發(fā)布時(shí)間：2020-10-23 20:54

　　 目的:探討Toll樣受體9(Toll-like receptor 9,TLR9)在中波紫外線(ultraviolet B,UVB)誘導(dǎo)的人永生化角質(zhì)形成細(xì)胞(human immortal keratinocyte,HaCaT)光老化模型中對(duì)下游信號(hào)分子的調(diào)控作用。方法:實(shí)驗(yàn)分為3組:正常對(duì)照組、模型組、A151組。正常對(duì)照組予以假照射處理,模型組予以輻照劑量30 m J/cm~2 UVB照射處理,A151組予以輻照劑量30 m J/cm~2 UVB照射并加用TLR9抑制劑進(jìn)行干預(yù)處理。使用衰老相關(guān)β半乳糖苷酶法觀察細(xì)胞衰老。CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖。Western blot檢測(cè)TLR9、磷酸化核轉(zhuǎn)錄因子(phospho nucler factor-κB,pNF-κB)蛋白表達(dá)。RT-PCR法檢測(cè)細(xì)胞腫瘤壞死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白介素-6(interleukin-6,IL-6)mRNA轉(zhuǎn)錄水平。結(jié)果:Western blot結(jié)果顯示模型組較正常對(duì)照組TLR9、pNF-κB蛋白表達(dá)量升高(P=0.000,P=0.000),A151組較模型組TLR9、pNF-κB蛋白表達(dá)量降低(P=0.010,P=0.000)。RTPCR結(jié)果顯示模型組較正常對(duì)照組TNF-α、IL-6mRNA轉(zhuǎn)錄水平上調(diào)(P=0.000,P=0.000),A151組較模型組TNF-αmRNA、IL-6 mRNA轉(zhuǎn)錄水平下調(diào)(P=0.000,P=0.030)。衰老相關(guān)β半乳糖苷酶染色結(jié)果顯示模型組較正常對(duì)照組染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)增多(P=0.000),A151組較模型組染色陽(yáng)性細(xì)胞數(shù)減少(P=0.000)。CCK-8結(jié)果顯示模型組較正常對(duì)照組細(xì)胞增殖率降低(P=0.010),A151組較模型組細(xì)胞增殖率升高(P=0.045)。結(jié)論:UVB通過(guò)上調(diào)HaCaT中的TLR9表達(dá),引起核轉(zhuǎn)錄因子磷酸化,促進(jìn)細(xì)胞因子TNF-ɑ、IL-6轉(zhuǎn)錄水平升高,介導(dǎo)細(xì)胞炎性反應(yīng),從而降低細(xì)胞增殖率,誘導(dǎo)細(xì)胞衰老。
【文章目錄】：
1 材料和方法
    1.1 主要試劑和儀器
    1.2 方法
        1.2.1 細(xì)胞培養(yǎng)
        1.2.2 模型建立及干預(yù)
        1.2.3 衰老相關(guān)β半乳糖苷酶法檢測(cè)細(xì)胞衰老
        1.2.4 CCK-8法檢測(cè)細(xì)胞增殖率
        1.2.5 Western blot法檢測(cè)TLR9、p NF-κB的蛋白水平
        1.2.6 PCR檢測(cè)TNF-α、IL-6的m RNA轉(zhuǎn)錄水平
    1.3 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析
2 結(jié)果
    2.1 各組衰老相關(guān)β半乳糖苷酶檢測(cè)結(jié)果
    2.2 CCK-8檢測(cè)細(xì)胞增殖率
    2.3 各組細(xì)胞TLR9及p NF-κB蛋白表達(dá)水平檢測(cè)結(jié)果
    2.4 各組細(xì)胞TNF-α、IL-6的m RNA轉(zhuǎn)錄水平檢測(cè)
3 討論

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 鄭博文;阮光洪;張淑玲;趙勁;瞿紅葉;陳文雄;李冰;夏玉潔;;建立快速光老化動(dòng)物模型新方法[J];皮膚病與性病;2017年04期

2 王慧英;;中波紫外線加蒽林與氯倍太索外用聯(lián)合治療可使銀屑病更快消退[J];國(guó)外醫(yī)學(xué).皮膚病學(xué)分冊(cè);1987年03期

