【摘要】： 目的： 通過分析銀屑病組與健康對照組外周血調(diào)節(jié)性T細胞(regulatory T cells，Tr細胞)數(shù)量及雷公藤甲素(Triptolide，Tri)對其的影響，以及Tri與環(huán)孢菌素A(Cyclosporin A，CsA)對多克隆刺激劑體外活化T細胞CD69表達及細胞周期影響的比較性研究，探討Tri治療銀屑病的作用機制，以期為Tri的臨床應用提供更深入的理論依據(jù)。 方法： 分別取銀屑病組和健康對照組肝素抗凝靜脈血，新鮮血標本或加Tri體外全血培養(yǎng)72h后三色免疫熒光標記測定Tr細胞；Tri或CsA與外周血預孵30min后，加入多克隆刺激劑PDB+Ionomycin(Ion)或PHA培養(yǎng)，分別于4h、24h和72h收獲細胞。培養(yǎng)4h和24h收獲的細胞用抗CD3和抗CD69單抗進行雙色免疫熒光標記，以檢測T細胞的活化；培養(yǎng)72h收獲的細胞以抗CD3單抗標記并裂解紅細胞，再以PI染色分析Tri與CsA對T細胞細胞周期的影響及Tri對T細胞的細胞毒性。全部樣品以流式細胞儀進行檢測和分析。 結(jié)果： 1 銀屑病患者外周血Tr細胞的數(shù)量：銀屑病組新鮮外周血CD4~+CD25~+T細胞和CD8~+CD28~-T細胞占總T細胞的百分率分別為2.30±0.35和38.85±1.89，均顯著低于健康對照組(百分率分別為5.67±0.44和53.30±2.01，P＜0.01)。銀屑病患者及健康對照以Tri(1ug／mL)處理72h組，外周血CD4~+CD25~+T細胞占T細 暨南大學頎士學位論文（2003）雷公藤甲素對銀屑病思者外周血 T細胞活性的影響 胞的百分率分別為2．18士0．32和5．58士0．45，未處理組的百分率分別為2．ZI士0．41 和 5．64士 0．56（P＞0．05），而兩者以 Ti處理 72h組外周血 CDS”CD28”T細胞占 T 細胞的百分率分別為 37．95士 1．42和 sl．75土 1．08，與兩者未處理組（百分率分別 為38．34士l．75和52．20士l．56，P＞0．05）差別無統(tǒng)計學意義。 2 h對多克隆刺激劑體外活化銀屑病患者外周血T細胞CD69表達的影響： Ti能夠顯著下調(diào) PDBqon活化 T細胞 CD69的表達率，當 Ti的濃度從 sng／InL、 40n狙、20（）up升高至luglmL時，PDB刊on活化4h銀屑病組T細胞CD69 表達百分率依次為 gi．88士2．14、72．gi士2．65、35．34士l．50和 11．08士l．78，而健康對 照組分別為 93．78土l．12、73．10士l．sl、36．40士l．32和 10．32土卜M（P＞（．05）。在 相同濃度梯度Ti的作用下，PHA活化24h銀屑病T細胞CD69表達的百分率分 別為57．59土l．56、30．06士l．41、9．sl士l．12及6．35上l．04，健康對照組則分別為 58．72土l．89、31．27士l．16、10．19士0．93及 6．65士l．13（P＞0．05）。且 Ti對處于靜 息狀態(tài)的T細胞CD69的表達無抑制效應，此外，CsA對兩組不同刺激劑體外活 化T細胞CD69的表達均無影響。 3Th對多克隆刺激劑體外活化銀屑病患者外周血T細胞細胞周期的影響：經(jīng) PDB＋Ion刺激后，銀屑病組與健康對照組分別有 18．11％和 18．30％的外周血 T細 胞進入S＋G。IM期，而Ti及CsA能夠呈劑量依賴性阻止多克隆刺激劑活化T細 胞的增殖，但抑制效應未顯示細胞周期特異性。細胞活性分析顯示Tri對T細胞 無明顯細胞毒作用。 結(jié)論： 銀屑病患者存在調(diào)節(jié)性T細胞數(shù)量的下降；本實驗濃度范圍內(nèi)的Ti對多克 隆刺激劑體外活化T細胞CD69的表達有明顯抑制作用，并能明顯阻止多克隆刺 激劑體外活化的T細胞進入S期和GZfM期。這些結(jié)果提示Ti可能通過干擾早 期活化信號轉(zhuǎn)導通路而抑制T細胞的活化和增殖，這可能是其治療銀屑病的細胞 免疫學基礎(chǔ)。本研究結(jié)果對雷公藤甲素及以其為主要活性成分的雷公藤制劑在銀 屑病的臨床應用上具有一定的指導意義。
【學位授予單位】：暨南大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2003
【分類號】：R758.63

【參考文獻】

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本文編號：2745574