【摘要】： 第一章：2003—2006年南京地區(qū)淋球菌分離株抗生素敏感性監(jiān)測 目的監(jiān)測南京地區(qū)淋球菌對抗生素的耐藥性，分析2003-2006年淋球菌耐藥現(xiàn)狀。方法采用紙片酸度定量法測定菌株是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶。采用瓊脂稀釋法測定青霉素、四環(huán)素、環(huán)丙沙星、大觀霉素和頭孢曲松對淋球菌的最小抑菌濃度(MIC)。結(jié)果共檢測了791株淋球菌，產(chǎn)青霉素酶淋球菌(PPNG)的陽性率每年維持在42.23％-57.36％之間，質(zhì)粒介導(dǎo)的耐四環(huán)素淋球菌(TRNG)的陽性率由2003年的19.47％(37／190)上升到2006年的32.82％(65／198)。在非PPNG中，染色體介導(dǎo)的青霉素耐藥菌株的陽性率介于57.84％～87.27％。耐環(huán)丙沙星淋球菌的陽性率介于97.89％～99.51％，未檢出對頭孢曲松耐藥的淋球菌，每年的低敏菌株比例處于30.58％-57.89％之間。每年均檢出1-2株對大觀霉素耐藥的菌株，共6株。結(jié)論南京地區(qū)分離的淋球菌中，PPNG比例維持在較高水平，TRNG的陽性率快速增長，染色體介導(dǎo)的耐青霉素和環(huán)丙沙星淋球菌的比例很高，偶見大觀霉素耐藥的淋球菌。頭孢曲松和大觀霉素為治療淋病的有效藥物。 第二章1999—2006年南京地區(qū)四環(huán)素高度耐藥淋球菌tetM基因基因分型研究 目的了解南京地區(qū)四環(huán)素高度耐藥淋球菌(TRNG)tetM基因的分子流行病學(xué)情況。方法采用瓊脂稀釋法檢測菌株是否為TRNG，采用紙片酸度定量法測定菌株是否產(chǎn)β-內(nèi)酰胺酶。采用單管PCR方法對TRNG陽性菌株作tetM基因分型。結(jié)果1999—2006年間南京地區(qū)1208株淋球菌中共檢出260株(21.52％)TRNG，其中68.08％(177／260)的TRNG亦為β-內(nèi)酰胺酶陽性菌株，即為PPNG／TRNG，TRNG的陽性率逐年增高。TetM基因分型結(jié)果顯示，荷蘭變型為258株，美國變型僅2株。結(jié)論：南京地區(qū)流行的TRNG以荷蘭型tetM基因?yàn)橹?99.23％)，美國型僅為偶發(fā)。 第三章1999-2006年南京地區(qū)淋球菌青霉素耐藥性及耐藥質(zhì)�；蛐脱芯� 目的了解南京地區(qū)淋球菌青霉素耐藥狀況，了解產(chǎn)青霉素酶淋球菌(PPNG)的質(zhì)�；蛐偷牧餍星闆r。方法采用瓊脂稀釋法檢測淋球菌對青霉素的最小抑菌濃度(MIC)，采用紙片酸度定量法檢測菌株是否產(chǎn)青霉素酶。采用單管PCR方法對PPNG耐藥質(zhì)粒進(jìn)行基因分型。結(jié)果8年間共檢測了1208株淋球菌，青霉素總耐藥率為84.02％(1015／1208)。染色體介導(dǎo)的耐青霉素淋球菌(CMRNG)占45.53％(550／1208)。PPNG占38.49％(465／1208)，其中177(38.06％)株同時為質(zhì)粒介導(dǎo)的耐四環(huán)素淋球菌，即PP／TRNG。PPNG陽性率自1999(8.04％)年起逐年增加，至2004達(dá)最高(57.36％)，2005、2006年略有下降。質(zhì)粒PCR分型結(jié)果顯示，所測菌株均攜帶亞洲型質(zhì)粒。