【摘要】： 黑素細胞是合成和分泌黑素的樹枝狀細胞，位于表皮和真皮交界處，每個黑素細胞與其周圍約36個角質(zhì)形成細胞在結(jié)構(gòu)和功能上存在著密切的聯(lián)系，形成了表皮黑素單位。黑素細胞幾乎遍布所有組織，最常見于表皮、毛囊等處。黑素分為優(yōu)黑素和褐黑素兩種，其生物合成是一個由酪氨酸酶催化體內(nèi)酪氨酸羥化而啟動的一系列生化反應(yīng)過程。酪氨酸酶是黑素生成的限速酶，其數(shù)量和活性決定著黑素生成的速度和產(chǎn)量。因為黑素是決定皮膚顏色的主要色素，關(guān)于黑素細胞及黑素生物合成調(diào)控問題的研究已成為近幾年來科研的熱點之一。人們在體外培養(yǎng)黑素細胞的基礎(chǔ)上，對黑素細胞與周圍細胞之間的調(diào)節(jié)、黑素細胞與內(nèi)分泌和免疫系統(tǒng)的關(guān)系、細胞因子及炎性介質(zhì)的作用、以及酪氨酸酶基因家族表達的調(diào)控等方面進行了很多的研究。對于臨床醫(yī)療工作具有實際指導意義的是研究某些安全有效的藥物對黑素細胞的功能、尤其是黑素合成的調(diào)節(jié)作用。維甲酸是目前逐漸得到廣泛應(yīng)用的一類藥物，它具有多種藥理活性。在臨床實踐中，人們發(fā)現(xiàn)維甲酸對人的膚色有影響，但缺乏確實的臨床與實驗證明。 本實驗基于體外培養(yǎng)小鼠B16黑素瘤細胞和正常人黑素細胞，對不同濃度的維甲酸及其與氫醌協(xié)同對黑素細胞的作用進行研究，并通過12-O-十四烷酰佛波醇-13-醋酸酯(TPA)、異丁基甲基黃嘌呤(IBMX)和霍亂毒素(CT)對維甲酸誘導小鼠B16黑素瘤細胞的影響，對其調(diào)控機制進行了初步探討。將來自同一原瓶的小鼠B16黑素瘤細胞或正常人黑素細胞轉(zhuǎn)種至96孔板，調(diào)節(jié)細胞初始接種濃度為5*10~5個／ml左右。小鼠B16黑素瘤細胞接種24小時，正常人黑素細胞接種48小時后，用添加維甲酸及其它藥物的新鮮培養(yǎng)基換液一次。繼續(xù)孵育72小時后檢測酪氨酸酶活性、黑素含量和黑素細胞增殖率。 實驗結(jié)果顯示：維甲酸在較高濃度(＞500μmol／L)可以下調(diào)酪氨酸酶活性和黑素含量，對細胞無明顯毒性作用，同時還有促進黑素細胞增殖的作用。較高濃度的維甲酸(＞500μmol／L)與氫醌可以互相協(xié)同，增強彼此下調(diào)酪氨酸 醫(yī)學系2000級碩士研究生學位論文 酶活性和黑素含量的作用，而且維甲酸還可以減輕氫酮對細胞增殖的抑制作 用，達到了保護細胞免受傷害的效果，使作用更加安全有效。若將維甲酸以 適當濃度與氫醒混合外用，對于色素沉著性疾病可能會有較好療效，但尚有 待臨床研究的進一步證實。維甲酸對TPA、IBMX、CT提高小鼠B16黑素瘤細 胞酪氨酸酶活性和黑素含量的作用有輕微的抑制，在1000 p Inol/L以上時與 IB袱和CT的協(xié)同促增殖作用較強。雖然我們做的是細胞和蛋白水平的研究， 但不同于氫酮的作用機制，維甲酸很可能是通過基因水平的調(diào)節(jié)而發(fā)揮作用 的。維甲酸很可能是與核受體(RAR)結(jié)合后通過以下三條信號轉(zhuǎn)導途徑調(diào)節(jié) 黑素細胞增殖和黑素生成，即二酷酞甘油/蛋白激酶C(DAG/PKC)途徑、環(huán) 磷酸腺昔/蛋白激酶A(c AMP/PKA)途徑和絲裂原激活的蛋白激酶(做PK)級 聯(lián)途徑。而維甲酸對黑素細胞的具體基因調(diào)控機制還有待于進一步的研究。
【學位授予單位】：天津醫(yī)科大學
【學位級別】：碩士
【學位授予年份】：2002
【分類號】：R751

【引證文獻】

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1 董紅賓;熊果苷微乳的研制[D];西北農(nóng)林科技大學;2007年

本文編號：2726597