3 秦錚;張桂云;劉騰飛;楊文娟;姚春麗;;α1抗胰蛋白酶治療皮膚光老化的作用及對(duì)抗氧化物水平的影響[J];中國(guó)老年學(xué)雜志;2016年23期

4 張燕;謝澤初;;中藥浴聯(lián)合窄普中波紫外線治療老年性皮膚瘙癢癥的療效觀察[J];中西醫(yī)結(jié)合研究;2015年05期

5 宋維芳;李正;于宇;林炳基;;高能中波紫外線聯(lián)合復(fù)方甘草酸苷治療白癜風(fēng)療效分析[J];臨床軍醫(yī)雜志;2013年10期

6 方惠君;羅玉香;賀紅桃;梁艷英;;中波紫外線治療玫瑰糠疹的療效觀察[J];中國(guó)康復(fù);2008年03期

7 譚軍,吳東輝,羅明燦,鐘茜;中波紫外線治療色素減退性皮膚病[J];中國(guó)美容醫(yī)學(xué);2004年06期

8 沈利東;繆文進(jìn);閔瑋;曹燕;徐麗萍;錢齊宏;;高能中波紫外線聯(lián)合他克莫司軟膏治療面部白癜風(fēng)的臨床效果評(píng)價(jià)[J];廣西醫(yī)學(xué);2017年04期

9 劉偉;;窄普中波紫外線聯(lián)合香菇多糖治療帶狀皰疹效果分析[J];河北醫(yī)學(xué);2014年09期

10 周寧;;高能中波紫外線聯(lián)合藥物治療尋常型白癜風(fēng)的臨床療效觀察[J];中外醫(yī)學(xué)研究;2011年26期

相關(guān)博士學(xué)位論文 前4條

1 許陽(yáng);皮膚科領(lǐng)域光醫(yī)學(xué)相關(guān)的基礎(chǔ)與臨床系列研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2014年

2 嚴(yán)淑賢;紫外線照射對(duì)真皮結(jié)構(gòu)和代謝的影響及氮氧化物Tempol保護(hù)作用的研究[D];復(fù)旦大學(xué);2005年

3 吳嚴(yán);強(qiáng)脈沖光治療面部光老化的臨床應(yīng)用研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2008年

4 康玉英;炎癥浸潤(rùn)細(xì)胞及基質(zhì)金屬蛋白酶參與光老化發(fā)生機(jī)制研究[D];中國(guó)協(xié)和醫(yī)科大學(xué);2009年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前9條

1 李秀梅;甲殼質(zhì)對(duì)小鼠特應(yīng)性皮炎作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];青島大學(xué);2015年

2 孫松佳;α1抗胰蛋白酶對(duì)豚鼠皮膚光老化模型治療作用的實(shí)驗(yàn)研究[D];吉林大學(xué);2016年

3 李可;強(qiáng)脈沖光治療皮膚光老化的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)研究[D];中南大學(xué);2008年

4 薛璐;AD小鼠模型VDRAs對(duì)TLR2、TLR4及CRAMP的調(diào)控作用研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2017年

5 沈芳舟;TLR9在HaCaT細(xì)胞UVB光老化模型中對(duì)下游信號(hào)分子的調(diào)控作用[D];重慶醫(yī)科大學(xué);2018年

6 李曉康;α1抗胰蛋白酶對(duì)豚鼠皮膚光老化模型的治療作用及其機(jī)制研究[D];吉林大學(xué);2016年

7 王申;光老化人真皮成纖維細(xì)胞通過(guò)“旁觀者效應(yīng)”對(duì)正常人真皮成纖維細(xì)胞氧化損害、增殖、老化及自噬活性的影響[D];南京醫(yī)科大學(xué);2015年

8 劉艷華;二氧化碳點(diǎn)陣激光治療光老化大鼠皮膚的實(shí)驗(yàn)研究[D];南方醫(yī)科大學(xué);2013年

9 王利平;不同時(shí)間段聯(lián)合使用免疫調(diào)節(jié)劑對(duì)RGH豚鼠模型免疫狀態(tài)的影響[D];桂林醫(yī)學(xué)院;2016年

本文編號(hào)：2853529