本文關鍵詞：p63在尖銳濕疣組織中的表達意義及其與HPV的相關性研究，，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

【摘要】：目的:尖銳濕疣(condylomata acuminata,CA)是臨床上常見的性傳播疾病(sexually transmitted disease,STD),由人類乳頭瘤病毒(human papilloma virus,HPV)感染所致。由于疣體生長速度快,易復發(fā),給患者帶來了巨大的身心痛苦。HPV是一類很小的嗜上皮性DNA病毒,其中與尖銳濕疣發(fā)病相關的主要有HPV6、11、16、18型,其發(fā)病與各型病毒編碼的蛋白有關。p63與p53同屬一個基因家族,兼具抑癌基因和原癌基因的作用,對于不同的刺激和調(diào)控表達不同功能。本實驗通過對尖銳濕疣實驗組和正常對照組中細胞調(diào)控因子p63蛋白表達情況的分析,探討其在尖銳濕疣疾病發(fā)生、發(fā)展過程中的作用;通過熒光定量PCR對尖銳濕疣實驗組中HPV荷載量的測定,分析的其與p63蛋白的關系,以及二者的臨床意義。方法:采用HE染色觀察組織形態(tài)特征。通過免疫組織化學PV二步法檢測正常包皮對照組和尖銳濕疣實驗組中p63蛋白的表達,對照組:20例,均為男性,年齡18~50歲,平均年齡29.15±10.19歲。實驗組:34例,男性17例,女性17例,年齡18~52歲,平均年齡31.97±9.51歲。陽性表達判斷:細胞核中出現(xiàn)明顯棕黃色顆粒即為陽性細胞,在兩名經(jīng)驗豐富的病理醫(yī)生指導下,遵循客觀,雙盲原則,對樣本進行免疫組化結(jié)果判定:觀察5個(×400)高倍視野,計算每個視野中陽性細胞的平均百分比,陽性細胞0~5%為“-”,6%~25%為“+”,26%~50%為“++”,50%為“+++”。通過熒光定量PCR法檢測尖銳濕疣實驗組中HPV荷載量,分別檢測HPV6/11、16/18型病毒負荷量。結(jié)果判讀:SLAN熒光定量PCR檢測系統(tǒng)儀器Ct欄顯示40表示檢測樣本低于檢測限,報告為陰性;待測樣本Ct值≤38,且擴增曲線呈典型S型,檢測結(jié)果報告為陽性;待測樣本Ct欄顯示在38~40之間,需重復測定,如仍在38~40之間,且擴增曲線呈典型S型,則判斷為陽性;若非典型S型曲線,則判斷為陰性。所有數(shù)據(jù)通過統(tǒng)計軟件SPSS13.0進行處理,采用秩和檢驗做差異性分析,兩組變量間的相關性用Spearman等級相關處理,檢驗水準α=0.05,P0.05認為差異有統(tǒng)計學意義。結(jié)果:1尖銳濕疣HE染色結(jié)果尖銳濕疣實驗組標本切片經(jīng)蘇木素、伊紅染色后低倍鏡下可見表皮層呈乳頭瘤樣增生;基底層細胞增生明顯,表皮棘層肥厚,棘層和顆粒層出現(xiàn)空泡化細胞;真皮淺層血管增生顯著,血管周圍可見有淋巴細胞浸潤;角化過度伴角化不全同時發(fā)生,其中最顯著的是典型的空泡化細胞和乳頭瘤樣增生,為尖銳濕疣的經(jīng)典病理表現(xiàn)。2正常對照組織、尖銳濕疣組織中p63蛋白表達p63蛋白在免疫組織化學染色陽性表達時主要表達于細胞核,呈棕黃色顆粒,少數(shù)細胞胞漿可呈弱陽性表達。34例尖銳濕疣組織中p63陽性表達34例,其中“+”為5例,“++”為12例,“+++”為17例,陽性表達率為100.0%(34/34);20例正常對照組織中19例為陽性表達,其中“+”為9例,“++”為7例,“+++”為3例,陽性表達率為95.0%(19/20)�？梢娬＝M織和尖銳濕疣組織中p63均有表達。