引言 大皰性類天皰瘡(Bullous Pemphigoid,BP)是一種自身免疫性疾病，好發(fā)于老年人，組織病理為表皮下水皰。直接免疫熒光示基底膜帶免疫球蛋白沉積。其發(fā)病機(jī)理尚不清楚。近年來(lái)人們?cè)絹?lái)越關(guān)心其與遺傳的關(guān)系。人類主要組織相容性復(fù)合體(HLA)是人類最基本的遺傳標(biāo)志之一，HLA是人體內(nèi)最為復(fù)雜的遺傳多態(tài)性系統(tǒng)，迄今為止，已發(fā)現(xiàn)大多數(shù)的自身免疫性疾病與HLA基因有關(guān)。很多國(guó)家的學(xué)者研究發(fā)現(xiàn)大皰性類天皰瘡與HLA具有明顯的相關(guān)性。 HLA復(fù)合體位于人類第6號(hào)染色體的短臂上，全長(zhǎng)4000kb，含有4×10~6個(gè)堿基，約占人類基因組的0.1％，HLA復(fù)合體傳統(tǒng)上根據(jù)其產(chǎn)物的結(jié)構(gòu)表達(dá)方式，組織分布與功能可將這類基因分為三類基因。HLA-Ⅰ類基因主要包括HLA-A、B、C位點(diǎn)，編碼HLA-Ⅰ類抗原，后者在所有有核細(xì)胞上均有表達(dá)。HLA-Ⅱ類基因包括HLA-D／DP、DR、DQ，由一組緊密相連的基因組成。HLA-Ⅲ類基因位于Ⅱ類基因和Ⅰ類基因之間。其中C2、C4A、C4B、Bf座位編碼相應(yīng)的補(bǔ)體成分。由于HLA復(fù)合體具有多個(gè)位點(diǎn)的共顯性復(fù)等位基因系統(tǒng)，故它編碼的基因表現(xiàn)出高度的多態(tài)性，多態(tài)性是HLA基因的重要特性之一，這使HLA可做為基因研究的理想標(biāo)記物。本研究應(yīng)用聚合酶鏈反應(yīng)-序列特異性引物(PCR-SSP)技術(shù)，對(duì)30例BP患者HLA-A、B等位基因進(jìn)行研究，探討與BP相關(guān)的HLA-A、B等位基因。各國(guó)學(xué)者在對(duì)關(guān)于BP與HLA-A、B抗原(等位基因)相關(guān)性的報(bào)道結(jié)論不一，以往國(guó)外研究均采用血清學(xué)方法，病例較少，且抗血清的特異性很少。我們本次研究中采用了相對(duì)較大的樣本，且采用DNA分型方法，特異性分型明顯多于以前研究，結(jié)果較為可靠。 BP作為一種自身免疫性疾病，無(wú)論是由細(xì)胞免疫介導(dǎo)還是由體液免疫介導(dǎo)，皆需要CD4~+Th細(xì)胞參與。還要受到MHC-Ⅱ類分子的限制，MHC-Ⅱ類分子主要由HLA-D區(qū)編碼。在機(jī)體免疫應(yīng)答的發(fā)生和免疫調(diào)節(jié) 中，HLA一11類基因似乎起著更重要的作用，因?yàn)镠LA一n類基因直接參 與機(jī)體免疫應(yīng)答和免疫調(diào)節(jié)的全過(guò)程。T細(xì)胞對(duì)外來(lái)抗原刺激的應(yīng)答，必 須先通過(guò)受體來(lái)識(shí)別抗原提呈細(xì)胞上的n類基因成分后發(fā)生反應(yīng)，淋巴細(xì) 胞間的相互作用也受n類基因產(chǎn)物的調(diào)節(jié)。關(guān)于BP與HLA一DRBI等位 基因的相關(guān)性，國(guó)外報(bào)道最多的是HLA一DRBI*1 101(DRS)和HLA一 D拙1*04等位基因。但在國(guó)內(nèi)關(guān)于此方面的研究尚無(wú)報(bào)道。我們應(yīng)用 PCR一SsP技術(shù)對(duì)30例BP患者HLA一DRBI等位基因進(jìn)行調(diào)查，并同168 例正常對(duì)照組比較，找出BP患者的HLA易感基因。關(guān)于BP與HLA一A、B 和HLA一DRBI等位基因的研究，我們的研究結(jié)果與國(guó)外研究有相同，也有 不同之處，說(shuō)明在不同國(guó)家、民族的BP患者之間，雖然存在著相似的遺傳 易感性，但還是不同程度地保持一定遺傳距離。 近來(lái)研究發(fā)現(xiàn)細(xì)胞免疫可能參與了大疙性類天疙瘡的發(fā)病。研究大疙 性類天疙瘡患者血清中細(xì)胞因子，可更全面地認(rèn)識(shí)大疙性類天疙瘡中免疫 學(xué)機(jī)理。細(xì)胞因子，炎癥過(guò)程與免疫調(diào)節(jié)之間關(guān)系密切。