【摘要】： 前言 銀屑病以表皮角質(zhì)形成細(xì)胞過(guò)度增生和淋巴細(xì)胞浸潤(rùn)為特征。免疫異常在其發(fā)病過(guò)程中起著重要作用。免疫調(diào)節(jié)主要是通過(guò)細(xì)胞因子相互作用來(lái)實(shí)現(xiàn)的，銀屑病皮損和／或外周血存在TNF-α及其受體的異常。 研究表明，銀屑病皮損TNF-α的免疫反應(yīng)性和生物學(xué)活性明顯升高。凍融的銀屑病皮損上清液含有大量的TNF-α；角質(zhì)形成細(xì)胞、血管內(nèi)皮細(xì)胞和表皮樹(shù)突狀細(xì)胞上的粘附分子表達(dá)增高，角質(zhì)形成細(xì)胞和真皮血管內(nèi)皮細(xì)胞上的TNF-α表達(dá)增高，提示TNF-α可能通過(guò)干預(yù)銀屑病皮損區(qū)粘附分子表達(dá)而參與銀屑病的發(fā)生。然而，并不能在銀屑病皮損內(nèi)始終如一地檢測(cè)到TNF-α。 TNF-α通過(guò)與其受體(TNFR)結(jié)合發(fā)揮其生物學(xué)效應(yīng)。有報(bào)道銀屑病皮損處表皮全層和真皮血管周圍浸潤(rùn)細(xì)胞均表達(dá)TNFR-Ⅰ，并認(rèn)為TNF-α可通過(guò)與TNFR-Ⅰ結(jié)合而作用于角質(zhì)形成細(xì)胞等；銀屑病皮損表皮不表達(dá)TNFR-Ⅱ，真皮內(nèi)浸潤(rùn)炎性細(xì)胞表達(dá)TNFR-Ⅱ。隨后的研究發(fā)現(xiàn)銀屑病皮損表皮TNFR-Ⅰ的含量明顯增高，TNFR-Ⅱ輕度增高，并認(rèn)為TNF-α受體的局部或系統(tǒng)釋放可能調(diào)節(jié)TNF-α的作用效果。可見(jiàn)TNFR-Ⅰ和TNFR-Ⅱ在銀屑病皮損處的表達(dá)仍不十分明確。國(guó)內(nèi)尚未見(jiàn)有關(guān)于TNF-α及其受體在銀屑病皮損邊緣外觀正常皮膚表達(dá)與否的研究報(bào)道。 近年來(lái)，人們對(duì)銀屑病患者外周血是否存在TNF-α及其受體的異常表達(dá)進(jìn)行了研究，Gomi等檢測(cè)21例尋常型銀屑病患者血清TNF-α，結(jié)果表明TNF-α的水平無(wú)明顯改變。隨后的研究發(fā)現(xiàn)銀屑病外周血TNF-α的血清水平明顯升高。最近有人在對(duì)銀屑病患者巨細(xì)胞病毒與TNF-α關(guān)系的研究中也觀察到了血清TNF-α水平增高。上述研究結(jié)果提示外周血TNF-α可能參與了銀屑病的發(fā)生。 外周血可溶性TNF-α受體(sTNFRs)對(duì)體內(nèi)TNF-α的生物學(xué)活性起著重要的調(diào)節(jié)作用，但sTNFRs與銀屑病方面的研究報(bào)道很少。近年來(lái)的研究發(fā)現(xiàn)銀屑病血清sTNFR-Ⅰ的含量明顯增高；還有報(bào)道關(guān)節(jié)病型銀 屑病外周血TNF－a含量降低，sTNFR－I和sTNFR一見(jiàn)的活性上調(diào)。n－ FRs參與免疫過(guò)程，sTNFRs濃度反映細(xì)胞免疫活性，與TNF－a和其它可 溶性免疫物質(zhì)卜幾一ZR）等密切相關(guān)。同時(shí)檢測(cè)銀屑病皮損和外周血TNF －。及其受體水平對(duì)于分析皮損局部與整體TNF－a及其受體變化的關(guān)系 非常必要。目前尚未見(jiàn)同時(shí)比較皮損局部與外周血TNF－a及其受體變化 的實(shí)驗(yàn)資料。 為此，本文應(yīng)用兔疫組織化學(xué)方法對(duì)銀屑病皮損、皮損邊緣外觀正常皮 膚TNF－a及其受體的表達(dá)進(jìn)行研究；用 ELISA方法檢測(cè)銀屑病血清 TNF 一。