若以“+”、“++”為低表達,“+++”為過度表達[6]計算,尖銳濕疣組低表達陽性率為50.0%(17/34),而對照組為80.0%(16/20);過度表達在尖銳濕疣組中占50.0%(17/34),對照組為15.0%(3/20)。對比兩組數(shù)據(jù)發(fā)現(xiàn)P63在尖銳濕疣組織中的表達水平與正常組織間有顯著差異(P0.01)(見Table1)。尖銳濕疣組織中的陽性免疫染色主要在基底層、棘層、顆粒層,染色較深,呈彌漫性高表達(見Fig.4-5);正常對照組織中染色較淺,主要表達于基底層,棘層和顆粒層表達較少或缺如,(見Fig.6)。對比全部標本染色發(fā)現(xiàn)尖銳濕疣實驗組標本中的染色強度明顯高于對照組。3尖銳濕疣組織中p63蛋白的表達在各臨床病理參數(shù)之間有無差異性用統(tǒng)計學分別處理臨床病理各參數(shù)發(fā)現(xiàn),尖銳濕疣組織中,p63蛋白的表達在性別、發(fā)病部位及年齡因素方面均無差異。年齡35歲與年齡≥35歲兩組間差異無統(tǒng)計學意義(P0.05);男性和女性兩組間P0.05,無統(tǒng)計學差異;p63蛋白在肛周和生殖器兩組別中的差別無統(tǒng)計學意義(P0.05)(見Table 2)。4尖銳濕疣組織中p63蛋白表達與HPV6/11荷載量的關系整理SLAN熒光定量PCR檢測儀得出的數(shù)據(jù)結(jié)果顯示:尖銳濕疣實驗組34例中,單純HPV6/11亞型陽性者32例,單純HPV16/18亞型陽性者0例,兩者復合陽性者為2例。本實驗數(shù)據(jù)顯示,尖銳濕疣組織中HPV6/11亞型感染占絕大多數(shù),對比尖銳濕疣實驗組中HPV6/11荷載量與p63蛋白表達,經(jīng)數(shù)據(jù)處理,SPSS13.0軟件分析顯示兩者呈顯著正相關,相關系數(shù)r=0.398,P=0.020,差異有統(tǒng)計學意義(P0.05)(見Table 3)。結(jié)論:1尖銳濕疣實驗組中p63表達強度和范圍明顯高于正常對照組,其可能參與了尖銳濕疣皮膚代謝紊亂的調(diào)控,推測p63在尖銳濕疣癌變過程中起一定作用。2在尖銳濕疣組織中p63蛋白的表達程度和HPV6/11荷載量呈顯著正相關,提示HPV6/11荷載量和p63過表達在尖銳濕疣發(fā)病、復發(fā)過程中有協(xié)同作用。3對尖銳濕疣患者進行HPV6/11荷載量檢測,可以明確感染的HPV亞型和病毒荷載量,據(jù)此指導對患者的隨訪觀察,降低復發(fā)。
【關鍵詞】：人類乳頭瘤病毒 p63 尖銳濕疣 免疫組化 熒光定量PCR
【學位授予單位】：河北醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2015
【分類號】：R752.53
【目錄】：

• 中文摘要4-7
• 英文摘要7-11
• 英文縮寫11-12
• 前言12
• 材料與方法12-17
• 結(jié)果17-19
• 附圖19-22
• 附表22-24
• 討論24-26
• 結(jié)論26
• 參考文獻26-30
• 綜述 p63 與增殖性皮膚病相關性研究進展30-41
• 參考文獻35-41
• 致謝41-42
• 個人簡歷42

【參考文獻】

中國期刊全文數(shù)據(jù)庫 前1條

1 劉敏;李東寧;孫健;楊靜;王莉麗;閻鐵夫;;P53,CyclinD1和Ki67蛋白在外陰HPV相關疾病中的表達及意義[J];中國皮膚性病學雜志;2011年11期

  本文關鍵詞：p63在尖銳濕疣組織中的表達意義及其與HPV的相關性研究，由筆耕文化傳播整理發(fā)布。

本文編號：311514