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FQ-PCR方法在四種常見(jiàn)性傳播疾病病原學(xué)診斷中的應(yīng)用研究

發(fā)布時(shí)間:2020-10-20 20:57
   目的采用熒光定量PCR(Fluorescent Quantitative PCR,FQ-PCR)檢測(cè)沙眼衣原體(CT)、淋球菌(GC)、單純皰疹病毒Ⅱ型(HSV-Ⅱ)和人類乳頭狀病毒(HPV)等性病病原體,評(píng)價(jià)其臨床應(yīng)用價(jià)值。同時(shí)分析4種常見(jiàn)的性傳播疾病(Sexually TransmittedDisease,STD)的感染情況及流行情況,為臨床防治以上疾病提供依據(jù)。 方法隨機(jī)抽取420名疑為性病而來(lái)湘雅醫(yī)院皮膚性病門(mén)診就診的患者,采用熒光定量PCR方法檢測(cè)CT、GC、HSV-Ⅱ、HPV四種病原體,女性患者同時(shí)檢測(cè)宮頸分泌物與陰道分泌物。通過(guò)檢測(cè)結(jié)果和調(diào)查統(tǒng)計(jì)分析STD的患病情況及流行情況,采用成組資料的χ~2檢驗(yàn)和配對(duì)χ~2檢驗(yàn)分析其結(jié)果的差異性,所有結(jié)果均采用SPSS 13.0軟件進(jìn)行分析。 結(jié)果420例疑為性病患者中,用FQ-PCR檢測(cè)CT、GC、HSV-Ⅱ、HPV四種病原體,總檢出率為57.86%。282例男性標(biāo)本陽(yáng)性率分別為23.76%、12.06%、8.16%、11.7%,138例女性宮頸分泌物陽(yáng)性率分別為18.12%、23.19%、9.42%、11.59%,陰道分泌物檢出率分別為21.01%、20.9%、7.97%、8.70%。男女陽(yáng)性檢出率比較GC病原體女性檢出率高于男性,統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)有顯著性差異(χ~2=8.669,af=1,P=0.003);其余病原體男女檢出率結(jié)果差異無(wú)顯著性意義(P值均大于0.05);陰道分泌物與宮頸分泌物檢測(cè)結(jié)果差異無(wú)顯著性(χ~2=1.086,df=3,P=-0.781)。兩種或兩種以上混合感染例數(shù)的陽(yáng)性檢出率為13.81%。 結(jié)論 1、FQ-PCR方法可檢測(cè)多種病原體,適合于臨床應(yīng)用及流行病學(xué)研究。 2、采用FQ-PCR方法檢測(cè)陰道分泌物與宮頸分泌物的CT、GC、HSV-Ⅱ、HPV陽(yáng)性率無(wú)顯著性差異。 3、四種常見(jiàn)STD中CT陽(yáng)性檢出率居第一位,混合感染以兩種病原體同時(shí)感染為主。
【學(xué)位單位】:中南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】:碩士
【學(xué)位年份】:2007
【中圖分類】:R759
【部分圖文】:

擴(kuò)增曲線,不同性別,宮頸分泌物,顏色


株擴(kuò)增曲線和樣本擴(kuò)增曲線圖2一1:部分樣本FQ一cR循環(huán)擴(kuò)增圖從圖2一l一a可以看出,編號(hào)11一16、23、29、33其Ct值的結(jié)果都小于37.0,因此其結(jié)果均可判斷為陽(yáng)性,而每個(gè)編號(hào)都對(duì)應(yīng)著不同的顏色,不同的顏色代表了不同的樣本和標(biāo)準(zhǔn)株及反應(yīng)濃度,由于熒光染料在激發(fā)光的作用下所釋放的熒光光能可直接反應(yīng)出PCR擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化,其中所切割的熒光基團(tuán)數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成比例,因而根據(jù)PCR反應(yīng)液中的熒光強(qiáng)度就能算出原始的模版量,如圖2一l一b。2.2不同性別CT、GC、HSV、HPV檢測(cè)結(jié)果不同性別標(biāo)本中的cT、Gc、Hsv、HPv陽(yáng)性檢出率、了、尸值見(jiàn)表2一1、圖2一2。其中表2一1為女性患者宮頸分泌物的病原體檢出率。

擴(kuò)增曲線,檢出率比較,病原體


b擴(kuò)增曲線:不同顏色代表不同的的標(biāo)準(zhǔn)株擴(kuò)增曲線和樣本擴(kuò)增曲線圖2一1:部分樣本FQ一cR循環(huán)擴(kuò)增圖從圖2一l一a可以看出,編號(hào)11一16、23、29、33其Ct值的結(jié)果都小于37.0,因此其結(jié)果均可判斷為陽(yáng)性,而每個(gè)編號(hào)都對(duì)應(yīng)著不同的顏色,不同的顏色代表了不同的樣本和標(biāo)準(zhǔn)株及反應(yīng)濃度,由于熒光染料在激發(fā)光的作用下所釋放的熒光光能可直接反應(yīng)出PCR擴(kuò)增產(chǎn)物量的變化,其中所切割的熒光基團(tuán)數(shù)與PCR產(chǎn)物的數(shù)量成比例,因而根據(jù)PCR反應(yīng)液中的熒光強(qiáng)度就能算出原始的模版量,如圖2一l一b。2.2不同性別CT、GC、HSV、HPV檢測(cè)結(jié)果不同性別標(biāo)本中的cT、Gc、Hsv、HPv陽(yáng)性檢出率、了、尸值見(jiàn)表2一1、圖2一2。其中表2一1為女性患者宮頸分泌物的病原體檢出率。

分泌物,檢出率,宮頸分泌物,陰道分泌物


儀冷),臨床上混合感染以兩種病原體混合感染為主。2.4女性患者四種病原體陰道分泌物與宮頸分泌物檢出率比較從表2一3和圖2一3可見(jiàn),女性患者陰道分泌物與宮頸分泌物的F奮PCR的檢出率無(wú)顯著性差異,了刃,163,動(dòng)陣3,尹七。,983。各種病原體檢出率和總檢出率統(tǒng)計(jì)學(xué)檢驗(yàn)均無(wú)顯著性意義,P值均大于0.05。表2一3女性陰道分泌物與宮頤分泌物陽(yáng)性檢出率比較分泌物 (n=138)CT-DNAGC一 DNAHSV-DNAHPV-DNA合計(jì)陰道分泌物 29(21.01)28(20.9)11(7.97)12(8.70)80(57.97)宮頸分泌物25(18.12)32(23.19)13(9.42)16(11.59)86(62.32)了 0.9740.0880.0630.3540.5科 P0.3240.7670.8020.5350.461注:括號(hào)外為陽(yáng)性數(shù),括號(hào)內(nèi)為陽(yáng)性檢出率
【參考文獻(xiàn)】

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本文編號(hào):2849138

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