及其受體含量，以探討皮損和血清TNF－a及其受體在銀屑病發(fā)生發(fā) 展中的作用。國(guó)內(nèi)外尚未見(jiàn)銀屑病皮損表皮TNF－。及其受體InRNA表達(dá) 與否的研究報(bào)道，本文應(yīng)用RT—PCR方法檢測(cè)尋常型銀屑病患者皮損表皮 TNF—a及其受體的mRNA相對(duì)量，以探討TNF－a及其受體mRNA對(duì)尋 常型銀屑病皮損TNF－a及其受體的影響。 材料和方法 二．標(biāo)本收集 O）患者診斷確認(rèn)：所有尋常型銀屑病患者均經(jīng)臨床和組織病理確診。 收集47例病例的皮損47份，外周靜脈血20份，并從外周靜脈血中分高血 清20份。 p）獻(xiàn)血員和正常對(duì)照：采集正常獻(xiàn)血員外周靜脈血20份，并從中分 高血清20份。收集整形外科手術(shù)切除的正常皮膚34份。 2．皮損中 TNF—a及其受體’YNFR—I和 TNFR一見(jiàn)的檢測(cè) 分別以抗人 TNF－a、TNFR－I和 TNFR－11為一抗，采用免疫組織化 學(xué)方法對(duì)皮損和皮損邊緣外觀正常皮膚表皮及真皮內(nèi)單一核細(xì)胞’I’NF一。 及其受體TNFR—I和TNFR－11的表達(dá)進(jìn)行研究。 3．用EllSA法檢測(cè)血清中TNF－a及其受體的含量 采用人TNF－。ELISA試劑盒檢測(cè)銀屑病患者血清中TNF－a，利用人 sTNFR ELISA試劑盒檢測(cè)銀屑病患者血清中 sTNFR－I和 sTNFR—11。 4．表皮RNA提取JNA純度和濃度測(cè)定及其濃度的調(diào)定 O）真皮表皮分離：用inn－na’緩沖液剝離表皮。 ·2· p）以目前通用的TRIZOL方法提取正常人表皮和尋常型銀屑病患者 皮損表皮總 RNA。 櫥）提取的總RNA用紫外分光光度計(jì)測(cè)定260run和280urn的光密度 （ODX并根據(jù)此OD值計(jì)算RNA的濃度和純度，用DEPC水調(diào)定RNA濃度 至 0．5 pg／汕 5．逆轉(zhuǎn)錄合成山NA 遵循 wmesa試劑盒的操作要求，取 z…（含二％nx）ns稀釋液進(jìn) 行逆轉(zhuǎn)錄。經(jīng)變性和逆轉(zhuǎn)錄過(guò)程之后，將產(chǎn)物 CDNA按 1：4稀釋并分裝，一 20℃凍存，以供PCR使用。 6．引物設(shè)定 （l）p一actin內(nèi)對(duì)照5！物 利用［me6引物設(shè)計(jì)軟件涉tip：人。 g6。。幀．Mt．edVcgi－ biatPrimer／Priltle6·c矽）設(shè)計(jì)內(nèi)對(duì)照引物對(duì)：民／p卯 （2）TNF－a、TNFR一互和 TNFR－11弓物 本文采用已有文獻(xiàn)報(bào)道的TNF－a、TNFR－I和TNFR－11片段為模 板設(shè)計(jì) PCR弓物對(duì)：T；／TZ、11／IZ和幾／＊。 7·PCR擴(kuò)增條件 采用20gi反應(yīng)體系，其中含 10 x Biber【M4”reeX…，dNTP卜」 3．6…，MgCI＊．二…，Taq DNA聚合酶0·4…，CDNA模板4PI，引物口2．5
【學(xué)位授予單位】：中國(guó)醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級(jí)別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2002
【分類號(hào)】：R758.63

