survivin在尖銳濕疣組織中表達的研究

發(fā)布時間：2020-07-16 01:50

【摘要】： 尖銳濕疣是由人乳頭瘤病毒引起的外陰、生殖道、肛門等部位的良性表皮腫瘤。早期發(fā)病癥狀較輕常難以覺察到。主要病損表現(xiàn)為肛門生殖道疣狀贅生物。尖銳濕疣的典型病理改變是棘細胞層中出現(xiàn)空泡細胞。迄今為止已發(fā)現(xiàn)人乳頭瘤病毒有100多個分型，絕大多數(shù)是無害的，有30多種可以通過性傳播方式致病。這30多種病毒又可分為低危型和高危型，低危型HPV引起的生殖道、宮頸、陰莖、直腸等處的損害一般不會癌變，而高危型的HPV感染有癌變的可能。CA的發(fā)生發(fā)展是一個多因素、多步驟的過程，過去的幾年對尖銳濕疣的發(fā)病機制的研究主要集中在某些免疫蛋白的異常表達如HLA—A3860DQ2、Caspase—3、Bcl-2、CD44、COX-2.指導臨床從干擾細胞免疫功能方面進行治療。Survivin是一種新發(fā)現(xiàn)的凋亡抑制基因，可以抑制細胞凋亡，誘導增生。我們利用免疫組化法對17例正常皮膚、120例尖銳濕疣組織中survivin的表達進行了檢測，探討了survivin與尖銳濕疣發(fā)生發(fā)展的關系，研究認為survivin基因在尖銳濕疣組織中的異常表達可能導致了細胞的增殖異常，與尖銳濕疣的發(fā)生、病理改變、臨床復發(fā)、發(fā)展有關。研究提示我們可以從封閉survivin基因，調節(jié)細胞凋亡方面來治療尖銳濕疣，為尖銳濕疣的臨床治療提供新思路，從而提高治愈率，降低復發(fā)率。目的：用聚合酶鏈式反應技術(PCR)檢測HPV-DNA，免疫組織化學鏈霉素抗生物蛋白-過氧化酶連接法(SP法)檢測尖銳濕疣組織中survivin的表達，以探討凋亡抑制基因survivin在尖銳濕疣組織中的表達與尖銳濕疣發(fā)生發(fā)展、臨床病理之間的關系，以及在臨床治療方面的意義。方法：收集2005年2月—2006年10月在天津醫(yī)科大學總醫(yī)院皮膚性病門診就診的臨床診斷為尖銳濕疣的病例120例，另取外科非皮膚病手術的正常皮膚17例作為陽性對照。取材方法均采用剪除法剪除標本0、2×0、2×0、3大小，應用PCR方法檢測HPV-DNA，將PCR檢測HPV-DNA為陽性的120例標本平分成兩份，一份用5％的甲醛溶液固定24—48小時，石蠟包埋，常規(guī)石蠟標本切片，4—5um厚；一份用鋁箔包裹并編號貼上標簽投入液態(tài)罐(—196℃)中冷凍保存。將120例尖銳濕疣組織病理切片用免疫組織化學鏈霉素抗生物蛋白-過氧化酶連接法(SP法)，檢測survivin在120例尖銳濕疣組織，17例正常皮膚組織中的表達。結果：經(jīng)過PCR技術檢測120例尖銳濕疣標本，通用引物擴增的是HPVDNA位點是6321—6340，堿基長度是450bp，故在450 bp出現(xiàn)擴增帶者為陽性。120例標本經(jīng)二甲苯脫蠟，系列酒精水化，熱修復抗原，滴加生物素化山羊抗兔或兔抗山羊1gG，DAB顯色，顯微鏡觀察，染色陽性信號呈棕黃色顆粒，表達主要位于細胞核，將陽性細胞按其數(shù)量及染色強度分為3級：表達弱陽性(+)，即陽性細胞數(shù)小于10％，染色強度為弱陽性或僅個別細胞呈中至強陽性者；表達強陽性(+++)，即陽性細胞數(shù)60％，染色強度為中至強陽性，少數(shù)細胞可為弱陽性表達；中性陽性(++)，即陽性細胞數(shù)介于表達弱陽性與表達強陽性兩級之間；染色強度與背景無明顯差別者為陰性。尖銳濕疣中survivin的陽性表達率為52.5％、17例正常皮膚組織中survivin不表達，差別分別有顯著性(p＜0.05)；結論：1、survivin基因在尖銳濕疣組織中表達異常，以基底層，棘細胞層中表達明顯。在正常皮膚中不表達。 2、survivin基因可能導致細胞的增殖異常，與尖銳濕疣的發(fā)生、病理改變、臨床復發(fā)、發(fā)展有關。 3、survivin在尖銳濕疣中的表達不能作為尖銳濕疣的生物學行為指標。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2007
【分類號】：R752.53
【圖文】：

正常皮膚,免疫組化