【摘要】： 目的:最近研究顯示癌癥來(lái)源于癌干細(xì)胞(CSC) ,即腫瘤源發(fā)細(xì)胞,其有許多特性與干細(xì)胞相似。已分離鑒定出人的癌癥細(xì)胞中存在CSC,而動(dòng)物源性CSC的分離鑒定仍未見(jiàn)報(bào)道。根據(jù)人源性腫瘤細(xì)胞與動(dòng)物源性腫瘤細(xì)胞有諸多相似的生物學(xué)特性,本研究試圖從鼠黑色素瘤B16F10細(xì)胞中分離與鑒定CSC,為今后對(duì)CSC抗藥性、靶向治療及信號(hào)傳導(dǎo)通路等研究奠定基礎(chǔ)。 方法:從小鼠黑色素瘤分離瘤細(xì)胞,用不同免疫磁珠標(biāo)記的單克隆抗體篩選出具有特征性標(biāo)記的瘤細(xì)胞,采用流式細(xì)胞儀,對(duì)分離細(xì)胞進(jìn)行鑒定和純度評(píng)價(jià);體外觀察不同CD表型瘤細(xì)胞的增殖活性;再經(jīng)軟瓊脂培養(yǎng)基或普通培養(yǎng)基形成克隆能力篩選及通過(guò)皮下注射特征性CD標(biāo)記的瘤細(xì)胞到C57BL/6小鼠體內(nèi),比較其致瘤性,最后綜合分析與鑒定B16F10細(xì)胞中CSC。 結(jié)果:1.用不同免疫磁珠標(biāo)記的單克隆抗體從小鼠B16F10細(xì)胞中成功分離出CD133~+、CD133~ 、CD44~+、CD44~ 、CD44~+CD133~+、CD44~+CD133~ 等特征性CD標(biāo)記的瘤細(xì)胞,經(jīng)流式細(xì)胞儀分析顯示,用不同免疫磁珠標(biāo)記的單克隆抗體分離的瘤細(xì)胞純度較高、兩者檢測(cè)結(jié)果基本一致。2.經(jīng)軟瓊脂培養(yǎng)基或普通培養(yǎng)基形成克隆能力篩選結(jié)果顯示:CD133~+ B16F10細(xì)胞的克隆形成率高于CD133~ B16F10細(xì)胞,CD44~+ B16F10細(xì)胞克隆形成率高于CD44~ B16F10細(xì)胞。CD44~+CD133~+ B16F10細(xì)胞克隆形成率高于CD44~+CD133~ B16F10細(xì)胞。3. CD133~+ B16F10細(xì)胞體外增殖活性要高于CD133 。4. CD133~+、CD44~+、CD44~+CD133~+和CD44~+CD133~+CD24+ B16F10細(xì)胞在C57BL/6小鼠體內(nèi)致瘤性分別強(qiáng)于CD133~ 、CD44~ 、CD44~+CD133 和CD44~+CD133~+CD24 B16F10細(xì)胞。 結(jié)論:CD133~+ B16F10細(xì)胞體外增殖活性較高, CD133~+、CD44~+、CD44~+CD133~+ B16F10細(xì)胞在軟瓊脂培養(yǎng)基或普通培養(yǎng)基上形成克隆能力較強(qiáng)、CD44~+CD133~+ CD24+ B16F10
【學(xué)位授予單位】：東南大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：碩士
【學(xué)位授予年份】：2006
【分類號(hào)】：R739.5

【引證文獻(xiàn)】

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本文編號(hào)：2799907