【相似文獻(xiàn)】

相關(guān)期刊論文 前10條

1 盧彥順;;清涼解毒湯聯(lián)合阿維A酯治療銀屑病臨床研究[J];中醫(yī)學(xué)報(bào);2011年08期

2 楊麗偉;;解開(kāi)心結(jié),告別銀屑——訪全軍皮膚科專業(yè)委員會(huì)顧問(wèn)楊雪琴教授[J];家庭醫(yī)藥;2011年07期

3 田榮輝;;銀屑病70例臨床護(hù)理[J];齊魯護(hù)理雜志;2011年22期

4 范孝叁;;加味土槐飲治療尋常型銀屑病72例[J];云南中醫(yī)中藥雜志;2011年05期

5 于華平;;阿維A治療銀屑病60例臨床分析[J];醫(yī)學(xué)信息(上旬刊);2011年08期

6 郭黎光;張義梅;;分步綜合療法治療銀屑病的研究及臨床應(yīng)用[J];中國(guó)民間療法;2011年08期

7 舒慧敏;;清開(kāi)靈注射液治療尋常性銀屑病療效觀察[J];中國(guó)民族民間醫(yī)藥;2011年11期

8 吳軍;;與心血管病的關(guān)聯(lián)——銀屑病(牛皮癬)[J];心血管病防治知識(shí);2009年10期

9 趙德成;趙璐;;銀屑病與惡性腫瘤探討[J];中國(guó)民族民間醫(yī)藥;2011年16期

10 黃存垣;;銀屑病(松皮癬)的中醫(yī)調(diào)治[J];老友;2011年08期

相關(guān)會(huì)議論文 前10條

1 張立新;楊頂權(quán);宣紅梅;白彥萍;宋佩華;;中藥聯(lián)合UVB治療尋常型斑塊狀銀屑病臨床療效觀察[A];2009全國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2009年

2 馬玉德;;中西醫(yī)結(jié)合治療銀屑病144例[A];中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合學(xué)會(huì)瘍科分會(huì)第十一次全國(guó)學(xué)術(shù)交流會(huì)論文匯編[C];2003年

3 侯素春;劉曉明;;芳香維甲酸乙酯(阿羅神)治療24例銀屑病的臨床觀察[A];2003中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

4 熊英;鄧志倫;江海燕;;阿羅神丸治療銀屑病28例療效觀察[A];2001年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

5 孫麗男;苗翠蘭;;雷公藤治療尋常型銀屑病60例觀察[A];第四次全國(guó)雷公藤學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2004年

6 閻衡;葉慶佾;郝飛;黃東平;唐書(shū)謙;黃秀英;張黎;;銀屑病患者外周血單個(gè)核細(xì)胞中CTLA_4mRNA及蛋白的表達(dá)[A];2001年中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2001年

7 陳明星;姚亞南;王愛(ài)民;金群;;銀康顆粒劑治療銀屑病252例臨床觀察[A];全國(guó)中藥研究學(xué)術(shù)討論會(huì)論文集[C];2003年

8 王冬云;彭振輝;譚升順;楚瑞奇;劉平;馬慧群;張盤諫;;PML表達(dá)在銀屑病發(fā)病機(jī)理中的作用[A];2003中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

9 趙艷霞;陳學(xué)榮;李東明;;單味中藥及其提取制劑治療銀屑病的臨床應(yīng)用[A];2003中國(guó)中西醫(yī)結(jié)合皮膚性病學(xué)術(shù)會(huì)議論文匯編[C];2003年

10 唐雋;郝飛;;銀屑病治療的評(píng)價(jià)[A];中華醫(yī)學(xué)會(huì)第14次全國(guó)皮膚性病學(xué)術(shù)年會(huì)論文匯編[C];2008年

相關(guān)重要報(bào)紙文章 前10條

1 皮膚科主任：任曉光;患了銀屑病怎么辦[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2003年

2 本報(bào)記者 章關(guān)春;郎氏消銀湯治療銀屑病[N];健康報(bào);2001年

3 泰國(guó)華僑中醫(yī)院皮膚科 郭慧;中醫(yī)中藥治療銀屑病的臨床體會(huì)[N];上海中醫(yī)藥報(bào);2005年

4 鄒先彪;中西醫(yī)結(jié)合治銀屑病如虎添翼[N];健康報(bào);2005年

5 上海中醫(yī)藥大學(xué)附屬岳陽(yáng)中西醫(yī)結(jié)合醫(yī)院皮膚科 李斌 范斌;解開(kāi)銀屑病患者心中的疑惑[N];衛(wèi)生與生活報(bào);2004年

