【摘要】： 第一部分Toll樣受體2及相關因子在銀屑病患者皮損中的表達目的:探討TLR2、信號途徑下游分子NF-κBp65,以及可能的效應分子TGF-α在銀屑病患者皮損中的表達及其與銀屑病嚴重程度的關系。方法:采用EliVision免疫組化法檢測40例銀屑病患者進行期皮損、11例非皮損區(qū)及15例正常人皮膚中TLR2、NF-κBp65、TGF-α的表達,對其在皮損中的表達進行相關性分析,并將結果與PASI評分進行相關性分析。結果:與正常人皮膚及銀屑病患者非皮損區(qū)相比,銀屑病患者皮損表皮中TLR2、NF-κBp65、TGF-α的表達明顯上調,而非皮損區(qū)TLR2的表達也高于正常人皮膚,差異均有統計學意義(P＜0.05)。銀屑病患者皮損表皮中TLR2、NF-κBp65的表達水平與PASI評分之間存在正相關(P＜0.05)。銀屑病患者皮損表皮中TLR2與NF-κBp65、TLR2與TGF-α、NF-κBp65與TGF-α表達水平之間均存在正相關(P＜0.05)。結論:TLR2、NF-κBp65、TGF-α在銀屑病中表達異常,可能共同參與了銀屑病的發(fā)病過程。 第二部分Toll樣受體2對人角質形成細胞增殖的影響 目的:探討TLR2對體外培養(yǎng)的人角質形成細胞增殖的影響。方法:應用天然配體肽聚糖(PGN)體外活化人角質形成細胞TLR2,用MTT法檢測PGN對角質形成細胞體外增殖的影響,確定最適作用濃度;用實時熒光定量PCR法和Western-blot方法分別檢測角質形成細胞TLR2、細胞增殖標記Ki67基因轉錄和蛋白的表達水平;采用抗體封閉實驗分析封閉TLR2對PGN誘導角質形成細胞表達TLR2、Ki67的影響。結果:不同濃度的PGN處理角質形成細胞后24小時,在1.25、2.5、5ug/mL的濃度下細胞出現明顯增殖(P＜0.05)。1.25ug/mL PGN作用后12小時和24小時角質形成細胞TLR2 mRNA的表達明顯增高,24小時和48小時Ki67 mRNA的表達明顯增高;1.25、2.5和5ug/mL PGN作用后24小時,各濃度組角質形成細胞TLR2 mRNA和蛋白的表達均增加,其中1.25和2.5ug/mL濃度下Ki67 mRNA的表達明顯增加,各濃度組Ki67蛋白合成均增加(P＜0.05)。以抗人TLR2單克隆阻斷性抗體封閉TLR2后,PGN誘導的角質形成細胞TLR2、Ki67 mRNA和蛋白表達的上調均受到明顯抑制(P＜0.05)。結論:角質形成細胞TLR2信號途徑的活化可促進角質形成細胞的增殖,這一過程可能參與了銀屑病的發(fā)病。 第三部分Toll樣受體2在人角質形成細胞增殖中的作用機制探討 目的:研究TLR2對體外培養(yǎng)的人角質形成細胞NF-κB活化及TGF-α表達的影響,以探討TLR2在人角質形成細胞增殖中的可能作用機制。方法:應用天然配體肽聚糖(PGN)體外活化人角質形成細胞TLR2,用實時熒光定量PCR法檢測角質形成細胞NF-κBp65、TGF-αmRNA的表達,用Western-blot方法檢測核內NF-κBp65和細胞TGF-α蛋白的表達;采用抗體封閉實驗分析封閉TLR2對PGN誘導角質形成細胞NF-κB活化和TGF-α表達的影響。結果:1.25ug/mLPGN作用后24小時角質形成細胞NF-κBp65 mRNA的表達明顯增高,6小時和24小時TGF-αmRNA的表達明顯增高;1.25、2.5和5ug/mL PGN作用后24小時,各濃度組角質形成細胞核內NF-κBp65蛋白合成均增加,其中1.25和5ug/mL濃度下TGF-αmRNA和蛋白表達均明顯增加(P＜0.05)。以抗人TLR2單克隆阻斷性抗體封閉TLR2后,PGN誘導的角質形成細胞NF-κB活化及TGF-α表達上調均受到明顯抑制(P＜0.05)。結論:角質形成細胞TLR2經PGN誘導活化后,可能通過促進NF-κB活化及TGF-α表達而導致角質形成細胞的異常增殖。
【學位授予單位】：復旦大學
【學位級別】：博士
【學位授予年份】：2008
【分類號】：R758.63
【圖文】：

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嘴‘飛圖1一 2NF一 KBp65在正常皮膚、銀屑病非皮損區(qū)和皮損區(qū)表皮中的表達(Elivision法X100)a:NF一 KBP65在正常皮膚表皮角質形成細胞中的弱表達;b:NF一 KBp65在銀屑病外觀正常的非皮損區(qū)表皮中基底層和棘層細胞中表達增加;C:NF一 KBp65在銀屑病皮損區(qū)表皮全層表達，胞核可見較深的表達

【引證文獻】

相關碩士學位論文 前2條

1 閔倩;TLR2在口腔粘膜下纖維性變組織中表達的研究[D];中南大學;2011年

2 鄭景文;消銀洗劑治療尋常型銀屑病的臨床研究及實驗研究[D];北京中醫(yī)藥大學;2013年

本文編號：2743980