附表22-24
• 討論24-26
• 結(jié)論26
• 參考文獻(xiàn)26-30
• 綜述 p63 與增殖性皮膚病相關(guān)性研究進(jìn)展30-41
• 參考文獻(xiàn)35-41
• 致謝41-42
• 個(gè)人簡歷42

【參考文獻(xiàn)】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉敏;李東寧;孫健;楊靜;王莉麗;閻鐵夫;;P53,CyclinD1和Ki67蛋白在外陰HPV相關(guān)疾病中的表達(dá)及意義[J];中國皮膚性病學(xué)雜志;2011年11期

  本文關(guān)鍵詞：p63在尖銳濕疣組織中的表達(dá)意義及其與HPV的相關(guān)性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號(hào)：311514