6 饒嬡;反反復(fù)復(fù)銀屑病[N];醫(yī)藥經(jīng)濟(jì)報(bào);2000年

7 本報(bào)記者 海霞　吳大衛(wèi) 夏廈;關(guān)愛(ài)銀屑病患者[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2009年

8 本報(bào)記者 徐亞靜;銀屑病寧可不治莫亂治[N];中國(guó)醫(yī)藥報(bào);2009年

9 ;紅花注射液治療尋常型銀屑病[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2005年

10 本報(bào)記者 章關(guān)春;老中醫(yī)郎玉麟診療銀屑病別具一格[N];中國(guó)中醫(yī)藥報(bào);2008年

相關(guān)博士學(xué)位論文 前10條

1 劉海杰;仙方消銀片治療尋常型銀屑病的相關(guān)性研究[D];湖南中醫(yī)學(xué)院;2002年

2 高奎斌;尋常型銀屑病患者皮損和血清中腫瘤壞死因子alpha及其受體的檢測(cè)及其相關(guān)性研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2002年

3 程暉;全基因組關(guān)聯(lián)研究搜尋中國(guó)漢族人銀屑病易感基因[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2011年

4 張安平;漢族人尋常型銀屑病與HLA基因分型的實(shí)驗(yàn)研究[D];南京醫(yī)科大學(xué);2002年

5 王官清;天皰瘡、大皰性類天皰瘡和尋常型銀屑病與I型單純皰疹病毒、人類皰疹病毒8的相關(guān)性研究[D];中國(guó)醫(yī)科大學(xué);2001年

6 曹經(jīng)江;胰島素樣生長(zhǎng)因子結(jié)合蛋白7通過(guò)調(diào)控TGF-β1信號(hào)通路抑制HaCaT細(xì)胞生長(zhǎng)[D];華中科技大學(xué);2011年

7 周炯;整合素和細(xì)胞外基質(zhì)在硬皮病與銀屑病皮損角質(zhì)形成細(xì)胞和成纖維細(xì)胞中的比較研究[D];浙江大學(xué);2012年

8 高春芳;轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子βs及受體在銀屑病皮損和外周血中的表達(dá)與意義[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2001年

9 向麗萍;竹Ⅱ?qū)︺y屑病患者NGF、NGF受體的影響及遠(yuǎn)期療效觀察[D];湖南中醫(yī)藥大學(xué);2006年

10 李慧;SERPINB1在銀屑病中的表達(dá)及功能研究[D];第二軍醫(yī)大學(xué);2011年

相關(guān)碩士學(xué)位論文 前10條

1 李志鴻;解毒消u曁樂(lè)瘟埔疾⊙俺Ｐ徒蠱詰牧俅慚芯縖D];黑龍江中醫(yī)藥大學(xué);2004年

2 葛宏松;中國(guó)漢族人尋常型銀屑病與HLA單倍型相關(guān)性研究[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2003年

3 司陡方民;尋常型銀屑病皮損中Bcl-2、Bax、Fas及Fas-L的表達(dá)研究[D];暨南大學(xué);2002年

4 梁云生;銀屑病患者APOE多態(tài)性及與血脂相關(guān)性研究[D];中南大學(xué);2003年

5 陳積愫;尋常型銀屑病中VEGF和MCP-1表達(dá)的研究[D];浙江大學(xué);2001年

6 馬鐵牛;尋常型銀屑病患者皮損真皮內(nèi)免疫細(xì)胞的研究[D];天津醫(yī)科大學(xué);2002年

7 石學(xué)波;清開(kāi)靈注射液對(duì)進(jìn)行期尋常型銀屑病患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T細(xì)胞的影響[D];南京中醫(yī)藥大學(xué);2004年

8 班秀芬;數(shù)據(jù)挖掘方法研究尋常型銀屑病證侯規(guī)律[D];成都中醫(yī)藥大學(xué);2003年

9 王紅艷;尋常型銀屑病遺傳流行病學(xué)及遺傳模式分析[D];安徽醫(yī)科大學(xué);2002年

10 張春紅;土苓飲治療進(jìn)行期尋常型銀屑病的臨床研究及對(duì)TNF-α、IL-8水平的影響[D];山東中醫(yī)藥大學(xué);2003年

本文編號(hào)：2772813