細(xì)胞因子與疾病 之間的關(guān)系相當(dāng)復(fù)雜，一方面細(xì)胞因子可以通過(guò)免疫學(xué)機(jī)制甚至非免疫學(xué) 機(jī)制抗御和治療某些疾病;另一方面細(xì)胞因子在某些情況下可以導(dǎo)致和 (或)促進(jìn)某些疾病的發(fā)生，例如腫瘤壞死因子(TNF)、白細(xì)胞介素6(IL- 6)，可能參與某些自身免疫性疾病發(fā)病。我們用雙抗體夾心EUSA方法檢 測(cè)巧例半個(gè)月內(nèi)未接受皮質(zhì)類固醇或免疫抑制劑治療的大疙性類天疙瘡 患者及20例正常人血清中IL一6、，rNF一。水平。研究患者血清中這兩種 細(xì)胞因子水平與大疙性類天疙瘡疾病嚴(yán)重程度(皮損數(shù)目)的關(guān)系。 方法 一、1.研究對(duì)象 患者組:為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一臨床醫(yī)院皮膚科和沈陽(yáng)市第七人民 醫(yī)院皮膚科住院大疙性類天疙瘡患者，30例，均為漢族，彼此無(wú)血緣關(guān)系。 正常對(duì)照組:選擇無(wú)血緣關(guān)系的漢族健康人90例，性別，年齡分布與患 者組相當(dāng)。 2.采用酚一氯仿法從外周血淋巴細(xì)胞提取DNA。DNA擴(kuò)增:PCR反應(yīng) 條件:預(yù)變性96℃，l而n;變性96℃，255;退火70℃，455;延伸72℃，455， 5個(gè)循環(huán)。變性96℃，255;退火65℃，505;延伸72℃，455，21個(gè)循環(huán)。變 性96℃，255;退火55℃，lmin;延伸72℃，Zmin，4個(gè)循環(huán)。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法:相對(duì)危險(xiǎn)率(RR)按Woolf公式計(jì)算:相對(duì)危險(xiǎn) 率:RR二(ad)/(玩)等位基因檢出率用直接計(jì)數(shù)法，各組間的等位基因分 布差異用四格表法進(jìn)行卡方(xZ)檢驗(yàn)，按Fishar法計(jì)算確切p值。 二、1.研究對(duì)象 患者組:為中國(guó)醫(yī)科大學(xué)附屬第一臨床醫(yī)院皮膚科和沈陽(yáng)市第七人民 醫(yī)院皮膚科住院大疙性類天疙瘡患者，30例，均為漢族，彼此無(wú)血緣關(guān)系。 正常對(duì)照組:選擇無(wú)血緣關(guān)系的漢族健康人168例，性別，年齡分布與 患者組相當(dāng)。 2.采用酚一氛仿法從外周血淋巴細(xì)胞提取DNA。DNA擴(kuò)增:PCR反應(yīng) 條件:預(yù)變性94℃，5面n，變性94℃，305;退火65℃，1 min;延伸72℃，1 而n，共30個(gè)循環(huán)，后延伸72℃，5 ruln。 3.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理方法:相對(duì)危險(xiǎn)率(RR)按Woolf公式計(jì)算:相對(duì)危險(xiǎn)率: RR二(ad)/(bC)等位基因檢出率用直接計(jì)數(shù)法，各組間的等位基因分布差 異用四格表法進(jìn)行卡方(xZ)檢驗(yàn)，
【學(xué)位單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位年份】：2002
【中圖分類】：R758.66
【部分圖文】：

3837圖1大疤性類天疙瘡患者HLA一B37PCR結(jié)果電泳圖38為陽(yáng)性。7%bp為內(nèi)對(duì)照引物擴(kuò)增產(chǎn)物，6O6bp，422bp’2可以判定為HLA一B37等位基因。

429bP141110圖1電泳圖大疤性類天疤瘡患者HLA一DRBI，110x和HLA一DRBI*120xPcR結(jié)果說(shuō)明:band10，11為陽(yáng)性擴(kuò)增產(chǎn)物位基因。，14為陽(yáng)性。429bp為內(nèi)對(duì)照引物擴(kuò)增產(chǎn)物，176bp，248bP，172bp分別。根據(jù)表1可以判定為HLA一D邢1*110X和HLA一D拙1*120x等

【參考文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前2條

1 賈然,呂巍,陳紹先;HLA研究進(jìn)展[J];國(guó)外醫(yī)學(xué)(免疫學(xué)分冊(cè));1985年06期

2 宋芳吉,李惠剛;HLA分型方法及其臨床意義[J];生理科學(xué);1988年04期

本文編號(hào)：2813302