結(jié)論南京地區(qū)CMRNG始終維持在較高水平，PPNG近年增加較快，攜帶亞洲型質(zhì)粒的PPNG在南京地區(qū)流行，未發(fā)現(xiàn)其它類型的質(zhì)粒。 第四章淋球菌對大觀霉素耐藥機(jī)制的初步研究 目的檢測導(dǎo)致大觀霉素耐藥的淋球菌16S rRNA基因中的突變位點(diǎn)。方法將6株大觀霉素耐藥淋球菌(MIC≥128μg／mL)、2株大觀霉素MIC32μg／mL淋球菌、2株大觀霉素MIC 16μg／mL的淋球菌的16S rRNA基因進(jìn)行DNA擴(kuò)增、測序分析，尋找致淋球菌大觀霉素耐藥的突變基因。結(jié)果6株大觀霉素耐藥淋球菌株的16S rRNA基因均發(fā)生了突變，其中2株(MIC＞256μg／mL)為C1192T突變，1株(MIC256μg／mL)為C1344T、T1345A突變，1株(MIC256μg／mL)為T990G、T991C突變，1株(MIC128μg／mL)為T990G、G1343C、C1344T突變，1株(MIC1281μg／mL)為T991C突變。大觀霉素敏感的菌株均未發(fā)現(xiàn)突變。結(jié)論淋球菌16S rRNA基因不同位點(diǎn)突變可能導(dǎo)致大觀霉素不同程度的耐藥，C1192T突變可能導(dǎo)致高度耐藥，其它單一位點(diǎn)或多位點(diǎn)突變可能導(dǎo)致不同程度的耐藥。 第五章頭孢曲松低敏的淋球菌中PBP2氨基酸替代或插入模式研究 目的檢測頭孢曲松敏感性下降的淋球菌青霉素結(jié)合蛋白2(PBP2)的鑲嵌狀結(jié)構(gòu)模式，探討該模式是否與淋球菌對頭孢曲松敏感性降低有關(guān)。方法將11株頭孢曲松低敏和2株頭孢曲松敏感的淋球菌penA基因全基因測序，通過BLASTN與BLASTX分析，研究penA基因的堿基插入和置換情況及PBP2中氨基酸插入和置換模式。結(jié)果13株淋球菌的penA基因中有多個堿基置換或插入，PBP2中共發(fā)現(xiàn)5種模式的氨基酸插入或置換模式，沒有發(fā)現(xiàn)PBP2鑲嵌狀結(jié)構(gòu)模式。結(jié)論P(yáng)BP2的鑲嵌狀結(jié)構(gòu)可能與頭孢曲松敏感性下降無關(guān)，可能還有其它因素導(dǎo)致淋球菌對頭孢曲松低敏。
【學(xué)位授予單位】：中國協(xié)和醫(yī)科大學(xué)
【學(xué)位級別】：博士
【學(xué)位授予年份】：2007
【分類號】：R759.2
【圖文】：

中國協(xié)和醫(yī)科人學(xué)博1學(xué)位論文圖1、標(biāo)準(zhǔn)質(zhì)粒、WHO標(biāo)準(zhǔn)PPNG菌株及部分PPNG擴(kuò)增產(chǎn)物電泳分析圖1:第l泳道陰性對照;2:06年37:3:03年20;4:PJD7;5:05年12;6:02年 3;7:IkbMarker;8:PJDS;9:PJD4;10:WHOJ;表1南京地區(qū)1999一2006染色體介導(dǎo)的淋球菌對青霉素的耐藥性*年檢測菌株數(shù)不同敏感性范疇的菌株數(shù)與比例 (%)MIC(林創(chuàng)山L)敏感低敏耐藥MIC:〔，MIC，，MIC范圍 1999103037(35.92)66(64.08)120.03一4 200082010(12.20)72(87.80)240

【參考文獻(xiàn)】

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本文編號：2725702