【摘要】： 目的收集山東某地一多發(fā)性家族性毛發(fā)上皮瘤家系，通過直接測序明確該家系是否存在CYLD基因第16、18號外顯子的突變，以利于進一步研究多發(fā)性家族性毛發(fā)上皮瘤的發(fā)病機制。方法經(jīng)知情同意后收集家系成員的臨床資料及血液樣本，繪制家系圖；抽提家系成員外周血基因組DNA，利用PCR特異性擴增、直接測序方法對CYLD基因的第16、18號外顯子進行檢測。結(jié)果1．收集到一多發(fā)性毛發(fā)上皮瘤家系，整理了該家系成員完整的臨床資料，繪制了家系圖。2．抽提并保存了家系成員的DNA樣本。3．對該家系成員DNA樣本進行了PCR特異性擴增獲得相應(yīng)片段4．在自動激發(fā)熒光DNA測序儀ABI PRISM~(TM) 3700上對相應(yīng)片段進行直接測序5．本家系成員的CYLD基因第16、18號外顯子未發(fā)現(xiàn)突變。結(jié)論本多發(fā)性家族性毛發(fā)上皮瘤家系并非CYLD基因第16、18號外顯子突變所致，提示了多發(fā)性家族性毛發(fā)上皮瘤具有遺傳異質(zhì)性。
【學位授予單位】：山東大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R758.5
【圖文】：

IIE染色4xlo

圖4HE染色20X10H.E染色:真皮內(nèi)有多處基底樣細胞團塊，周邊細胞呈姍欄狀，可見毛乳樣結(jié)構(gòu)、篩孔樣結(jié)構(gòu)及毛囊漏斗部囊腫，周圍未見收縮間像。(圈3、4)(4)采集血樣:在征得所有個體知情同意后采集到該家系成員血樣共12份，中病人血樣4份。每個個體采血5血，加1倒IACD抗凝劑，混勻。2.基因組DNA的抽提(l)裂解紅細胞:抗凝血6血(5血血，1血抗凝劑)加入15d塑料離，加入夕.1預冷的溶血試劑，上下順倒10次左右，冰浴10分鐘，4oC下8的0rI心10，棄上清。重復上述步驟l次。(2)裂解白細胞:加入3血核懸液，輕輕混勻，加入50d引護C預熱的05，再加入40d預冷的蛋自醉K(2O娜動目)，100次分輕振，45oc消。

(包括該家系中患者及非患者)直接測序，與CYLDI基因組序列進行序列比對，未發(fā)現(xiàn)突變。測序圖見圖5名:).r.;:{}八從11、lllj人J.J.r矛1.肌川八圖5先證者以。n18直接測序圖(圖中TcTG即為張學軍等發(fā)現(xiàn)發(fā)生缺失的CAGA堿基序列的互補鏈相對應(yīng)堿基序列)丁 CC66CAC丁自丁C丁6已!乃A6〔丁!三AAA’圖6該家系中正常人的.xonls直接測序圖

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本文編號：2757158